Identificação de novos antígenos para diagnóstico sorológico de leptospirose canina

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Timm, Gabriana Nathália Rosa
Data de Publicação: 2020
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional da UFPel - Guaiaca
Texto Completo: http://guaiaca.ufpel.edu.br/handle/prefix/8788
Resumo: A leptospirose é uma zoonose negligenciada com distribuição mundial. É causada por bactérias patogênicas do gênero Leptospira. Este patógeno adentra no hospedeiro através de mucosas ou abrasões na pele, e sua transmissão pode ocorrer através do contato direto com animais infectados ou indireto com a água ou solos contaminados. A única vacina disponível comercialmente consiste em bactérias inativadas, possui diversas limitações e é de uso majoritariamente veterinário. Cães são potenciais disseminadores do patógeno em ambientes urbanos, oferecendo risco aos seres humanos. A leptospirose canina pode se manifestar com febre, calafrios, uveíte, lesões renais e hepáticas, dentre outros sinais. O diagnóstico laboratorial apresenta dificuldades, pois os métodos disponíveis atualmente não são rápidos e fáceis de serem aplicados em uma situação endêmica. Estes métodos são fastidiosos, de alto custo e, muitas vezes, de baixa sensibilidade. Com isso, o real peso da leptospirose no mundo é preocupantemente subestimado. Em vista dos argumentos apresentados, é de extrema importância o desenvolvimento de um teste diagnóstico sensível e específico, de fácil e rápida execução e capaz de detectar a doença em sua fase inicial. Proteínas de membrana externa são amplamente estudadas nos ramos de vacinologia e diagnóstico. Neste trabalho, oito novas proteínas recombinantes identificadas por bioinformática foram produzidas e avaliadas como potenciais alvos no desenvolvimento de um teste de ELISA indireto utilizando soros caninos. A proteína OmpL125, no ELISA-IgM, apresentou 90,9% de sensibilidade e 78,2% de especificidade; e, no ELISA-IgG, apresentou 81,8% de sensibilidade e 73,9% de especificidade, sendo os melhores resultados entre as proteínas testadas. Estes valores não são satisfatórios para um novo método diagnóstico comercial. Tendo em vista os aspectos observados, esses testes sorológicos não se mostram promissores e reproduzíveis para diagnóstico de leptospirose.
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spelling 2022-11-10T11:41:24Z2022-11-092022-11-10T11:41:24Z2020-02-14TIMM, Gabriana Nathália Rosa. Identificação de novos antígenos para diagnóstico sorológico de leptospirose canina. 2020. 75f. Dissertação (Mestrado em Biotecnologia) - Universidade Federal de Pelotas, Pelotas, 2020.http://guaiaca.ufpel.edu.br/handle/prefix/8788A leptospirose é uma zoonose negligenciada com distribuição mundial. É causada por bactérias patogênicas do gênero Leptospira. Este patógeno adentra no hospedeiro através de mucosas ou abrasões na pele, e sua transmissão pode ocorrer através do contato direto com animais infectados ou indireto com a água ou solos contaminados. A