Identificação de precursores de mastócitos na medula óssea e no sangue periférico de roedores

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Grodzki, Ana Cristina Gonçalves
Data de Publicação: 1999
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional da UFPR
Texto Completo: https://hdl.handle.net/1884/78162
Resumo: Orientadora: Prof.ª Dr.ª Maria Célia Jamur
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spelling Grodzki, Ana Cristina GonçalvesUniversidade Federal do Paraná. Setor de Ciências Biológicas. Programa de Pós-Graduação em Biologia Celular e MolecularJamur, Maria Celia2022-09-22T18:06:41Z2022-09-22T18:06:41Z1999https://hdl.handle.net/1884/78162Orientadora: Prof.ª Dr.ª Maria Célia JamurDissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Curso de Pós-Graduação em MorfologiaInclui referências: p. 48-55Área de concentração: Biologia CelularResumo: Estudos sobre a maturação de mastócitos têm sido dificultados pela falta de marcadores específicos para mastócitos e os mastócitos imaturos não podem ser identificados apenas pelas suas características morfológicas. Os mastócitos imaturos não apresentam grânulos citoplasmáticos típicos de mastócitos e possuem características morfológicas semelhantes a outros tipos celulares. No presente estudo, mastócitos derivados da medula óssea de ratos e camundongos foram identificados e caracterizados por métodos imunoquímicos. A análise por citometria de fluxo e a contagem direta de células isoladas imunomagneticamente ou imunomarcadas, mostram que os mastócitos representam aproximadamente 2,4% da população total de células da medula óssea. Com a conjugação a esferas magnéticas de anticorpos monoclonais (mAbs) específicos para mastócitos, mAb BGD6 e mAb AA4, foi possível isolar uma população pura de mastócitos da medula óssea. Mastócitos em três distintos estágios de maturação foram identificados: maduro, imaturo e bem imaturo. Estas células têm o seu tamanho variando entre 3 e 13 um e são imunomarcadas positivamente pelo mAb AA4 e pelo mAb BGD6. Elas também são positivas para o receptor de alta afinidade para IgE, IgE e c-kit. Utilizando isolamento sequencial com o mAb AA4 seguido pelo mAb BGD6, um precursor comprometido com a linhagem de mastócitos também pode ser identificado. Estes precursores comprometidos perfazem 0,02% das células da medula óssea, são células indiferenciadas e apresentam os antígenos de superfície c-kit e CD 34. Mastócitos não são encontrados no sangue circulante, porém seus precursores devem migrar da medula óssea para os tecidos periféricos, através da circulação. Foi utilizado o modelo da depleção de mastócitos peritoneais, através da lise pela injeção intraperitoneal de água destilada, para estimular a migração de precursores durante o repovoamento da cavidade peritoneal. Utilizando este modelo, pela primeira vez, uma pequena população de precursores de mastócitos foram isolados do sangue circulante, < 1/ 10^6 células. Morfologicamente e fenotipicamente, estes mastócitos circulantes assemelham-se aos mastócitos bem imaturos encontrados na medula óssea. Os resultados apresentados indicam a presença, na medula óssea, de uma população de mastócitos em todos os estágios de maturação, desde o precursor comprometido até o mastócito maduro. No entanto, este estudo demonstra que pelo menos os mastócitos bem imaturos podem circular pelo sangue durante o repovoamento de sítios periféricos.Summary: Studies of mast cell maturation have been hampered because there have been no specific markers for mast cells and the immature mast cells are not easily identified based solely on morphological characteristics. Immature mast cells lack the cytoplasmic granules typical of mature mast cells as well as sharing morphological features with other cell types. In the present study, rat and mouse bone marrow derived mast were identified and characterized using immunochemical methods. By flow cytometry, and by direct counting of immunostained or immunomagnetically isolated cells, the mast cells represent approximately 2.4% of the total cell population in bone marrow. By conjugating the mast cells specific monoclonal antibodies (mAbs), mAb AA4 and mAb BGD6, to magnetic beads, it was possible to isolate a pure population of mast cells from bone marrow. Three distinct stages of maturation were identified, mature, immature and very immature. These cells ranged in size from 13 pm - 3 pm and immunostained positively with mAb AA4 and mAb BGD6. They were also positive for the high affinity IgE receptor, IgE and c-kit. In addition, using sequential isolation first with mAb AA4 and then mAb BGD6, a committed mast cell precursor also could be identified. This cell makes up only 0.02% of the cells in the bone marrow, has a very undifferentiated morphology, and consistent with being a mast cell precursor, is c-kit and CD34 positive. Although mast cells are thought to migrate from the bone marrow to peripheral sites in the tissue through the circulation, mast cells have not been seen in circulating blood. Lysis of peritoneal mast cells by distilled water was used in order to stimulate the migration of mast cells from the bone marrow into the peripheral circulation during repopulation of the peritoneal cavity. Using this model system, for the first time very small numbers of mast cells, <1/10^6 cells, could be isolated from circulating blood. Morphologically and phenotypically, these circulating mast cells resembled the very immature mast cells present in bone marrow. The results of this investigation demonstrate that mast cells are present in the bone marrow in all stages of maturation ranging from committed precursor to mature mast cell. Furthermore, this study indicates that at least the very immature mast cells can circulate through the blood during repopulation of peripheral sites.55 f. : il., grafs., tabs.application/pdfDisponível em formato digitalMorfologiaBiologia celularMastocitosMedula osseaMorfologiaIdentificação de precursores de mastócitos na medula óssea e no sangue periférico de roedoresinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisporreponame:Repositório Institucional da UFPRinstname:Universidade Federal do Paraná (UFPR)instacron:UFPRinfo:eu-repo/semantics/openAccessORIGINALD - D - ANA CRISTINA GONCALVES GRODZKI.pdfapplication/pdf22569667https://acervodigital.ufpr.br/bitstream/1884/78162/1/D%20-%20D%20-%20ANA%20CRISTINA%20GONCALVES%20GRODZKI.pdfb0074db1e135354b0615123cad360d52MD51open access1884/781622022-09-22 15:06:41.529open accessoai:acervodigital.ufpr.br:1884/78162Repositório de PublicaçõesPUBhttp://acervodigital.ufpr.br/oai/requestopendoar:3082022-09-22T18:06:41Repositório Institucional da UFPR - Universidade Federal do Paraná (UFPR)false
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