Clonagem, sequenciamento e caracterizaçao do gene que codifica a enzima DNA topoisomerase do tipo II do protozoário Blastocrithidia culicis (Brueske, 1967)

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Lourenço, Édio Eligio
Data de Publicação: 2005
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional da UFPR
Texto Completo: http://hdl.handle.net/1884/4982
Resumo: Orientador: Stenio Perdigao Fragoso
id UFPR_45dc281c27e25a36324dade1bf8e88e9
oai_identifier_str oai:acervodigital.ufpr.br:1884/4982
network_acronym_str UFPR
network_name_str Repositório Institucional da UFPR
repository_id_str 308
spelling Lourenço, Édio EligioUniversidade Federal do Paraná. Setor de Ciências Biológicas. Programa de Pós-Graduação em Biologia Celular e MolecularFragoso, Stenio Perdigão2018-04-20T19:38:55Z2018-04-20T19:38:55Z2005http://hdl.handle.net/1884/4982Orientador: Stenio Perdigao FragosoDissertaçao (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciencias Biológicas, Programa de Pós-Graduaçao em Biologia Celular e Molecular. Defesa: Curitiba, 22/07/2006Inclui bibliografiaÁrea de concentraçao: Biologia celular e molecularDNA topoisomerases são enzimas que participam de diversos processos celulares tais como replicação, transcrição, recombinação e segregação dos cromossomos. Tais enzimas atuam clivando transitoriamente uma fita (topoisomerases do tipoI) ou ambas (topoisomerases do tipoII) as fitas da molécula de DNA. As topoisomerases são alvos de agentes bactericidas e de drogas anti-tumorais e podem vir a ser um importante alvo para quimioterapia de doenças causadas por parasitas Neste trabalho nos clonamos e caracterizamos o gene que codifica a enzima topo II do tripanosomatídeo monoxênico Blastocrithidia culicis (BcTOP2), uma vez que, esta enzima pode vir a ser usada como protótipo pra topoisomerases de tripanosomatídeos patogênicos e conseqüentemente um excelente modelo para estudos funcionais e estruturais. O gene BcTOP2 apresentou um quadro aberto de leitura com 3,693 pares de bases, codificando um polipeptídio de 1.230 aminoácidos com uma massa molecular estimada de 138kDa. A seqüência de aminoácidos da topoII de B. culicis apresenta uma alta similaridade com topoisomerases de outros tripanosomatídeos, tais como C. fasciculata (81.0%), L. infantum (79.0%), Trypanosoma cruzi (76.0%) e Trypanosoma brucei (74.0%). Bctopo II apresenta uma menor similaridade com a topoII humana (48.0%). BcTOP2 é um gene de copia única no genoma de B. culicis e transcreve um mRNA de 4.5 kb. O antisoro produzido em coelho contra a porção carboxiterminal de BctopoII fusionada a GFP detectou, por imuno blot, uma banda com aproximadamente 138 kDa em extratos celulares de B. culicis, que é compatível com a massa do polipeptídeo, cuja seqüência foi deduzida a partir do gene BcTOP2. Ensaios de imunolocalização mostraram que o antisoro reconhece uma TOPOII nuclearDNA topoisomerases are involved in cellular processes as diverse as replication, transcription, recombination and chromosome segregation. Such enzymes acts by transiently cutting one (type I) or both (typeII) strands of the DNA. DNA topoisomerases are inhibited by antimicrobial and antitumoral agents and might be also important targets in the chemotherapy of diseases caused by parasites. We have cloned and characterized the gene encoding the topoII from the monoxenic trypanosomatid B. culicis (BcTOP2), since this enzyme might be used as a prototype for topoII enzymes from pathogenic trypanosomatids