única vacina disponível comercialmente consiste em bactérias inativadas, possui diversas limitações e é de uso majoritariamente veterinário. Cães são potenciais disseminadores do patógeno em ambientes urbanos, oferecendo risco aos seres humanos. A leptospirose canina pode se manifestar com febre, calafrios, uveíte, lesões renais e hepáticas, dentre outros sinais. O diagnóstico laboratorial apresenta dificuldades, pois os métodos disponíveis atualmente não são rápidos e fáceis de serem aplicados em uma situação endêmica. Estes métodos são fastidiosos, de alto custo e, muitas vezes, de baixa sensibilidade. Com isso, o real peso da leptospirose no mundo é preocupantemente subestimado. Em vista dos argumentos apresentados, é de extrema importância o desenvolvimento de um teste diagnóstico sensível e específico, de fácil e rápida execução e capaz de detectar a doença em sua fase inicial. Proteínas de membrana externa são amplamente estudadas nos ramos de vacinologia e diagnóstico. Neste trabalho, oito novas proteínas recombinantes identificadas por bioinformática foram produzidas e avaliadas como potenciais alvos no desenvolvimento de um teste de ELISA indireto utilizando soros caninos. A proteína OmpL125, no ELISA-IgM, apresentou 90,9% de sensibilidade e 78,2% de especificidade; e, no ELISA-IgG, apresentou 81,8% de sensibilidade e 73,9% de especificidade, sendo os melhores resultados entre as proteínas testadas. Estes valores não são satisfatórios para um novo método diagnóstico comercial. Tendo em vista os aspectos observados, esses testes sorológicos não se mostram promissores e reproduzíveis para diagnóstico de leptospirose.Leptospirosis is a neglected zoonosis with a worldwide distribution. It is caused by pathogenic bacteria belonging to the genus Leptospira. This pathogen enters the host through the mucous membranes or skin abrasions and can be transmitted by direct contact with infected animals or indirect contact with contaminated water and soil. The only commercially available vaccines are based on inactivated bacteria, they have several limitations and are mainly for veterinary use. Dogs are potential disseminators of the pathogen in urban environments, representing a risk to human beings. Canine leptospirosis can manifest as fever, chills, uveitis, kidney and liver damage, among other signs. Laboratory diagnosis is limited; the available methods take time and are not easily applied in an endemic setting. In addition, diagnosis tends to be laborious, expensive and often has poor sensitivity. Thus, the true global burden of leptospirosis is worryingly underestimated. Therefore, it is extremely important to develop a diagnostic assay that is sensitive, specific, easy and quick to perform and that is able to detect the disease in its early phase. Outer membrane proteins are widely studied in the fields of vaccinology and diagnosis. In this work, eight novel recombinant proteins identified by bioinformatics were produced and evaluated as potential targets for the development