Impacto do consumo balanceado de AGPI 6 e AGPI 3 sobre as funções das células do sistema imune inato em resposta à indução de endotoxemia em ratos

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Moretto, Karla Danielle
Data de Publicação: 2012
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional da UFPR
Texto Completo: http://hdl.handle.net/1884/27348
Resumo: Orientador : Prof. Dr. Luiz Cláudio Fernandes
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spelling Moretto, Karla DanielleUniversidade Federal do Paraná. Setor de Ciências Biológicas. Programa de Pós-Graduação em Biologia Celular e MolecularFernandes, Luiz Cláudio, 1960-2018-04-23T18:06:30Z2018-04-23T18:06:30Z2012http://hdl.handle.net/1884/27348Orientador : Prof. Dr. Luiz Cláudio FernandesDissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Biologia Celular e Molecular. Defesa: Curitiba,31/01/2012Bibliografia: fls. 87-106Resumo: A razão entre ácidos graxos polinsaturados (AGPI) ?6 e ?3 na era paleolítica era 1:1 e hoje nos países ocidentais é de 15 a 25:1, a qual está associada a maior prevalência de doenças caracterizadas por inflamação. AGPI ?3 são capazes de atenuar a resposta inflamatória. A sepse tem diagnóstico prevalente em todo mundo e é caracterizada por morbi- mortalidade importante e custos hospitalares elevados. OBJETIVO: Este estudo objetivou investigar o impacto do consumo balanceado de diferentes razões AGPI?6:?3 sobre as funções de células do sistema imunitário inato, particularmente neutrófilos e macrófagos, envolvidas na resposta à indução de endotoxemia bacteriana, modelo experimental de sepse utilizado. MATERIAIS E MÉTODOS: Foram utilizados 60 ratos Wistar e a eles fornecidas dieta padrão (C) e suplementações com óleo de peixe (N3), óleo de girassol (N6) e nas razões ?6:?3 de 7:1 (R7) e 14:1 (R14) por 04 semanas. Ao final deste período foi inoculado 10 mg/kg de Lipopolissacarídeo intraperitoneal (LPS) em metade dos ratos, obtendo-se os seguintes subgrupos: CLPS, R7LPS, R14LPS, N3LPS, N6LPS com seus respectivos controles não estimulados. Após 03 horas da indução da endotoxemia, realizou- se a ortotanásia dos animais por decapitação para coleta de macrófagos a partir do lavado peritoneal e de neutrófilos do sangue para realização dos ensaios referentes à fagocitose, captação de vermelho neutro (volume lisossomal), produção de ânion superóxido e peróxido de hidrogênio. A estatística empregada foi análise de duas vias com pós-teste de Bonferroni com nível de significância para p<0,05. RESULTADOS: Os ratos submetidos à endotoxemia apresentaram-se prostrados e com eriçamento de pêlos. Na ausência de estímulo (basal), os macrófagos peritoneais de todos os grupos suplementados com AGPI, apresentaram aumento da fagocitose em relação ao controle (R7,R14,N3,N6 vs C). Houve menor captação de vermelho neutro pelas células do grupo R14 em relação a R7,N3 e N6 e ausência de alteração na produção de ânion superóxido por macrófagos peritoneais em relação ao controle (R7,R14,N3,N6 vs C). Após estímulo com LPS, não houve diferença na fagocitose entre os grupos R7LPS, R14LPS e N3LPS quando comparados ao basal (R7, N3 e N6). O volume lisossomal aumentou em todos os grupos estimulados em relação ao basal (CLPS,R7LPS,R14LPS,N3LPS,N6LPS vs C,R7,R14,N3,N6 respectivamente) e a produção de ânion superóxido foi similar à do basal (R7 e N3) nos grupos R7LPS e N3LPS em resposta à endotoxemia. Quanto aos neutrófilos sanguíneos, no basal houve aumento da fagocitose em todos os grupos suplementados com AGPI com elevação da captação de vermelho neutro no grupo N6 e incrementos na produção de ânion superóxido nos grupos R14, N3 e N6 e de peróxido de hidrogênio nos grupos R7, R14 e N6 se comparados ao controle (C). Após estímulo com LPS, foi verificada a ausência de incremento à atividade fagocitária nos grupos N3LPS e R7 LPS em relação ao basal (N3 e R7, respectivamente) e aumento do volume lisossomal nos grupos CLPS, R7LPS, R14LPS e N3LPS vs. basal (C, R7, R14 e N3 respectivamente). Quanto à produção de espécies reativas de oxigênio, neutrófilos dos grupos R7LPS, R14 LPS e N3LPS não apresentaram aumento de ânion superóxido se comparados ao basal (R7, R14 e N3 respectivamente), sendo a produção significativamente maior no grupo R14LPS se comparado aos grupos R7LPS e N3 LPS. A secreção de peróxido de hidrogênio por neutrófilos sanguíneos dos grupos R14LPS, N3LPS e N6LPS aumentou se comparada ao basal (R14, N3 e N6 respectivamente), porém as elevações verificadas nos grupos R14LPS e N6LPS foram significativamente maiores que as respostas observadas nos grupos CLPS, R7LPS e N3LPS. CONCLUSÃO: Os resultados apresentados sugerem que as suplementações alimentares com óleo de peixe ou na razão ?6:?3 de 7:1 foram capazes de