and consequently a good model for structural and functional studies. The BcTOP2 gene revealed an open reading frame of 3,693 base pairs predicting a protein with 1,230 amino acids and an estimated molecular weight of 138 kDa. The B. culicis topo II amino acid sequence shares high similarity with topoisomerases from other trypanosomatids, such as C. fasciculata (81.0%), L. infantum (79.0%), Trypanosoma cruzi (76.0%) and Trypanosoma brucei (74.0%). Bctopo II shares a lower similarity with the human homologs topo II (48.0%). BcTOP2 is a single copy gene in the genome of B. culicis and encodes a 4.5-kb mRNA. Antiserum raised against a C-terminal portion of BctopoII fused to GFP could detect a band of 138 kDa in imuno blot, the expected size of the polypeptide deduced from the BcTOP2 gene. Immunolocalisation assays showed that the antiserum recognized the nuclear TOPOII .xi, 77f. : il. algumas color., tabs.application/pdfDisponível em formato digitalBiologia celularTripanosomatídeosClonagemTesesCitologia e biologia celularBiologia molecularClonagem, sequenciamento e caracterizaçao do gene que codifica a enzima DNA topoisomerase do tipo II do protozoário Blastocrithidia culicis (Brueske, 1967)info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisporreponame:Repositório Institucional da UFPRinstname:Universidade Federal do Paraná (UFPR)instacron:UFPRinfo:eu-repo/semantics/openAccessORIGINALCLONAGEM, SEQUENCIAMENTO E CARACTERIZAÇÃO DO GENE QUE CODIFICA A ENZIMA DNA TOPOISOMERASE DO TIPO.pdfapplication/pdf3127339https://acervodigital.ufpr.br/bitstream/1884/4982/1/CLONAGEM%2c%20SEQUENCIAMENTO%20E%20CARACTERIZA%c3%87%c3%83O%20DO%20GENE%20QUE%20CODIFICA%20A%20ENZIMA%20DNA%20TOPOISOMERASE%20DO%20TIPO.pdf734ef56615b77a1bc813d30410c0680fMD51open accessTEXTCLONAGEM, SEQUENCIAMENTO E CARACTERIZAÇÃO DO GENE QUE CODIFICA A ENZIMA DNA TOPOISOMERASE DO TIPO.pdf.txtExtracted Texttext/plain138423https://acervodigital.ufpr.br/bitstream/1884/4982/2/CLONAGEM%2c%20SEQUENCIAMENTO%20E%20CARACTERIZA%c3%87%c3%83O%20DO%20GENE%20QUE%20CODIFICA%20A%20ENZIMA%20DNA%20TOPOISOMERASE%20DO%20TIPO.pdf.txte7ca39d869bc0219bda2e3b6c3280691MD52open accessTHUMBNAILCLONAGEM, SEQUENCIAMENTO E CARACTERIZAÇÃO DO GENE QUE CODIFICA A ENZIMA DNA TOPOISOMERASE DO TIPO.pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg1313https://acervodigital.ufpr.br/bitstream/1884/4982/3/CLONAGEM%2c%20SEQUENCIAMENTO%20E%20CARACTERIZA%c3%87%c3%83O%20DO%20GENE%20QUE%20CODIFICA%20A%20ENZIMA%20DNA%20TOPOISOMERASE%20DO%20TIPO.pdf.jpg0881fec0f40e62d35b0d919e68127b0eMD53open access1884/49822018-04-20 16:38:55.564open accessoai:acervodigital.ufpr.br:1884/4982Repositório de PublicaçõesPUBhttp://acervodigital.ufpr.br/oai/requestopendoar:3082018-04-20T19:38:55Repositório Institucional da UFPR - Universidade Federal do Paraná (UFPR)false
dc.title.pt_BR.fl_str_mv Clonagem, sequenciamento e caracterizaçao do gene que codifica a enzima DNA topoisomerase do tipo II do protozoário Blastocrithidia culicis (Brueske, 1967)
title Clonagem, sequenciamento e caracterizaçao do gene que codifica a enzima DNA topoisomerase do tipo II do protozoário Blastocrithidia culicis (Brueske, 1967)
spellingShingle Clonagem, sequenciamento e caracterizaçao do gene que codifica a enzima DNA topoisomerase do tipo II do protozoário Blastocrithidia culicis (Brueske, 1967)
Lourenço, Édio Eligio
Biologia celular
Tripanosomatídeos
Clonagem
Teses
Citologia e biologia celular
Biologia molecular
