Expressão e purificação da proteína recombinante 6HIS-ADAM23 e sua utilização como antígeno na produção de anticorpos

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Costa, Michele Dietrich Moura
Data de Publicação: 2005
Tipo de documento: Trabalho de conclusão de curso
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional da UFPR
Texto Completo: https://hdl.handle.net/1884/32596
Resumo: Orientador: Sílvio Marques Zanata
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spelling Costa, Michele Dietrich MouraUniversidade Federal do Paraná. Setor de Ciências Biológicas. Curso de Graduação em Ciências BiológicasZanata, Silvio Marques, 1974-2022-09-05T12:25:38Z2022-09-05T12:25:38Z2005https://hdl.handle.net/1884/32596Orientador: Sílvio Marques ZanataMonografia (Bacharelado) - Universidade Federal do Paraná. Setor de Ciencias Biológicas. Curso de Graduaçao em Ciencias BiológicasResumo : Durante o desenvolvimento do sistema nervoso, as células nervosas precursoras migram para seus destinos finais e os axônios crescem ao longo de um trajeto preciso e consistente até que encontrem seus alvos, com os quais estabelecem contatos especializados. Ao prosseguir sua navegação em direção ao alvo, axônios defrontam tanto com moléculas adesivas da matriz extracelular como da superfície das células, sendo que estas moléculas podem promover o crescimento axônico. ADAM23 é uma proteína potencial de adesão célula-célula e célula-matriz extracelular e é principalmente expressa no sistema nervoso central. Estes fatos sugerem que ADAM23 pode ter um importante papel na manutenção estrutural e funcional do sistema nervoso. Neste trabalho, a proteína recombinante ADAM23 foi expressa em sistema heterólogo de Escherichia coli com etiqueta de seis histidinas a partir do vetor de expressão pET32 e em seguida purificada, sob condições desnaturantes, por cromatorafia de afinidade a metal imobilizado. A eficiência da purificação foi comprovada por ensaio de Western Blotting, no qual a proteína purificada foi reconhecida por dois diferentes anticorpos: anti-sHis e anti-peptídeo ADAM23. Um coelho da raça neozelandesa foi imunizado com a proteína recombinante. O soro hiperimune (após a quinta e a sétima imunização) foi empregado em ensaios de Western Blotting após a separação do antígeno por SDSPAGE. Os anticorpos policlonais presentes no soro hiperimune foram capazes de reconhecer tanto a proteína recombinante, como ao antígeno expresso no cérebro de camundongos adultos e recém-natos, validando a capacidade dos anticorpos no reconhecimento da proteína ADAM23 endógena.1 recurso online : PDF.application/pdfProteinas AAnticorpos policlonaisExpressão e purificação da proteína recombinante 6HIS-ADAM23 e sua utilização como antígeno na produção de anticorposinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/bachelorThesisporreponame:Repositório Institucional da UFPRinstname:Universidade Federal do Paraná (UFPR)instacron:UFPRinfo:eu-repo/semantics/openAccessORIGINALMonografia Michele Dietrich Moura Costa.pdfapplication/pdf7131874https://acervodigital.ufpr.br/bitstream/1884/32596/1/Monografia%20Michele%20Dietrich%20Moura%20Costa.pdfa1e71072e3d7fde86b147d4d0b654117MD51open accessTEXTMonografia Michele Dietrich Moura Costa.pdf.txtExtracted Texttext/plain61267https://acervodigital.ufpr.br/bitstream/1884/32596/2/Monografia%20Michele%20Dietrich%20Moura%20Costa.pdf.txt7ab097588bbfc2611a819e5afa144db5MD52open accessTHUMBNAILMonografia Michele Dietrich Moura Costa.pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg1336https://acervodigital.ufpr.br/bitstream/1884/32596/3/Monografia%20Michele%20Dietrich%20Moura%20Costa.pdf.jpga8d1df915ad4631d29bcf76c51287376MD53open access1884/325962022-09-05 09:25:38.841open accessoai:acervodigital.ufpr.br:1884/32596Repositório de PublicaçõesPUBhttp://acervodigital.ufpr.br/oai/requestopendoar:3082022-09-05T12:25:38Repositório Institucional da UFPR - Universidade Federal do Paraná (UFPR)false
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