Embriogênese somática em Pinus caribaea var. hondurensis

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Zanella, Laudiane Bruna
Data de Publicação: 2016
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional da UFPR
Texto Completo: https://hdl.handle.net/1884/69447
Resumo: Orientador : Profª. Drª. Marguerite G. G. Quoirin
id UFPR_50faf50db2d12f093344053a08f868da
oai_identifier_str oai:acervodigital.ufpr.br:1884/69447
network_acronym_str UFPR
network_name_str Repositório Institucional da UFPR
repository_id_str 308
spelling Goldbach, Juliana DegenhardtUniversidade Federal do Paraná. Setor de Ciências Agrárias. Programa de Pós-Graduação em Agronomia - Produção VegetalQuoirin, Marguerite Germaine Ghislaine, 1948-Zanella, Laudiane Bruna2022-12-14T19:56:58Z2022-12-14T19:56:58Z2016https://hdl.handle.net/1884/69447Orientador : Profª. Drª. Marguerite G. G. QuoirinCoorientador : Drª. Juliana Degenhardt-GoldbachDissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Agrárias, Programa de Pós-Graduação em Agronomia. Defesa: Curitiba, 18/08/2016Inclui referências : f. 37-45Área de concentração: Produção vegetalResumo: A embriogênese somática (ES) consiste na formação de embriões a partir de células somáticas, num processo morfogenético semelhante àquele verificado para a embriogênese zigótica. Dentre as suas potencialidades encontram-se a propagação massal e clonal de genótipos elite, a criopreservação dos tecidos embriogênicos, além da conservação ex situ de germoplasma de espécies ameaçadas de extinção. Esse trabalho teve como objetivo desenvolver um protocolo de embriogênese somática de Pinus caribaea var. hondurensis. Para tanto, na fase de indução da embriogênese somática foram comparados os meios DCR, QL e WV5 com e sem adição de ácido fólico (100 mgL^-1); a seguir foram utilizados vários tipos de explantes iniciais: megagametófito maduro, acículas, hipocótilos e raízes de plântulas recém germinadas, e, finalmente, testadas três concentrações de 2,4-D (0, 10, 20 e 30 µM) combinadas com BAP (0, 2, 4 e 8 µM). O meio básico de indução da embriogênese continha os sais do meio QL, sacarose, mio-inositol, glutamina, caseína hidrolisada, tiamina, 2,4-D, BAP, ágar e (100 mgL^-1) de ácido fólico. Na fase de maturação dos embriões somáticos, foi avaliado o efeito do PEG-3500 (10%) no meio básico sem 2,4D nem BAP e com a adição de ABA e carvão ativado. As culturas foram mantidas no escuro a 23±2ºC. Após 90 dias foram avaliadas a porcentagem de explantes com calos, a formação de embriões somáticos anormais e a oxidação. Além disso, foi realizada a coloração dos calos com carmim acético e azul de Evans para confirmar se eram embriogênicos. O formato e a coloração dos embriões no meio de maturação foram avaliados após 60 e 90 dias. Na fase de indução, o melhor meio foi o QL com adição de ácido fólico, com 48% de explantes formando calos. O megagametófito foi o único explante que apresentou o desenvolvimento de embriões somáticos anormais. Utilizando o megagametófito maduro como explante, observou-se que a melhor combinação de 2,4-D e de BAP foi 10 µM de 2,4-D e 2 µM de BAP. O teste de coloração indicou a presença de células embriogênicas em todos os tratamentos de todos os experimentos. Na fase de maturação, o uso de 10% de PEG-3500 não foi favorável para o desenvolvimento dos embriões somáticos. Na fase de indução da embriogênese somática, o melhor resultado foi obtido cultivando megagametófitos em meio QL suplementado com 100 mgL^-1 de ácido fólico, 2,4-D (10 µM) e BAP (2 µM). No presente estudo não foi possível a obtenção de embriões somáticos normais. Palavras-chave: ácido fólico; megagametófitos; 2,4D; BAP; PEG3500.Abstract: Somatic embryogenesis (SE) is the formation of embryos from somatic cells, a morphogenetic procedure similar to that observed for the zygotic embryogenesis. Among its strengths are the mass and clonal propagation of elite genotypes, cryopreservation of embryogenic tissues, as well as ex situ conservation of germplasm of endangered species. This study aimed to develop a somatic embryogenesis protocol Pinus caribaea var. hondurensis. Therefore, the induction phase of somatic embryogenesis compared the DCR, QL and WV5 culture media with and without addition of folic acid. Various kinds of initial explants were used: mature megagametophyte, needles, hypocotyls and roots of newly germinated seedlings, and finally three concentrations of 2,4-D (0, 10, 20 and 30 µM) in combination with BAP (0, 2, 4 and 8 µM) were tested. The basic medium for embryogenesis induction contained the QL salts, sucrose, myo-inositol, glutamine, casein hydrolizate, thiamine, 2,4-D, BAP, agar and 100 mg L^-1 of folic acid. During the maturation stage, we evaluated the