Variabilidade dos exons 2 e 4 do gene BCHE e sua relaçao com a atividade da butirilcolinesterase

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Mikami, Liya Regina
Data de Publicação: 2005
Tipo de documento: Tese
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional da UFPR
Texto Completo: https://hdl.handle.net/1884/2800
Resumo: Orientadora : Eleidi A. Chautard-Freire-Maia
id UFPR_6d7e04a10d60ca432ee679ae7895d60d
oai_identifier_str oai:acervodigital.ufpr.br:1884/2800
network_acronym_str UFPR
network_name_str Repositório Institucional da UFPR
repository_id_str 308
spelling Mikami, Liya ReginaSouza, Ricardo Lehtonen Rodrigues deUniversidade Federal do Paraná. Setor de Ciências Biológicas. Programa de Pós-Graduação em GenéticaFreire-Maia, Eleidi Alice Chautard2018-09-05T21:55:01Z2018-09-05T21:55:01Z2005https://hdl.handle.net/1884/2800Orientadora : Eleidi A. Chautard-Freire-MaiaCo-orientador : Ricardo L.R. de SouzaTese (doutorado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciencias Biológicas, Programa de Pós-Graduaçao em Genética. Defesa: Curitiba, 2005Inclui bibliografiaA butirilcolinesterase (BChE) é uma enzima sérica produzida no fígado e adipócitos, sendo amplamente distribuída no organismo. É codificada pelo gene BCHE, onde mais de 50 alelos foram identificados, além do alelo mais freqüente: usual ou selvagem. Nesse estudo foram detectadas variantes do gene BCHE e determinadas suas freqüências, em amostras de doadores de sangue da população de Curitiba. A fim de priorizar o efeito das variantes desse gene sobre a atividade da BChE, algumas variáveis, que também exercem efeito sobre a atividade, foram tornadas constantes ou tiveram sua variância minimizada. Assim, consideraram-se apenas homens euro-brasileiros, de fenótipo CHE2 C5-, com faixa etária entre 18 e 30 anos e 20 = IMC = 25. Dos 570 indivíduos analisados quanto à atividade enzimática, foram separados 370, pertencentes a três grupos de atividade (baixa, média e alta), para serem examinados quanto à variação do DNA. As seqüências codificadoras dos exons 2 e 4 foram amplificadas e analisadas pela técnica de SSCA. Foram encontrados 12 tipos diferentes de variantes (11 no exon 2 e 1 no exon 4) em 127 das 370 amostras, sendo que 20 das 127 amostras apresentaram A539T do exon 4 (segunda variante mais freqüente) e uma outra mutação no exon 2. A variante A539T foi encontrada com uma freqüência total de 17,49% ± 1,40%, sendo mais freqüente no grupo de atividade baixa (32,63% ± 3,05%). A maioria das mutações no exon 2 também está concentrada no grupo de atividade baixa. A terceira mutação mais freqüente foi a D70G (1,80% ± 0,49%), seguida de E255D (0,98% ± 0,37%), A184V (0,70% ± 0,31%), T243M (0,28% ± 0,19%) e G390V (0,28% ± 0,19%). As outras variantes não sinônimas apareceram apenas em um heterozigoto cada (K12R, V294M, G333C e R470W), com freqüência alélica de 0,14% ± 0,14%. Além dessas variantes, foram encontradas duas mutações sinônimas, uma no grupo de atividade baixa (A162A; 0,14% ± 0,14%) e outra no de atividade média (G15G; 0,14% ± 0,14%). Cinco dessas mutações, K12R, G15G, V294M, G333C e R470W, ainda não tinham sido descritas. Plasmídeos contendo insertos com as quatro novas mutações não sinônimas, e três mutações (G75R, E90D e I99M) descritas por SOUZA et al. (no prelo) foram expressos em células 293T para determinar a atividade da BChE. Apenas a variante E90D condiciona fenótipo silencioso; as mutações G75R e G333C condicionam BChE com atividade de, respectivamente, 45% e 20% da