Produção e caracterização de anticorpos monoclonais anti-gp51 do vírus Leucose Bovina (VLB)

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Troiano, Ludmilla Della Coletta
Data de Publicação: 2009
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional da UFPR
Texto Completo: https://hdl.handle.net/1884/24175
Resumo: Orientadora: Profa. Dra. Vanete Thomaz Soccol
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spelling Universidade Federal do Paraná. Setor de Tecnologia. Programa de Pós-Graduação em Engenharia de Bioprocessos e BiotecnologiaThomaz-Soccol, Vanete, 1954-Troiano, Ludmilla Della Coletta2024-04-15T18:43:37Z2024-04-15T18:43:37Z2009https://hdl.handle.net/1884/24175Orientadora: Profa. Dra. Vanete Thomaz SoccolDissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Tecnologia, Programa de Pós-Graduação em Processos Biotecnológicos. Defesa: Curitiba, 10/09/2009Bibliografia: fls. 90-94Área de concentração: Saúde Animal e HumanaResumo: O objetivo do presente trabalho foi produzir e caracterizar anticorpos monoclonais (AcMc) contra proteína gp51 para insumo de diagnóstico da Leucose Enzoótica Bovina. Foram utilizadas duas preparações do antígeno para imunização em camundongos BALB/c, a partícula viral in natura e o vírus lisado. Estas preparações foram selecionadas para obtenção de anticorpos monoclonais específicos para proteínas da partícula viral e proteínas virais intracelulares do VLB, respectivamente. Os animais foram imunizados por via intraperitonial devido a toxicidade causada pelo tampão de lise em outras vias de noculação. A fusão realizada originou 274 colônias de hibridomas, sendo 18 hibridomas positivos em ELISA indireto e nove fraco positivo, inicialmente descartados. O teste de estabilidade de secreção de anticorpos permitiu selecionar 10 hibridomas, que foram caracterizados pela rea ividade em Western Blotting, para proteína gp51 (dez AcMc), e por isotipagem em IgG1 (um AcMc); IgM (nove AcMc). Todos os AcMc foram produzidos para gp51 comprovando ser a proteína do VLB mais imunogênica e acessível, presente em diferentes preparações antigênicas. A produção de AcMc ascítico mostrou aumento qualitativo e quantitativo de secreção de anticorpos, quando comparado aos AcMc que não foram submetidos ao líquido ascítico.Abstract: The objective of this work was to produce and characterize monoclonal antibodies (mAbs) against the protein gp51 for a diagnosis input of the Bovine Enzootic Leukosis. Two different preparations of the antigen for immunizing BALB/c mice were used, in natura viral particle and lysate virus. These preparations were selected to obtain specific monoclonal antibodies for the viral particle protein and BLV intracellular viral proteins, respectively. The animals were immunized through intraperitoneal way due to the toxicity caused by the lysis buffer in other ways of inoculation. The fusion originated 274 hybridoma colonies, from which 18 hybridomas were positive on indirect ELISA and nine were weak positive, initially discarded. The stability test of antibodies secretion, 10 hybridomas were selected, characterized by the Western Blotting reactivity, for the protein gp51 (ten mAbs) and by isotyping IgG1 (one mAb); IgM (nine mAbs). All mAbs were produced for gp51 proving to be the BLV most immunogenic and accessible protein present in different antigenic preparations. The production of ascitis mAbs has shown a qualitative and quantitative improvement of the mAbs secretion when compared with the (mAbs) were not subject to ascites fluid.101f. : il.[algumas color.], tabs.application/pdfDisponível em formato digitalAnticorpos monoclonaisVirus da leucose bovinaTecnologia químicaProdução e caracterização de anticorpos monoclonais anti-gp51 do vírus Leucose Bovina (VLB)info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisporreponame:Repositório Institucional da UFPRinstname:Universidade Federal do Paraná (UFPR)instacron:UFPRinfo:eu-repo/semantics/openAccessORIGINALTESE_VERSAO_CORRIGIDA.pdfapplication/pdf997851https://acervodigital.ufpr.br/bitstream/1884/24175/1/TESE_VERSAO_CORRIGIDA.pdfdfe161480b54cf0a11e43ec3c1c335f8MD51open accessTEXTTESE_VERSAO_CORRIGIDA.pdf.txtExtracted Texttext/plain169034https://acervodigital.ufpr.br/bitstream/1884/24175/2/TESE_VERSAO_CORRIGIDA.pdf.txt388f8914bec37013bfdb7913f091f54fMD52open accessTHUMBNAILTESE_VERSAO_CORRIGIDA.pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg1308https://acervodigital.ufpr.br/bitstream/1884/24175/3/TESE_VERSAO_CORRIGIDA.pdf.jpg58ce3fda6d0a1c3a91a6f755e6271451MD53open access1884/241752024-04-15 15:43:37.467open accessoai:acervodigital.ufpr.br:1884/24175Repositório de PublicaçõesPUBhttp://acervodigital.ufpr.br/oai/requestopendoar:3082024-04-15T18:43:37Repositório Institucional da UFPR - Universidade Federal do Paraná (UFPR)false
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