effect of PEG-3500 (10%) in basal medium without 2,4-D and BAP or with the addition of ABA and activated charcoal. Cultures were maintained in the dark at 23 ± 2 ° C. After 90 days the percentage of explants with callus, somatic embryos formation and oxidation were evaluated. In addition, staining of callus was performed with acetic carmine and Evans Blue to confirm whether they were embryogenic. The format and staining of embryos in maturation medium were evaluated after 60 and 90 days. In the induction phase, the QL medium with the addition of folic acid was better, with 48% explants forming calli. The megagametophyte was the only explant forming abnormal somatic embryos. Using the mature megagametophyte, the best concentrations of 2,4-D combined with BAP were 10 and 2 uM respectively. The staining test indicated the presence of embryogenic cells in all treatments. During the maturation phase, the use of 10% PEG-3500 was not favorable for the development of somatic embryos. The best treatment for callus induction from megagametófitos was QL medium supplemented with 100 mg L^-1 folic acid, 2,4-D (10 uM) and BAP (2 uM). In the present study normal somatic embryos were not observed. Keywords: Plant tissue culture, somatic embryos, embryogenic callus, folic acid.47 f. : il., algumas color., grafs., tabs.application/pdfDisponível em formato digitalAgronomiaEmbriogênese somática em Pinus caribaea var. hondurensisinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisporreponame:Repositório Institucional da UFPRinstname:Universidade Federal do Paraná (UFPR)instacron:UFPRinfo:eu-repo/semantics/openAccessORIGINALR - D - LAUDIANE BRUNA ZANELLA.pdfapplication/pdf1128783https://acervodigital.ufpr.br/bitstream/1884/69447/1/R%20-%20D%20-%20LAUDIANE%20BRUNA%20ZANELLA.pdf53f2ad2fef547fa0bf18810f4fe44d4bMD51open access1884/694472022-12-14 16:56:58.08open accessoai:acervodigital.ufpr.br:1884/69447Repositório de PublicaçõesPUBhttp://acervodigital.ufpr.br/oai/requestopendoar:3082022-12-14T19:56:58Repositório Institucional da UFPR - Universidade Federal do Paraná (UFPR)false
dc.title.pt_BR.fl_str_mv Embriogênese somática em Pinus caribaea var. hondurensis
title Embriogênese somática em Pinus caribaea var. hondurensis
spellingShingle Embriogênese somática em Pinus caribaea var. hondurensis
Zanella, Laudiane Bruna
Agronomia
title_short Embriogênese somática em Pinus caribaea var. hondurensis
title_full Embriogênese somática em Pinus caribaea var. hondurensis
title_fullStr Embriogênese somática em Pinus caribaea var. hondurensis
title_full_unstemmed Embriogênese somática em Pinus caribaea var. hondurensis
title_sort Embriogênese somática em Pinus caribaea var. hondurensis
author Zanella, Laudiane Bruna
author_facet Zanella, Laudiane Bruna
author_role author
dc.contributor.other.pt_BR.fl_str_mv Goldbach, Juliana Degenhardt
Universidade Federal do Paraná. Setor de Ciências Agrárias. Programa de Pós-Graduação em Agronomia - Produção Vegetal
dc.contributor.advisor1.fl_str_mv Quoirin, Marguerite Germaine Ghislaine, 1948-
dc.contributor.author.fl_str_mv Zanella, Laudiane Bruna
contributor_str_mv Quoirin, Marguerite Germaine Ghislaine, 1948-
dc.subject.por.fl_str_mv Agronomia
topic Agronomia
description Orientador : Profª. Drª. Marguerite G. G. Quoirin
publishDate 2016
dc.date.issued.fl_str_mv 2016
dc.date.accessioned.fl_str_mv 2022-12-14T19:56:58Z
dc.date.available.fl_str_mv 2022-12-14T19:56:58Z
dc.type.status.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/publishedVersion
dc.type.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/masterThesis
format masterThesis
status_str publishedVersion
dc.identifier.uri.fl_str_mv https://hdl.handle.net/1884/69447
url https://hdl.handle.net/1884/69447
dc.language.iso.fl_str_mv por
language por
dc.relation.pt_BR.fl_str_mv Disponível em formato digital
dc.rights.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/openAccess
eu_rights_str_mv openAccess
dc.format.none.fl_str_mv 47 f. : il., algumas color., grafs., tabs.
application/pdf
dc.source.none.fl_str_mv reponame:Repositório Institucional da UFPR
instname:Universidade Federal do Paraná (UFPR)
instacron:UFPR
instname_str Universidade Federal do Paraná (UFPR)
instacron_str UFPR
institution UFPR
reponame_str Repositório Institucional da UFPR
collection Repositório Institucional da UFPR
bitstream.url.fl_str_mv https://acervodigital.ufpr.br/bitstream/1884/69447/1/R%20-%20D%20-%20LAUDIANE%20BRUNA%20ZANELLA.pdf
bitstream.checksum.fl_str_mv 53f2ad2fef547fa0bf18810f4fe44d4b
bitstream.checksumAlgorithm.fl_str_mv MD5
repository.name.fl_str_mv Repositório Institucional da UFPR - Universidade Federal do Paraná (UFPR)
repository.mail.fl_str_mv
_version_ 1801860316142764032

Registros relacionados