Aspectos ultraestruturais da germinação, localização da atividade da fosfatase acida e avaliação estrutural da fração micosporina em conídios de Colletotrichum graminicola

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Schadeck, Ruth Janice Guse
Data de Publicação: 1999
Tipo de documento: Tese
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional da UFPR
Texto Completo: https://hdl.handle.net/1884/88486
Resumo: Orientador: Breno Leite
id UFPR_3cbd3dee11ca45cc1419dbc9ef146dec
oai_identifier_str oai:acervodigital.ufpr.br:1884/88486
network_acronym_str UFPR
network_name_str Repositório Institucional da UFPR
repository_id_str 308
spelling Universidade Federal do Paraná. Setor de Ciências Biológicas. Programa de Pós-Graduação em Ciências (Bioquímica)Leite, BrenoSchadeck, Ruth Janice Guse2024-06-11T19:06:10Z2024-06-11T19:06:10Z1999https://hdl.handle.net/1884/88486Orientador: Breno LeiteTese (doutorado) - Universidade Federal do Parana, Setor de Ciencias BiologicasResumo: Conídios não germinados de Colletotrichum graminicola, fungo patógeno de milho, exibem grande número de corpos lipídicos no citoplasma. A atividade da fosfatase ácida presente no homogenato de conídios não germinados foi caracterizada. A enzima apresenta pH ótimo 5,5 e Km para p-nitrofenilfosfato igual à 0,631 mM. A atividade da fosfatase ácida aumenta com o envelhecimento dos conídios, concomitantemente com a diminuição dos lipídios armazenados. Testes citoquímicos ultraestruturais mostraram o produto da reação citoquímica da fosfatase ácida, fosfato de cério, nos vacúolos de C. graminicola, o que sugere atividade lítica nestes compartimentos. Usando o produto de reação associado à face interna da membrana vacuolar como marcador de membrana, observa-se que os corpos lipídicos são internalizados pelos vacúolos em um processo análogo à microautofagia. As análises ultraestruturais sugerem que os lipídios captados são digeridos no interior do vacúolo. De maneira semelhante, outras estruturas citoplasmáticas são englobadas pelos vacúolos. Os conídios germinam e penetram na membrana de celofane, estabelecendo um modelo para o estudo do processo germinativo através de microscopia eletrônica de transmissão. Os corpos lipídicos desaparecem do conídio germinado e os vacúolos aumentam, simultaneamente com a deposição do produto de reação da fosfatase ácida. O apressório apresenta atividade da fosfatase ácida em múltiplas vesículas heterogêneas, a maioria justapostas aos corpos lipídicos. O apressório também secreta fosfatase ácida. Os conídios não germinados foram submetidos à extração e isolamento de micosporina. A extração com metanol seguida de cromatografia em DEAE-Sephadex A-50 e em Sephacryl S-200 produziu uma fração heterogênea. O espectro de UV foi consistente com a presença de micosporina. O conjunto das análises monodimensionais de 13C-RMN, 1H-RMN e bidimensionais COSY, TOCSY, HMQC e HMBC sugerem a estrutura micosporina-glutamina como principal composto presente na fração isolada. Os deslocamentos químicos atribuídos aos carbonos da estrutura são similares aos descritos na literatura para esta classe de compostos. Estes resultados estão em concordância com as análises de FTIR e ESI-MS. A fração isolada não tem efeitos sobre a germinação de conídios com 15 dias.Abstract: Ungerminated conidia of Colletotrichum graminicola, a pathogen of sorghum and com, exhibited a large number of lipid bodies stored in their cytoplasm. The acid phosphatase activity of the homogenate obtained from the ungerminated conidia was characterized. It has an optimum pH of 5.5 and the Km for p-nitrophenylphosphate is 0.631 mM. During aging the acid phosphatase activity increases and the lipids stored, in the cytoplasm decrease. Cytochemical ultrastructural tests showed that ungerminated conidia vacuoles contain the cytochemical reaction product of the acid phosphatase, cerium phosphate, which is suggestive of lytic activity. The reaction product is associated with the internal face of the vacuole membranes. Using this product as a marker of the vacuole membrane, the lipid bodies were shown to be internalized by vacuoles in a process analogous to microautophagy. In this process, the vacuoles internalize and digest lipid bodies. Similarly, diversified cytoplasmic structures were internalized by vacuoles. The conidia are capable of germination and penetration into the cellophane membrane, establishing a model for the study of the germinative process, using transmission electron microscopy. The lipid bodies disappeared from the germinated conidia and the vacuoles enlarged concomitantly with deposition of the product of the acid phosphatase reaction. Appressoria also showed acid phosphatase activity in multiple heterogeneous vesicles. A number of these were juxtaposed with lipid bodies. In addition, appressoria secreted acid phosphatase. The ungerminated conidia were also extracted and the mycosporin isolated, as follows. Extraction was effected with methanol and the extract submitted to chromatography through DEAE-Sephadex A-50 followed by Sephacryl S-200. This