Efeito de Komagataella phaffi sobre os níveis de anticorpos em camundongos imunossuprimidos com ciclofosfamida e vacinados com antígenos recombinantes de Clostridium botulinum e Clostridium perfringens

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Hoerlle, Ellen Luíse Vaghetti
Data de Publicação: 2023
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional da UFPel - Guaiaca
Texto Completo: http://guaiaca.ufpel.edu.br/xmlui/handle/prefix/13824
Resumo: Muitos probióticos potencializam a resposta imune dos seus hospedeiros, efeito benéfico desejável, principalmente para imunossuprimidos. Komagataella phaffii vêm demonstrando propriedades probióticas, como melhora da conversão alimentar, aumento do ganho de peso e da soroconversão e efeito antimicrobiano em animais. Além disso, mostrou-se segura para animais imunossuprimidos e os protegeu da leucopenia, neutropenia, peroxidação lipídica e da hepatotoxidade induzidas pela ciclofosfamida (CF). Assim, o objetivo do presente estudo foi avaliar o efeito da suplementação com Komagataella phaffii de camundongos Swiss imunossuprimidos com CF e vacinados com as proteínas recombinantes rD de Clostridium botulinum, e rCPA-C e rCPB de Clostridium perfringens, como antigenos vacinais modelos, sobre os níveis de anticorpos, avaliados por ELISA indireto. Para tal fim, 36 camundongos machos Swiss com 28 dias de idade (divididos em duas repetições) foram dividos em três grupos: grupo somente vacinado (V), grupo imunossuprimido com CF (250mg. kgˉ¹ em duas doses) e vacinado (CF + V) e grupo suplementado com Komagataella phaffii, imunossuprimido com CF e vacinado (CF + K + V). Todos os animais dos três grupos foram imunizados, via subcutânea, com uma única dose de uma vacina polivalente composta de 25 µg de cada uma das três proteínas recombinantes (rCPA-C, rCPB e rD) no dia 19 e animais do grupo CF + K + V receberam suplementação diária, por gavagem, de 10⁸ UFC de Komagataella phaffii por animal, durante todo o experimento (47 dias). Animais não suplementados e não imunossuprimidos receberam solução salina pelas mesmas vias e períodos. Os níveis de anticorpos estimulados pelos imunizantes com cada uma das proteínas recombinantes foram avaliadas por ELISA indireto (7, 14, 21 e 28 dias após a vacinação). A suplementação com Komagataella phaffii demonstrou aprimorar a resposta imunológica na vacinação com rD dos animais imunossuprimidos, resultando em níveis mais elevados de IgG anti-rD em comparação aos animais vacinados sem suplementação, além de promover uma resposta imunológica mais rápida. No entanto, não teve efeito na resposta imunológica na vacinação de animais imunossuprimidos com rCPA-C e rCPB. Assim, conclui-se que Komagataella phaffii pode potencializar a resposta imune humoral de animais imunossuprimidos vacinados, entretanto a resposta parece ser imunógeno específica. Por fim, Komagataella phaffii apresenta-se não apenas como um excelente suplemento imunomodulador imunógeno específico, mas como fonte viável, segura, barata e promissora no setor de alimentos na indústria veterinária e humana, para animais ou pessoas saudáveis ou imunossuprimidos.
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spelling 2024-08-14T15:41:20Z2024-08-142024-08-14T15:41:20Z2023-03-03HOERLLE, Ellen Luíse Vaghetti. Efeito de Komagataella phaffi sobre os níveis de anticorpos em camundongos munossuprimidos com ciclofosfamida e vacinados com antígenos recombinantes de Clostridium botulinum e Clostridium perfringens. 2023, 89 f. (Mestrado em Nutrição e Alimentos) – Programa de Pós-Graduação em Nutrição e Alimentos, Faculdade de Nutrição, Universidade Federal de Pelotas, Pelotas – RS, 2023.http://guaiaca.ufpel.edu.br/xmlui/handle/prefix/13824Muitos probióticos potencializam a resposta imune dos seus hospedeiros, efeito benéfico desejável, principalmente para imunossuprimidos. Komagataella phaffii vêm demonstrando propriedades probióticas, como melhora da conversão alimentar, aumento do ganho de peso e da soroconversão e efeito antimicrobiano em animais. Além disso, mostrou-se segura para animais imunossuprimidos e os protegeu da leucopenia, neutropenia, peroxidação lipídica e da hepatotoxidade induzidas pela ciclofosfamida (CF). Assim, o objetivo do presente estudo foi avaliar o efeito da suplementação com Komagataella phaffii de camundongos Swiss imunossuprimidos com CF e vacinados com as proteínas recombinantes rD de Clostridium botulinum, e rCPA-C e rCPB de Clostridium perfringens, como antigenos vacinais modelos, sobre os níveis de anticorpos, avaliados por ELISA indireto. Para tal fim, 36 camundongos machos Swiss com 28 dias de idade (divididos em duas repetições) foram dividos em três grupos: grupo somente vacinado (V), grupo imunossuprimido com CF (250mg. kgˉ¹ em duas doses) e vacinado (CF + V) e grupo suplementado com Komagataella phaffii, imunossuprimido com CF e vacinado (CF + K + V). Todos os animais dos três grupos foram imunizados, via subcutânea, com uma única dose de uma vacina polivalente composta de 25 µg de cada uma das três proteínas recombinantes (rCPA-C, rCPB e rD) no dia 19 e animais do grupo CF + K + V receberam suplementação diária, por gavagem, de 10⁸ UFC