Otimização da expressão e purificação das proteínas recombinantes His-Amtb e do complexo His-DraT/GlnB de Azospirillum brasiliense

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Rodrigues, Thiago Estefano, 1984-
Data de Publicação: 2011
Tipo de documento: Trabalho de conclusão de curso
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional da UFPR
Texto Completo: https://hdl.handle.net/1884/30661
Resumo: Orientador: Luciano Fernandes Huergo
id UFPR_527b6703c3bbe0e4dee291d835a7a07b
oai_identifier_str oai:acervodigital.ufpr.br:1884/30661
network_acronym_str UFPR
network_name_str Repositório Institucional da UFPR
repository_id_str 308
spelling Rodrigues, Thiago Estefano, 1984-Araújo, Luíza Maria deUniversidade Federal do Paraná. Setor de Ciências Biológicas. Curso de Graduação em Ciências BiológicasHuergo, Luciano Fernandes, 1978-2022-09-16T16:53:49Z2022-09-16T16:53:49Z2011https://hdl.handle.net/1884/30661Orientador: Luciano Fernandes HuergoCoorientadora: Luíza Maria de AraújoMonografia (Bacharelado) - Universidade Federal do Paraná. Setor de Ciências Biológicas. Curso de Graduação em Ciências BiológicasResumo : Em Azospirillum brasilense, o metabolismo do nitrogênio tem a proteína integral de membrana AmtB como molécula chave na absorção e percepção dos níveis de amônia do ambiente extracelular. Essa proteína é membro da família Amt/MEP/Rh de proteínas transportadoras de amônia, encontradas em arquea, eubactérias, fungos, plantas e animais. Em A. brasilense, a limitação de amônia seguida de disponibilidade repentina no meio extracelular leva a proteína AmtB a formar um complexo com as proteínas da família PII (GlnB e GlnZ). As proteínas PII são encontradas em quase todos os procariotos e plantas, são homotriméricas e participam na percepção de carbono, nitrogênio e energia. Em altos níveis de glutamina intracelular, cada monômero de PII pode ser uridililado de maneira reversível. Quando as proteínas PII estão em seu estado desuridililado, a formação do complexo Amt-PII é favorecida. A formação deste complexo também responde aos níveis de ATP/ADP e 2-oxoglutarato, sendo estabilizado por ADP. A regulação da atividade da nitrogenase, enzima responsável pela fixação biológica do nitrogênio, é auxiliada pelo sistema DraT e DraG. A enzima DraG ativa a nitrogenase removendo ADP-ribosil da subunidade NifH e DraT inativa a nitrogenase adicionando ADP-ribosil a NifH. As proteínas PII estão envolvidas na regulação das enzimas DraG e DraT. Em resposta a um choque de amônio, a proteína GlnZ interage com DraG possibilitando o carreamento de DraG para a membrana formando um complexo ternário AmtB-GlnZ-DraG que resulta na inativação de DraG. Concomitantemente, GlnB desuridililada interage com DraT, ativando a ADP-ribosilação da nitrogenase. As proteínas AmtB, DraT e GlnB vêm sendo purificadas e estudadas in vitro, no entanto, existem muitos eventos a serem melhor compreendidos no processo de fixação biológica de nitrogênio. No presente trabalho foi realizada, em sistema procarioto de purificação, a otimização da expressão e purificação da proteína HisAmtB de Azospirillum brasilense. Também se trabalhou com o intuito de se obter ótima expressão do complexo His-DraT-GlnB para purificação em condições que possibilitem, futuramente, a sua cristalização.1 recurso online : PDF.application/pdfExigências do sistema: Adobe Acrobat ReaderAzospirillum brasilenseProteínasOtimização da expressão e purificação das proteínas recombinantes His-Amtb e do complexo His-DraT/GlnB de Azospirillum brasilienseinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/bachelorThesisporreponame:Repositório Institucional da UFPRinstname:Universidade Federal do Paraná (UFPR)instacron:UFPRinfo:eu-repo/semantics/openAccessORIGINALMonografia Thiago Estefano Rodrigues.pdfapplication/pdf794119https://acervodigital.ufpr.br/bitstream/1884/30661/1/Monografia%20Thiago%20Estefano%20Rodrigues.pdf0f96f34c1cd0589751536a0ce3c7df4fMD51open accessTEXTMonografia Thiago Estefano Rodrigues.pdf.txtExtracted Texttext/plain85930https://acervodigital.ufpr.br/bitstream/1884/30661/2/Monografia%20Thiago%20Estefano%20Rodrigues.pdf.txt1aeb125411a3921b0acca52d9a292072MD52open accessTHUMBNAILMonografia Thiago Estefano Rodrigues.pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg1241https://acervodigital.ufpr.br/bitstream/1884/30661/3/Monografia%20Thiago%20Estefano%20Rodrigues.pdf.jpg9e8a14966e2ad8f24f963b3c7871c68dMD53open access1884/306612022-09-16 13:53:49.568open accessoai:acervodigital.ufpr.br:1884/30661Repositório de PublicaçõesPUBhttp://acervodigital.ufpr.br/oai/requestopendoar:3082022-09-16T16:53:49Repositório Institucional da UFPR - Universidade Federal do Paraná (UFPR)false