of an indirect ELISA using canine sera. Amongst them, OmpL125 protein, in an ELISA-IgM, presented 90,9% sensitivity and 78,2% specificity; and in an ELISA-IgG presented 81,8% sensitivity and 73,9% specificity, with these being the best results among the analyzed proteins. These results are not suitable for a new commercial diagnostic method. These serological tests are neither satisfactory nor reproducible for the diagnosis of canine leptospirosis.Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPESporUniversidade Federal de PelotasPrograma de Pós-Graduação em BiotecnologiaUFPelBrasilCentro de Desenvolvimento TecnológicoCNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::PARASITOLOGIALeptospiroseProteína recombinanteDiagnósticoELISASorologiaLeptospirosisRecombinant proteinDiagnosisSerologyIdentificação de novos antígenos para diagnóstico sorológico de leptospirose caninaIdentification of new antigens for serological diagnosis of canine leptospirosisinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesishttp://lattes.cnpq.br/6957288018994165http://lattes.cnpq.br/2992146566426154Félix, Carolina Rodrigueshttp://lattes.cnpq.br/6277555029608826McBride, Alan John AlexanderTimm, Gabriana Nathália RosaTIMM, Gabriana Nathália Rosa. Identificação de novos antígenos para diagnóstico sorológico de leptospirose canina. 2020. 75f. Dissertação (Mestrado em Biotecnologia) - Centro de Desenvolvimento Tecnológico. Universidade Federal de Pelotas, Pelotas, 2020.info:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Institucional da UFPel - Guaiacainstname:Universidade Federal de Pelotas (UFPEL)instacron:UFPELTEXTDissertacao_Gabriana_Nathalia_Rosa_Timm.pdf.txtDissertacao_Gabriana_Nathalia_Rosa_Timm.pdf.txtExtracted texttext/plain121277http://guaiaca.ufpel.edu.br/xmlui/bitstream/prefix/8788/6/Dissertacao_Gabriana_Nathalia_Rosa_Timm.pdf.txtcebf9b01580960b115bdf490289de9ebMD56open accessTHUMBNAILDissertacao_Gabriana_Nathalia_Rosa_Timm.pdf.jpgDissertacao_Gabriana_Nathalia_Rosa_Timm.pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg1328http://guaiaca.ufpel.edu.br/xmlui/bitstream/prefix/8788/7/Dissertacao_Gabriana_Nathalia_Rosa_Timm.pdf.jpg85ee46125d5cdb1b998773a1eb226572MD57open accessORIGINALDissertacao_Gabriana_Nathalia_Rosa_Timm.pdfDissertacao_Gabriana_Nathalia_Rosa_Timm.pdfapplication/pdf6738829http://guaiaca.ufpel.edu.br/xmlui/bitstream/prefix/8788/1/Dissertacao_Gabriana_Nathalia_Rosa_Timm.pdfc2a1cd71b8a090ab07f2b811e53593a3MD51open accessCC-LICENSElicense_urllicense_urltext/plain; charset=utf-849http://guaiaca.ufpel.edu.br/xmlui/bitstream/prefix/8788/2/license_url4afdbb8c545fd630ea7db775da747b2fMD52open accesslicense_textlicense_texttext/html; charset=utf-80http://guaiaca.ufpel.edu.br/xmlui/bitstream/prefix/8788/3/license_textd41d8cd98f00b204e9800998ecf8427eMD53open accesslicense_rdflicense_rdfapplication/rdf+xml; charset=utf-80http://guaiaca.ufpel.edu.br/xmlui/bitstream/prefix/8788/4/license_rdfd41d8cd98f00b204e9800998ecf8427eMD54open