methodology produced a heterogeneous fraction. Its UV spectrum was consistent with that of mycosporin. One-dimensional 13C-RMN, ^-R M N and two-dimensional COSY, TOCSY, HMQC and HMBC analyses suggested a mycosporin-glutamine structure as a main component of the isolated fraction. These results were consistent with the FTIR and ESI-MS analyses. The isolated fraction did not have any effect on germination of conidium 15 day old.180f. : il.application/pdfDisponível em formato digitalBioquímicaConidiaFosfatase acidaColletotrichum graminicelaColletotrichum graminicolaAspectos ultraestruturais da germinação, localização da atividade da fosfatase acida e avaliação estrutural da fração micosporina em conídios de Colletotrichum graminicolainfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesisporreponame:Repositório Institucional da UFPRinstname:Universidade Federal do Paraná (UFPR)instacron:UFPRinfo:eu-repo/semantics/openAccessORIGINALD - T - RUTH JANICE GUSE SCHADECK.pdfapplication/pdf38240812https://acervodigital.ufpr.br/bitstream/1884/88486/1/D%20-%20T%20-%20RUTH%20JANICE%20GUSE%20SCHADECK.pdf27151f8b5da8140a2ca63954e1494719MD51open access1884/884862024-06-11 16:06:10.937open accessoai:acervodigital.ufpr.br:1884/88486Repositório de PublicaçõesPUBhttp://acervodigital.ufpr.br/oai/requestopendoar:3082024-06-11T19:06:10Repositório Institucional da UFPR - Universidade Federal do Paraná (UFPR)false
dc.title.pt_BR.fl_str_mv Aspectos ultraestruturais da germinação, localização da atividade da fosfatase acida e avaliação estrutural da fração micosporina em conídios de Colletotrichum graminicola
title Aspectos ultraestruturais da germinação, localização da atividade da fosfatase acida e avaliação estrutural da fração micosporina em conídios de Colletotrichum graminicola
spellingShingle Aspectos ultraestruturais da germinação, localização da atividade da fosfatase acida e avaliação estrutural da fração micosporina em conídios de Colletotrichum graminicola
Schadeck, Ruth Janice Guse
Bioquímica
Conidia
Fosfatase acida
Colletotrichum graminicela
Colletotrichum graminicola
title_short Aspectos ultraestruturais da germinação, localização da atividade da fosfatase acida e avaliação estrutural da fração micosporina em conídios de Colletotrichum graminicola
title_full Aspectos ultraestruturais da germinação, localização da atividade da fosfatase acida e avaliação estrutural da fração micosporina em conídios de Colletotrichum graminicola
title_fullStr Aspectos ultraestruturais da germinação, localização da atividade da fosfatase acida e avaliação estrutural da fração micosporina em conídios de Colletotrichum graminicola
title_full_unstemmed Aspectos ultraestruturais da germinação, localização da atividade da fosfatase acida e avaliação estrutural da fração micosporina em conídios de Colletotrichum graminicola
title_sort Aspectos ultraestruturais da germinação, localização da atividade da fosfatase acida e avaliação estrutural da fração micosporina em conídios de Colletotrichum graminicola
author Schadeck, Ruth Janice Guse
author_facet Schadeck, Ruth Janice Guse
author_role author
dc.contributor.other.pt_BR.fl_str_mv Universidade Federal do Paraná. Setor de Ciências Biológicas. Programa de Pós-Graduação em Ciências (Bioquímica)
dc.contributor.advisor1.fl_str_mv Leite, Breno
dc.contributor.author.fl_str_mv Schadeck, Ruth Janice Guse
contributor_str_mv Leite, Breno
dc.subject.por.fl_str_mv Bioquímica
Conidia
Fosfatase acida
Colletotrichum graminicela
Colletotrichum graminicola
topic Bioquímica
Conidia
Fosfatase acida
Colletotrichum graminicela
Colletotrichum graminicola
description Orientador: Breno Leite
publishDate 1999
dc.date.issued.fl_str_mv 1999
dc.date.accessioned.fl_str_mv 2024-06-11T19:06:10Z
dc.date.available.fl_str_mv 2024-06-11T19:06:10Z
dc.type.status.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/publishedVersion
dc.type.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/doctoralThesis
format doctoralThesis
status_str publishedVersion
dc.identifier.uri.fl_str_mv https://hdl.handle.net/1884/88486
url https://hdl.handle.net/1884/88486
dc.language.iso.fl_str_mv por
language por
dc.relation.pt_BR.fl_str_mv Disponível em formato digital
dc.rights.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/openAccess
eu_rights_str_mv openAccess
dc.format.none.fl_str_mv 180f. : il.
application/pdf
dc.source.none.fl_str_mv reponame:Repositório Institucional da UFPR
instname:Universidade Federal do Paraná (UFPR)
instacron:UFPR
instname_str Universidade Federal do Paraná (UFPR)
instacron_str UFPR
institution UFPR
reponame_str Repositório Institucional da UFPR
collection Repositório Institucional da UFPR
bitstream.url.fl_str_mv https://acervodigital.ufpr.br/bitstream/1884/88486/1/D%20-%20T%20-%20RUTH%20JANICE%20GUSE%20SCHADECK.pdf
bitstream.checksum.fl_str_mv 27151f8b5da8140a2ca63954e1494719
bitstream.checksumAlgorithm.fl_str_mv MD5
repository.name.fl_str_mv Repositório Institucional da UFPR - Universidade Federal do Paraná (UFPR)
repository.mail.fl_str_mv
_version_ 1801860187179450368

Registros relacionados