Expressão heteróloga, purificação e caracterização de proteínas transmembrana de Mycoplasma hyopneumoniae

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Marchioro, Silvana Beutinger
Data de Publicação: 2008
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional da UFPel - Guaiaca
Texto Completo: http://guaiaca.ufpel.edu.br/handle/123456789/1262
Resumo: Mycoplasma hyopneumoniae is the etiological agent of swine enzootic pneumonia (EP), one the most common respiratory diseases of pigs worldwide. The disease is characterized by retarded growth rate in animals of mid-finishing to slaughter age, causing significant economic losses to swine production. Vaccination is the most cost-effective strategy for the control of this disease. However, the vaccines against the disease available on the market have a high production cost and only offer partial protection, not preventing the establishment from infection and the presence of pigs carriers. This issue highlights the need for the use of new strategies aiming at circumventing this problem. The recombinant DNA technology is an important tool for the development of vaccines. The publication of the sequence of three genomes of M. hyopneumoniae, two pathogenic strains (232 and 7448) and a non-pathogenic (J) is helping the researches, and accelerating the process of identification of new antigenic proteins. From the sequence data and proteomic analysis, it was possible to identify coding sequences (CDS) of transmembrane proteins. These antigens were cloned and expressed using E. coli as an expression system. A total of seven recombinant proteins were purified and evaluated regarding immunogenicity in mice and antigenicity with sera from animals with EP. All the antigens evaluated were able to induce a significant immune response in mice. The evaluation of antigenicity properties revealed the proteins reacted with sera from pigs infected with M. hyopneumoniae. The recombinant proteins evaluated in this study may be of value to use in the development of vaccines and tests for immunodiagnosis of swine enzootic pneumonia.
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This issue highlights the need for the use of new strategies aiming at circumventing this problem. The recombinant DNA technology is an important tool for the development of vaccines. The publication of the sequence of three genomes of M. hyopneumoniae, two pathogenic strains (232 and 7448) and a non-pathogenic (J) is helping the researches, and accelerating the process of identification of new antigenic proteins. From the sequence data and proteomic analysis, it was possible to identify coding sequences (CDS) of transmembrane proteins. These antigens were cloned and expressed using E. coli as an expression system. A total of seven recombinant proteins were purified and evaluated regarding immunogenicity in mice and antigenicity with sera from animals with EP. All the antigens evaluated were able to induce a significant immune response in mice. The evaluation of antigenicity properties revealed the proteins reacted with sera from pigs infected with M. hyopneumoniae. The recombinant proteins evaluated in this study may be of value to use in the development of vaccines and tests for immunodiagnosis of swine enzootic pneumonia.Mycoplasma hyopneumoniae é o agente etiológico da pneumonia enzoótica suína (PES), uma das doenças respiratórias de suíno mais comum em todo o mundo. Ela é caracterizada por retardo no desenvolvimento em animais na fase de crescimento e terminação, causando perdas econômicas consideráveis na indústria suinícola. A vacinação parece ser a forma mais efetiva de controlar a PES, entretanto, as vacinas contra a doença disponíveis no mercado apresentam um elevado custo de produção e conferem uma proteção parcial, não impedindo o estabelecimento da infecção e nem a presença de suínos portadores. Desta forma, surge à necessidade da utilização de novas estratégias visando contornar este problema. A tecnologia do DNA recombinante constitui uma ferramenta importante para o desenvolvimento de vacinas. As publicações das seqüências de três genomas de M. hyopneumoniae, duas cepas patogênicas (232 e 7448) e uma não patogênica (J) estão contribuindo com pesquisas e, acelerando o processo de identificação de novas proteínas imunogênicas. A partir dos dados gerados e da análise proteômica complementar, foi possível a identificação de seqüências codificadoras (CDS) de proteínas transmembrana. Estas seqüências foram clonadas e expressas em E. coli. Um total de sete proteínas recombinantes foram purificadas e avaliadas quanto à imunogenicidade em camundongos e à antigenicidade frente a soros de suínos com PES. Todas as proteínas avaliadas foram capazes de induzir uma resposta imune significativa em camundongos. O estudo das propriedades antigênicas revelou que estas são reconhecidas pelo soro de suínos infectados com M. hyopneumoniae. As proteínas recombinantes avaliadas neste estudo poderão ser de valia para utilização como vacinas de subunidade e em testes de imunodiagnóstico da PES.application/pdfporUniversidade Federal de PelotasPrograma de Pós-Graduação em BiotecnologiaUFPelBRBiotecnologiaBiotechnologyMycoplasma hyopneumoniaeSwine enzootic pneumoniaVaccineRecombinant proteinBiotecnologiaMycoplasma hyopneumoniaePESVacinasProteínas recombinantesCNPQ::CIENCIAS AGRARIAS::MEDICINA VETERINARIA::MEDICINA VETERINARIA PREVENTIVA::SAUDE ANIMAL (PROGRAMAS SANITARIOS)Expressão heteróloga, purificação e caracterização de proteínas transmembrana de Mycoplasma hyopneumoniaeHeterologous expression, purification and characterization of transmembrane protein of Mycoplasma hyopneumoniaeinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesishttp://lattes.cnpq.br/2125580637101049http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4723107D9Conceição, Fabrício Rochedohttp://lattes.cnpq.br/9342312279387017Dellagostin, Odir AntônioMarchioro, Silvana Beutingerinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Institucional da UFPel - Guaiacainstname:Universidade Federal de Pelotas (UFPEL)instacron:UFPELORIGINALdissertacao_silvana_marchioro.pdfapplication/pdf699240http://guaiaca.ufpel.edu.br/xmlui/bitstream/123456789/1262/1/dissertacao_silvana_marchioro.pdf32b6c311c57b68941cfdd0ee832643a1MD51open accessTEXTdissertacao_silvana_marchioro.pdf.txtdissertacao_silvana_marchioro.pdf.txtExtracted Texttext/plain103410http://guaiaca.ufpel.edu.br/xmlui/bitstream/123456789/1262/2/dissertacao_silvana_marchioro.pdf.txt0db8468ccb4748ca7bf8dea44b7c5c11MD52open accessTHUMBNAILdissertacao_silvana_marchioro.pdf.jpgdissertacao_silvana_marchioro.pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg1728http://guaiaca.ufpel.edu.br/xmlui/bitstream/123456789/1262/3/dissertacao_silvana_marchioro.pdf.jpg9c30f54ab6115ad5d5b95755ef2457b5MD53open access123456789/12622019-08-23 10:23:55.609open accessoai:guaiaca.ufpel.edu.br:123456789/1262Repositório InstitucionalPUBhttp://repositorio.ufpel.edu.br/oai/requestrippel@ufpel.edu.br || repositorio@ufpel.edu.br || aline.batista@ufpel.edu.bropendoar:2019-08-23T13:23:55Repositório Institucional da UFPel - Guaiaca - Universidade Federal de Pelotas (UFPEL)false
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