accessLICENSElicense.txtlicense.txttext/plain; charset=utf-81866http://guaiaca.ufpel.edu.br/xmlui/bitstream/prefix/8788/5/license.txt43cd690d6a359e86c1fe3d5b7cba0c9bMD55open accessprefix/87882023-07-17 21:18:54.726open accessoai:guaiaca.ufpel.edu.br:prefix/8788TElDRU7Dh0EgREUgRElTVFJJQlVJw4fDg08gTsODTy1FWENMVVNJVkEKCkNvbSBhIGFwcmVzZW50YcOnw6NvIGRlc3RhIGxpY2Vuw6dhLCB2b2PDqiAobyBhdXRvciAoZXMpIG91IG8gdGl0dWxhciBkb3MgZGlyZWl0b3MgZGUgYXV0b3IpIGNvbmNlZGUgYW8gUmVwb3NpdMOzcmlvIApJbnN0aXR1Y2lvbmFsIG8gZGlyZWl0byBuw6NvLWV4Y2x1c2l2byBkZSByZXByb2R1emlyLCAgdHJhZHV6aXIgKGNvbmZvcm1lIGRlZmluaWRvIGFiYWl4byksIGUvb3UgZGlzdHJpYnVpciBhIApzdWEgcHVibGljYcOnw6NvIChpbmNsdWluZG8gbyByZXN1bW8pIHBvciB0b2RvIG8gbXVuZG8gbm8gZm9ybWF0byBpbXByZXNzbyBlIGVsZXRyw7RuaWNvIGUgZW0gcXVhbHF1ZXIgbWVpbywgaW5jbHVpbmRvIG9zIApmb3JtYXRvcyDDoXVkaW8gb3UgdsOtZGVvLgoKVm9jw6ogY29uY29yZGEgcXVlIG8gRGVwb3NpdGEgcG9kZSwgc2VtIGFsdGVyYXIgbyBjb250ZcO6ZG8sIHRyYW5zcG9yIGEgc3VhIHB1YmxpY2HDp8OjbyBwYXJhIHF1YWxxdWVyIG1laW8gb3UgZm9ybWF0byAKcGFyYSBmaW5zIGRlIHByZXNlcnZhw6fDo28uCgpWb2PDqiB0YW1iw6ltIGNvbmNvcmRhIHF1ZSBvIERlcG9zaXRhIHBvZGUgbWFudGVyIG1haXMgZGUgdW1hIGPDs3BpYSBkZSBzdWEgcHVibGljYcOnw6NvIHBhcmEgZmlucyBkZSBzZWd1cmFuw6dhLCBiYWNrLXVwIAplIHByZXNlcnZhw6fDo28uCgpWb2PDqiBkZWNsYXJhIHF1ZSBhIHN1YSBwdWJsaWNhw6fDo28gw6kgb3JpZ2luYWwgZSBxdWUgdm9jw6ogdGVtIG8gcG9kZXIgZGUgY29uY2VkZXIgb3MgZGlyZWl0b3MgY29udGlkb3MgbmVzdGEgbGljZW7Dp2EuIApWb2PDqiB0YW1iw6ltIGRlY2xhcmEgcXVlIG8gZGVww7NzaXRvIGRhIHN1YSBwdWJsaWNhw6fDo28gbsOjbywgcXVlIHNlamEgZGUgc2V1IGNvbmhlY2ltZW50bywgaW5mcmluZ2UgZGlyZWl0b3MgYXV0b3JhaXMgCmRlIG5pbmd1w6ltLgoKQ2FzbyBhIHN1YSBwdWJsaWNhw6fDo28gY29udGVuaGEgbWF0ZXJpYWwgcXVlIHZvY8OqIG7Do28gcG9zc3VpIGEgdGl0dWxhcmlkYWRlIGRvcyBkaXJlaXRvcyBhdXRvcmFpcywgdm9jw6ogZGVjbGFyYSBxdWUgCm9idGV2ZSBhIHBlcm1pc3PDo28gaXJyZXN0cml0YSBkbyBkZXRlbnRvciBkb3MgZGlyZWl0b3MgYXV0b3JhaXMgcGFyYSBjb25jZWRlciBhbyBEZXBvc2l0YSBvcyBkaXJlaXRvcyBhcHJlc2VudGFkb3MgCm5lc3RhIGxpY2Vuw6dhLCBlIHF1ZSBlc3NlIG1hdGVyaWFsIGRlIHByb3ByaWVkYWRlIGRlIHRlcmNlaXJvcyBlc3TDoSBjbGFyYW1lbnRlIGlkZW50aWZpY2FkbyBlIHJlY29uaGVjaWRvIG5vIHRleHRvIApvdSBubyBjb250ZcO6ZG8gZGEgcHVibGljYcOnw6NvIG9yYSBkZXBvc2l0YWRhLgoKQ0FTTyBBIFBVQkxJQ0HDh8ODTyBPUkEgREVQT1NJVEFEQSBURU5IQSBTSURPIFJFU1VMVEFETyBERSBVTSBQQVRST0PDjU5JTyBPVSBBUE9JTyBERSBVTUEgQUfDik5DSUEgREUgRk9NRU5UTyBPVSBPVVRSTyAKT1JHQU5JU01PLCBWT0PDiiBERUNMQVJBIFFVRSBSRVNQRUlUT1UgVE9ET1MgRSBRVUFJU1FVRVIgRElSRUlUT1MgREUgUkVWSVPDg08gQ09NTyBUQU1Cw4lNIEFTIERFTUFJUyBPQlJJR0HDh8OVRVMgCkVYSUdJREFTIFBPUiBDT05UUkFUTyBPVSBBQ09SRE8uCgpPIERlcG9zaXRhIHNlIGNvbXByb21ldGUgYSBpZGVudGlmaWNhciBjbGFyYW1lbnRlIG8gc2V1IG5vbWUgKHMpIG91IG8ocykgbm9tZShzKSBkbyhzKSBkZXRlbnRvcihlcykgZG9zIGRpcmVpdG9zIAphdXRvcmFpcyBkYSBwdWJsaWNhw6fDo28sIGUgbsOjbyBmYXLDoSBxdWFscXVlciBhbHRlcmHDp8OjbywgYWzDqW0gZGFxdWVsYXMgY29uY2VkaWRhcyBwb3IgZXN0YSBsaWNlbsOnYS4KRepositório InstitucionalPUBhttp://repositorio.ufpel.edu.br/oai/requestrippel@ufpel.edu.br || repositorio@ufpel.edu.br || aline.batista@ufpel.edu.bropendoar:2023-07-18T00:18:54Repositório Institucional da UFPel - Guaiaca - Universidade Federal de Pelotas (UFPEL)false
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