Sequenciamento e sub-clonagem do gene recX de Herbaspirillum seropedicae

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Galvao, Carolina Weigert
Data de Publicação: 1999
Tipo de documento: Trabalho de conclusão de curso
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional da UFPR
Texto Completo: https://hdl.handle.net/1884/32780
Resumo: Orientadora: Maria B. R. Steffens
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spelling Galvao, Carolina WeigertUniversidade Federal do Paraná. Setor de Ciências Biológicas. Curso de Graduação em Ciências BiológicasSteffens, Maria Berenice Reynaud, 1963-20212022-08-22T13:16:44Z2022-08-22T13:16:44Z1999https://hdl.handle.net/1884/32780Orientadora: Maria B. R. SteffensMonografia (Bacharelado) - Universidade federal do Paraná. Setor de Ciencias Biológicas. Curso de Graduaçao em Ciencias BiológicasResumo : o gene recA de H. seropedicae, contido em um fragmento de 4,5 kb EcoRI, no plasmídeo pBMR5, hibridizou com o gene recA de E. coli K12. Dois fragmentos, 3,6 kb Hindlll e 0,7 kb EcoRIIHindlll, contidos no fragmento de 4,5 kb EcoRI, foram subclonados separadamente nos vetores pTZ18R e pTZ19R, originando os plasmídeos pBMR503 e pBMR19, respectivamente. O seqüenciamento total do DNA inserto do pBMR19 e o parcial do pBMR503 produziu uma seqüência contínua de bases, que, quando submetida a comparações no banco de dados, revelou homologia com a proteína RecX de diversos organismos. A seqüência do gene recX de H. seropedicae está depositada no Genbank sob o número de acesso AF084045. No intuito de expressar a proteína RecX, foram construídos primers, que, além de conterem bases complementares a região 5' e 3' do gene, apresentavam sítios de restrição adequados para posterior clonagem em vetor de expressão. O plasmídeo pBMR5 foi utilizado como DNA molde na reação de amplificação que originou fragmentos com tamanhos variados. Os fragmentos foram utilizados como DNA-inserto na ligação com o vetor pTZ19R. Após várias análises dos clones resultantes da ligação, dois plasmídeos, pCWG3 e pGWG10, por apresentaram insertos com o tamanho esperado, 0,5kb, foram isolados e serão submetidos ao seqüenciamento. Os resultados obtidos confirmam a presença do gene recX, organizado de forma contígua ao gene recA, e indicam a possível clonagem do gene recX de H. seropedicae no vetor pTZ19R1 recurso online : PDF.application/pdfHerbaspirillum seropedicaeGenesSequenciamento e sub-clonagem do gene recX de Herbaspirillum seropedicaeinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/bachelorThesisporreponame:Repositório Institucional da UFPRinstname:Universidade Federal do Paraná (UFPR)instacron:UFPRinfo:eu-repo/semantics/openAccessORIGINALMonografia Carolina Weigert.pdfapplication/pdf11939699https://acervodigital.ufpr.br/bitstream/1884/32780/1/Monografia%20Carolina%20Weigert.pdf0e03af52a79222205cd5a132be00001cMD51open accessTEXTMonografia Carolina Weigert.pdf.txtExtracted Texttext/plain81555https://acervodigital.ufpr.br/bitstream/1884/32780/2/Monografia%20Carolina%20Weigert.pdf.txt71083be8a9ed74146436487ca128d3b6MD52open accessTHUMBNAILMonografia Carolina Weigert.pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg1232https://acervodigital.ufpr.br/bitstream/1884/32780/3/Monografia%20Carolina%20Weigert.pdf.jpg6f56fb5ad84ec9e60e5c95b0955e7a62MD53open access1884/327802022-08-22 10:16:44.465open accessoai:acervodigital.ufpr.br:1884/32780Repositório de PublicaçõesPUBhttp://acervodigital.ufpr.br/oai/requestopendoar:3082022-08-22T13:16:44Repositório Institucional da UFPR - Universidade Federal do Paraná (UFPR)false
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