atividade da enzima usual; as outras 4 mutações determinam BChE de atividade normal. O fato de muitas mutações causarem efeitos na estrutura e na expressão da BChE, podendo ser responsáveis pela diminuição na atividade enzimática, explica a maior proporção dos genótipos não usuais no grupo de atividade baixa, representando 79% dos encontrados no exon 2 e 56% dos encontrados no exon 4Butyrylcholinesterase (BChE) is a serum enzyme synthesized in the liver and adipose cells and it is widely distributed in the body. It is coded by the BCHE gene where more than 50 alleles had been identified, besides the most frequent allele: the usual or wild type. In this study BCHE gene variants were detected and their frequencies were determined in samples from blood donors of the Curitiba population. In order to give priority to the effect of gene variants on BChE activity, some variables which also affect this activity were set as constants or had their variance minimized. Thus, the subjects were only Euro-Brazilian males of the CHE2 C5- phenotype, aged from 18 to 30 years and with 20 = BMI = 25. Plasmas from the 570 subjects were tested for BChE activity and 370 of them classified into 3 activity groups (low, mean and high) were examined for DNA variation. Exons 2 and 4 of the coding sequence of the BCHE gene were amplified and analyzed by SSCA. Twelve different types of variants were found (11 in exon 2 and 1 in exon 4) in 127 out of 370 samples of which 20 samples presented the A539T variant in exon 4 (second more frequent variant) and another variant in exon 2 simultaneously. The A539T variant was found with a total frequency of 17.49% ± 1.40%, being more frequent in the low BChE activity group (32.63% ± 3.05%). Mostly of exon 2 mutations were found in the low activity group. The third more frequent variant was D70G (1.80% ± 0.49%), followed by E255D (0.98% ± 0.37%), A184V (0.70% ± 0.31%), T243M (0.28% ± 0.19%) and G390V (0.28% ± 0.19%). The other non synonymous variants were found only once in one heterozygote (K12R, G15G, V294M, G333C and R470W), with an allelic frequency of 0.14% ± 0.14%. Besides these, two synonymous mutations were found, one in the low activity group (A162A; 0.14% ± 0.14%) and another in the mean activity group (G15G; 0.14% ± 0.14%). Five of these mutations, K12R, G15G, V294M, G333C and R470W had not been previously reported. Plasmids containing the inserts with these 4 new non synonymous mutations and 3 mutations (G75R, E90D and I99M) described by SOUZA et al. (in press) were expressed in 293T cells in order to determine BChE activity. Only the E90D variant determines a silent phenotype; the G75R and G333C mutations are responsible for enzymes with BChE activity of about 45% and 20% of the wild type enzyme, respectively; the other 4 mutations determine BChE with normal activity. The fact that many mutations cause effects in BChE structure and expression, and may lead to decreased enzyme activity, explains the higher non usual genotype proportion in the low activity group, representing 79% of these genotypes found in exon 2 and 56% of these genotypes found in exon 4.180f. : il. algumas color., grafs., tabs.application/pdfDisponível em formato digitalTesesGeneticaButirilcolinesteraseExpressão gênicaVariabilidade dos exons 2 e 4 do gene BCHE e sua relaçao com a atividade da butirilcolinesteraseinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesisporreponame:Repositório Institucional da UFPRinstname:Universidade Federal do Paraná (UFPR)instacron:UFPRinfo:eu-repo/semantics/openAccessORIGINALR - T - LIYA REGINA MIKAMI.pdfapplication/pdf17546371https://acervodigital.ufpr.br/bitstream/1884/2800/1/R%20-%20T%20-%20LIYA%20REGINA%20MIKAMI.pdfebd6a3270a551b705cb323387a03ae52MD51open access1884/28002018-09-05 18:55:01.652open accessoai:acervodigital.ufpr.br:1884/2800Repositório de PublicaçõesPUBhttp://acervodigital.ufpr.br/oai/requestopendoar:3082018-09-05T21:55:01Repositório Institucional da UFPR - Universidade Federal do Paraná (UFPR)false