atenuar a resposta inflamatória inicialmente induzida na presença de endotoxemia bacteriana ao atuar sobre os parâmetros imunitários de macrófagos peritoneais e neutrófilos sanguíneos analisados neste estudo.Abstract: The ratio between polyunsaturated fatty acids (PUFA) ?6 and ?3 in the Paleolithic era was 1:1 and today is about 15-25:1 in Western countries, which has been associated with highest prevalence of diseases characterized by inflammation. PUFA ?3 are able to reduce inflammatory responses. Sepsis is a prevalent diagnosis worldwide and is characterized by morbidity and mortality and higher hospital costs. AIM: This work aimed to investigate the impact of different ratio of ?6:?3 PUFA on innate immune cells, particularly macrophages and neutrophils, involved in the response to endotoxemia, sepsis model used in this study. METHODS: Sixty Wistar rats were fed with a standard diet (C) and supplemented with sunflower (N6), fish oil (N3) and ratio ?6:?3 PUFA of 7:1 (R7) and 14:1 (R14) for four weeks. Following, 10 mg/kg LPS were inoculated intraperitoneally in half of the groups, named as: CLPS, R7LPS, R14LPS, N3LPS, N6LPS. Three hours after induction of endotoxemia, the animals were decapitated and the peritoneal macrophages and blood neutrophils were harvested for assays related to phagocytosis, neutral red uptake (lysossomal volume), superoxide anion and hydrogen peroxide productions. Statistical analysis was performed by Two Way ANOVA with post hoc Bonferroni test with significance level of p<0,05. RESULTS: Rats subjected to endotoxemia were prostate and bristling hair. In the absence of stimulation (baseline), peritoneal macrophages from all PUFA supplemented groups showed increased phagocytosis compared to control groups (R7,R14,N3,N6 vs C). There was lower neutral red uptake by R14 macrophages in relation to R7, N3 and N6 groups. There were no changes in superoxide anion production between the groups. After LPS stimuly, there were no changes in R7LPS, R14LPS e N3LPS phagocytosis compared to baseline (R7, R14 and N3). Lysosomal volume increased in all PUFA stimulated groups compared to baseline (CLPS, R7LPS, R14LPS, N3LPS, N6LPS vs C, R7, R14, N3,N6 respectively) and anion superoxide production was similar to those seen at baseline (R7 and N3) in R7LPS e N3LPS groups respectively in response to endotoxemia induction. Regarding to blood neutrophils, at basal there was an increase in the phagocytosis in all AGPI supplemented groups compared to control (R7, R14, N3, N6 vs. C), augmented neutral red uptake in the N6 group, incremented superoxide production in R14, N3, N6 groups and hydrogen peroxide production in R7,R14 e N6 groups compared to control (C ). After LPS stimuly, there was found no elevation in the phagocytosis in the R7LPS e N3LPS groups and augmented neutral red uptake by blood neutrophils in the CLPS, R7LPS, R14LPS e N3LPS vs. baseline. Oxygen reactive species production by neutrophils from R7LPS, R14LPS e N3LPS groups showed no increase in the superoxide anion generation compared to baseline, production of R14LPS and N6LPS groups being significantly greater than those seen in R7LPS e N3LPS groups. The hydrogen peroxide production from R14LPS, N3LPS, N6LPS blood neutrophils augmented compared to respective baseline (R14, N3 e N6), but the increase in the R14LPS e N6LPS were significantly higher than those seen in the CLPS, R7LPS e N3LPS groups. CONCLUSION: Our data suggest that fish oil and the ?6:?3 7:1 ratio supplementation can mitigate the inflammatory response initially induced in the presence endotoxemia by acting on immune parameters analyzed in this study of peritoneal macrophages and blood neutrophils.106f. : il. [algumas color.], grafs., tabs.application/pdfDisponível em formato digitalTesesÁcidos graxosOleo de peixeEndotoxemiaCitologia e biologia celularBiologia molecularImpacto do consumo balanceado de AGPI 6 e AGPI 3 sobre as funções das células do sistema imune inato em resposta à indução de endotoxemia em ratosinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisporreponame:Repositório Institucional da UFPRinstname:Universidade Federal do Paraná (UFPR)instacron:UFPRinfo:eu-repo/semantics/openAccessORIGINALR - D - KARLA DANIELLE MORETTO.pdfR - D - KARLA DANIELLE MORETTO.pdfapplication/pdf1219180https://acervodigital.ufpr.br/bitstream/1884/27348/1/R%20-%20D%20-%20KARLA%20DANIELLE%20MORETTO.pdf9acfebdc8678eba82642a3578e8edc96MD51open access1884/273482018-04-23 15:06:30.764open accessoai:acervodigital.ufpr.br:1884/27348Repositório de PublicaçõesPUBhttp://acervodigital.ufpr.br/oai/requestopendoar:3082018-04-23T18:06:30Repositório Institucional da UFPR - Universidade Federal do Paraná (UFPR)false
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