title_short Clonagem, sequenciamento e caracterizaçao do gene que codifica a enzima DNA topoisomerase do tipo II do protozoário Blastocrithidia culicis (Brueske, 1967)
title_full Clonagem, sequenciamento e caracterizaçao do gene que codifica a enzima DNA topoisomerase do tipo II do protozoário Blastocrithidia culicis (Brueske, 1967)
title_fullStr Clonagem, sequenciamento e caracterizaçao do gene que codifica a enzima DNA topoisomerase do tipo II do protozoário Blastocrithidia culicis (Brueske, 1967)
title_full_unstemmed Clonagem, sequenciamento e caracterizaçao do gene que codifica a enzima DNA topoisomerase do tipo II do protozoário Blastocrithidia culicis (Brueske, 1967)
title_sort Clonagem, sequenciamento e caracterizaçao do gene que codifica a enzima DNA topoisomerase do tipo II do protozoário Blastocrithidia culicis (Brueske, 1967)
author Lourenço, Édio Eligio
author_facet Lourenço, Édio Eligio
author_role author
dc.contributor.other.pt_BR.fl_str_mv Universidade Federal do Paraná. Setor de Ciências Biológicas. Programa de Pós-Graduação em Biologia Celular e Molecular
dc.contributor.author.fl_str_mv Lourenço, Édio Eligio
dc.contributor.advisor1.fl_str_mv Fragoso, Stenio Perdigão
contributor_str_mv Fragoso, Stenio Perdigão
dc.subject.por.fl_str_mv Biologia celular
Tripanosomatídeos
Clonagem
Teses
Citologia e biologia celular
Biologia molecular
topic Biologia celular
Tripanosomatídeos
Clonagem
Teses
Citologia e biologia celular
Biologia molecular
description Orientador: Stenio Perdigao Fragoso
publishDate 2005
dc.date.issued.fl_str_mv 2005
dc.date.accessioned.fl_str_mv 2018-04-20T19:38:55Z
dc.date.available.fl_str_mv 2018-04-20T19:38:55Z
dc.type.status.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/publishedVersion
dc.type.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/masterThesis
format masterThesis
status_str publishedVersion
dc.identifier.uri.fl_str_mv http://hdl.handle.net/1884/4982
url http://hdl.handle.net/1884/4982
dc.language.iso.fl_str_mv por
language por
dc.relation.pt_BR.fl_str_mv Disponível em formato digital
dc.rights.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/openAccess
eu_rights_str_mv openAccess
dc.format.none.fl_str_mv xi, 77f. : il. algumas color., tabs.
application/pdf
dc.source.none.fl_str_mv reponame:Repositório Institucional da UFPR
instname:Universidade Federal do Paraná (UFPR)
instacron:UFPR
instname_str Universidade Federal do Paraná (UFPR)
instacron_str UFPR
institution UFPR
reponame_str Repositório Institucional da UFPR
collection Repositório Institucional da UFPR
bitstream.url.fl_str_mv https://acervodigital.ufpr.br/bitstream/1884/4982/1/CLONAGEM%2c%20SEQUENCIAMENTO%20E%20CARACTERIZA%c3%87%c3%83O%20DO%20GENE%20QUE%20CODIFICA%20A%20ENZIMA%20DNA%20TOPOISOMERASE%20DO%20TIPO.pdf
https://acervodigital.ufpr.br/bitstream/1884/4982/2/CLONAGEM%2c%20SEQUENCIAMENTO%20E%20CARACTERIZA%c3%87%c3%83O%20DO%20GENE%20QUE%20CODIFICA%20A%20ENZIMA%20DNA%20TOPOISOMERASE%20DO%20TIPO.pdf.txt
https://acervodigital.ufpr.br/bitstream/1884/4982/3/CLONAGEM%2c%20SEQUENCIAMENTO%20E%20CARACTERIZA%c3%87%c3%83O%20DO%20GENE%20QUE%20CODIFICA%20A%20ENZIMA%20DNA%20TOPOISOMERASE%20DO%20TIPO.pdf.jpg
bitstream.checksum.fl_str_mv 734ef56615b77a1bc813d30410c0680f
e7ca39d869bc0219bda2e3b6c3280691
0881fec0f40e62d35b0d919e68127b0e
bitstream.checksumAlgorithm.fl_str_mv MD5
MD5
MD5
repository.name.fl_str_mv Repositório Institucional da UFPR - Universidade Federal do Paraná (UFPR)
repository.mail.fl_str_mv
_version_ 1813898812928819200

Registros relacionados