de Komagataella phaffii por animal, durante todo o experimento (47 dias). Animais não suplementados e não imunossuprimidos receberam solução salina pelas mesmas vias e períodos. Os níveis de anticorpos estimulados pelos imunizantes com cada uma das proteínas recombinantes foram avaliadas por ELISA indireto (7, 14, 21 e 28 dias após a vacinação). A suplementação com Komagataella phaffii demonstrou aprimorar a resposta imunológica na vacinação com rD dos animais imunossuprimidos, resultando em níveis mais elevados de IgG anti-rD em comparação aos animais vacinados sem suplementação, além de promover uma resposta imunológica mais rápida. No entanto, não teve efeito na resposta imunológica na vacinação de animais imunossuprimidos com rCPA-C e rCPB. Assim, conclui-se que Komagataella phaffii pode potencializar a resposta imune humoral de animais imunossuprimidos vacinados, entretanto a resposta parece ser imunógeno específica. Por fim, Komagataella phaffii apresenta-se não apenas como um excelente suplemento imunomodulador imunógeno específico, mas como fonte viável, segura, barata e promissora no setor de alimentos na indústria veterinária e humana, para animais ou pessoas saudáveis ou imunossuprimidos.Many probiotics potentiate the immune response of their hosts, a desirable beneficial effect, especially for immunosuppressed people. Komagataella phaffii have demonstrated probiotic properties, such as improved feed conversion, increased weight gain and seroconversion, and antimicrobial effect in animals. Furthermore, it proved to be safe for immunosuppressed animals and protected them from leukopenia, neutropenia, lipid peroxidation and hepatotoxicity induced by cyclophosphamide (CF). Thus, the aim of the present study was to evaluate the effect of supplementation with Komagataella phaffii from Swiss mice immunosuppressed with CF and vaccinated with the recombinant proteins rD from Clostridium botulinum, and rCPA-C and rCPB from Clostridium perfringens, as model vaccine antigens, on the antibody levels, assessed by indirect ELISA. For this purpose, 36 male Swiss mice aged 28 days (divided into two replicates) were divided into three groups: vaccinated-only group (V), immunosuppressed group with CF (250mg. kgˉ¹ in two doses) and vaccinated (CF + V ) and group supplemented with Komagataella phaffii, immunosuppressed with CF and vaccinated (CF + K + V). All animals in the three groups were immunized, subcutaneously, with a single dose of a polyvalent vaccine composed of 25 µg of each of the three recombinant proteins (rCPA-C, rCPB and rD) on day 19 and animals in the CF + K group + V received daily supplementation, by gavage, of 10⁸ CFU of Komagataella phaffii per animal, throughout the experiment (47 days). Non-supplemented and non immunosuppressed animals received saline solution by the same routes and periods. The levels of antibodies stimulated by the vaccines with each of the recombinant proteins were evaluated by indirect ELISA (7, 14, 21 and 28 days after vaccination). Supplementation with Komagataella phaffii has been shown to improve the immune response in immunosuppressed animals in rD vaccination, resulting in higher levels of anti-rD IgG compared to animals vaccinated without supplementation, in addition to promoting a faster immune response. However, it had no effect on the immune response to vaccination of immunosuppressed animals with rCPA-C and rCPB. Finally, Komagataella phaffii presents itself not only as an excellent specific immunomodulatory supplement, but as a viable, safe, cheap and promising source in the food sector in the veterinary and human industry, for healthy or immunosuppressed animals or people.Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPESporUniversidade Federal de PelotasPrograma de Pós-Graduação em Nutrição e AlimentosUFPelBrasilCC BY-NC-SAinfo:eu-repo/semantics/openAccessCIENCIAS DA SAUDENUTRICAOProbióticoPichia pastorisResposta imuneImunomodulação ELISA indiretoProbioticPichia pastorisImmune responseImmunomodulation indirect ELISAEfeito de Komagataella phaffi sobre os níveis de anticorpos em camundongos imunossuprimidos com ciclofosfamida e vacinados com antígenos recombinantes de Clostridium botulinum e Clostridium perfringensEffect of Komagataella phaffi on antibody levels in mice immunosuppressed with cyclophosphamide and vaccinated with recombinant Clostridium botulinum and Clostridium perfringens antigensinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesishttp://lattes.cnpq.br/3552627036002625http://lattes.cnpq.br/4372816355102243Conceição, Fabrício Rochedohttp://lattes.cnpq.br/9342312279387017Moreira, Ângela NunesHoerlle, Ellen Luíse Vaghettireponame:Repositório Institucional da UFPel - Guaiacainstname:Universidade Federal de Pelotas (UFPEL)instacron:UFPELORIGINAL[05]-2548761_Dissertacao_Ellen_Luise_Vaghetti_Hoerlle.pdf[05]-2548761_Dissertacao_Ellen_Luise_Vaghetti_Hoerlle.pdfapplication/pdf895322http://guaiaca.ufpel.edu.br/xmlui/bitstream/prefix/13824/1/%5b05%5d-2548761_Dissertacao_Ellen_Luise_Vaghetti_Hoerlle.pdfecb98891b9da6ab5485b18950a868525MD51open accessLICENSElicense.txtlicense.txttext/plain; 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