dc.title.pt_BR.fl_str_mv Variabilidade dos exons 2 e 4 do gene BCHE e sua relaçao com a atividade da butirilcolinesterase
title Variabilidade dos exons 2 e 4 do gene BCHE e sua relaçao com a atividade da butirilcolinesterase
spellingShingle Variabilidade dos exons 2 e 4 do gene BCHE e sua relaçao com a atividade da butirilcolinesterase
Mikami, Liya Regina
Teses
Genetica
Butirilcolinesterase
Expressão gênica
title_short Variabilidade dos exons 2 e 4 do gene BCHE e sua relaçao com a atividade da butirilcolinesterase
title_full Variabilidade dos exons 2 e 4 do gene BCHE e sua relaçao com a atividade da butirilcolinesterase
title_fullStr Variabilidade dos exons 2 e 4 do gene BCHE e sua relaçao com a atividade da butirilcolinesterase
title_full_unstemmed Variabilidade dos exons 2 e 4 do gene BCHE e sua relaçao com a atividade da butirilcolinesterase
title_sort Variabilidade dos exons 2 e 4 do gene BCHE e sua relaçao com a atividade da butirilcolinesterase
author Mikami, Liya Regina
author_facet Mikami, Liya Regina
author_role author
dc.contributor.other.pt_BR.fl_str_mv Souza, Ricardo Lehtonen Rodrigues de
Universidade Federal do Paraná. Setor de Ciências Biológicas. Programa de Pós-Graduação em Genética
dc.contributor.author.fl_str_mv Mikami, Liya Regina
dc.contributor.advisor1.fl_str_mv Freire-Maia, Eleidi Alice Chautard
contributor_str_mv Freire-Maia, Eleidi Alice Chautard
dc.subject.por.fl_str_mv Teses
Genetica
Butirilcolinesterase
Expressão gênica
topic Teses
Genetica
Butirilcolinesterase
Expressão gênica
description Orientadora : Eleidi A. Chautard-Freire-Maia
publishDate 2005
dc.date.issued.fl_str_mv 2005
dc.date.accessioned.fl_str_mv 2018-09-05T21:55:01Z
dc.date.available.fl_str_mv 2018-09-05T21:55:01Z
dc.type.status.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/publishedVersion
dc.type.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/doctoralThesis
format doctoralThesis
status_str publishedVersion
dc.identifier.uri.fl_str_mv https://hdl.handle.net/1884/2800
url https://hdl.handle.net/1884/2800
dc.language.iso.fl_str_mv por
language por
dc.relation.pt_BR.fl_str_mv Disponível em formato digital
dc.rights.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/openAccess
eu_rights_str_mv openAccess
dc.format.none.fl_str_mv 180f. : il. algumas color., grafs., tabs.
application/pdf
dc.source.none.fl_str_mv reponame:Repositório Institucional da UFPR
instname:Universidade Federal do Paraná (UFPR)
instacron:UFPR
instname_str Universidade Federal do Paraná (UFPR)
instacron_str UFPR
institution UFPR
reponame_str Repositório Institucional da UFPR
collection Repositório Institucional da UFPR
bitstream.url.fl_str_mv https://acervodigital.ufpr.br/bitstream/1884/2800/1/R%20-%20T%20-%20LIYA%20REGINA%20MIKAMI.pdf
bitstream.checksum.fl_str_mv ebd6a3270a551b705cb323387a03ae52
bitstream.checksumAlgorithm.fl_str_mv MD5
repository.name.fl_str_mv Repositório Institucional da UFPR - Universidade Federal do Paraná (UFPR)
repository.mail.fl_str_mv
_version_ 1801860823162814464

Registros relacionados