dc.title.pt_BR.fl_str_mv Otimização da expressão e purificação das proteínas recombinantes His-Amtb e do complexo His-DraT/GlnB de Azospirillum brasiliense
title Otimização da expressão e purificação das proteínas recombinantes His-Amtb e do complexo His-DraT/GlnB de Azospirillum brasiliense
spellingShingle Otimização da expressão e purificação das proteínas recombinantes His-Amtb e do complexo His-DraT/GlnB de Azospirillum brasiliense
Rodrigues, Thiago Estefano, 1984-
Azospirillum brasilense
Proteínas
title_short Otimização da expressão e purificação das proteínas recombinantes His-Amtb e do complexo His-DraT/GlnB de Azospirillum brasiliense
title_full Otimização da expressão e purificação das proteínas recombinantes His-Amtb e do complexo His-DraT/GlnB de Azospirillum brasiliense
title_fullStr Otimização da expressão e purificação das proteínas recombinantes His-Amtb e do complexo His-DraT/GlnB de Azospirillum brasiliense
title_full_unstemmed Otimização da expressão e purificação das proteínas recombinantes His-Amtb e do complexo His-DraT/GlnB de Azospirillum brasiliense
title_sort Otimização da expressão e purificação das proteínas recombinantes His-Amtb e do complexo His-DraT/GlnB de Azospirillum brasiliense
author Rodrigues, Thiago Estefano, 1984-
author_facet Rodrigues, Thiago Estefano, 1984-
author_role author
dc.contributor.other.pt_BR.fl_str_mv Araújo, Luíza Maria de
Universidade Federal do Paraná. Setor de Ciências Biológicas. Curso de Graduação em Ciências Biológicas
dc.contributor.author.fl_str_mv Rodrigues, Thiago Estefano, 1984-
dc.contributor.advisor1.fl_str_mv Huergo, Luciano Fernandes, 1978-
contributor_str_mv Huergo, Luciano Fernandes, 1978-
dc.subject.por.fl_str_mv Azospirillum brasilense
Proteínas
topic Azospirillum brasilense
Proteínas
description Orientador: Luciano Fernandes Huergo
publishDate 2011
dc.date.issued.fl_str_mv 2011
dc.date.accessioned.fl_str_mv 2022-09-16T16:53:49Z
dc.date.available.fl_str_mv 2022-09-16T16:53:49Z
dc.type.status.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/publishedVersion
dc.type.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/bachelorThesis
format bachelorThesis
status_str publishedVersion
dc.identifier.uri.fl_str_mv https://hdl.handle.net/1884/30661
url https://hdl.handle.net/1884/30661
dc.language.iso.fl_str_mv por
language por
dc.relation.requires.pt_BR.fl_str_mv Exigências do sistema: Adobe Acrobat Reader
dc.rights.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/openAccess
eu_rights_str_mv openAccess
dc.format.none.fl_str_mv 1 recurso online : PDF.
application/pdf
dc.source.none.fl_str_mv reponame:Repositório Institucional da UFPR
instname:Universidade Federal do Paraná (UFPR)
instacron:UFPR
instname_str Universidade Federal do Paraná (UFPR)
instacron_str UFPR
institution UFPR
reponame_str Repositório Institucional da UFPR
collection Repositório Institucional da UFPR
bitstream.url.fl_str_mv https://acervodigital.ufpr.br/bitstream/1884/30661/1/Monografia%20Thiago%20Estefano%20Rodrigues.pdf
https://acervodigital.ufpr.br/bitstream/1884/30661/2/Monografia%20Thiago%20Estefano%20Rodrigues.pdf.txt
https://acervodigital.ufpr.br/bitstream/1884/30661/3/Monografia%20Thiago%20Estefano%20Rodrigues.pdf.jpg
bitstream.checksum.fl_str_mv 0f96f34c1cd0589751536a0ce3c7df4f
1aeb125411a3921b0acca52d9a292072
9e8a14966e2ad8f24f963b3c7871c68d
bitstream.checksumAlgorithm.fl_str_mv MD5
MD5
MD5
repository.name.fl_str_mv Repositório Institucional da UFPR - Universidade Federal do Paraná (UFPR)
repository.mail.fl_str_mv
_version_ 1801860813782253568

Registros relacionados