Estudo do efeito de ácidos graxos livres sobre mitocôndrias
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Data de Publicação: | 1983 |
Tipo de documento: | Tese |
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Universidade Federal do Paraná. Setor de Ciências Biológicas. Programa de Pós-Graduação em Ciências (Bioquímica)Nascimento, Aguinaldo José do, 1946-Guedes, Levy dos Santos2023-01-27T13:14:18Z2023-01-27T13:14:18Z1983https://hdl.handle.net/1884/78704Orientador: Dr. Aguinaldo José do NascimentoTese (Doutorado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Curso de Pós-Graduação em BioquímicaInclui referências: p. 59-75Resumo: Utilizando-se técnicas espectrofotométricas e polarográficas convencionais, foi analisado o efeito de sais de ácidos graxos de cadeia longa e DNP sobre o metabolismo mitocondrial e foram feitas determinações dos níveis de lipoperoxidos em mitocôndrias frescas isoladas de fígado de rato, em mitocôndrias envelhecidas e em mitocôndrias preservadas em meio de incubação de Montano et al. (Arq.Biol.Tecnol, 24:375-384,1981. Baixas concentrações de sais de ácidos graxos estimularam a respiração e o RC mitocondrial. A adição de concentrações crescentes destes compostos inibiu a respiração e reduziu o RC a unidade. A relação ADP:0 também sofreu uma redução, possível mente por ter havido uma redução na transposição de ADP através da membrana mitocondrial. A adição de oleato a mitocôndrias intactas alterou a sua integridade estrutural e desfez o potencial de membrana e em partículas submitocondriais de coração bovino, houve um estimulo na atividade da ATPase dependente da concentração do substrato. A respiração mitocondrial no estado IV sofreu um estímulo seguido de inibição na presença de concentrações crescentes de DNP e o RC foi reduzido rapidamente a unidade. A adição de oleato a mitocôndrias parcialmente desacopladas por DNP, restaurou a respiração e o RC a níveis normais. Mitocôndrias preservadas em meio de incubação de Montano et al., apresentaram um declínio na atividade da ATPas estimulada por DNP, com o tempo de incubação. Foram feitas determinações dos níveis de lipoperoxidos monitoradas pela reação com o TBA e por leituras espectrofotométricas da absorção em 233 nm. Em mitocôndrias envelhecidas os níveis de lipoperóxidos aumentaram gradativamente durante 120 horas, enquanto que em mitocôndrias preservadas esses níveis aumentaram rapidamente atingindo um máximo entre 24 e 48 horas. Nestas condições o RC e os níveis de Pi total sofreram uma redução em torno de 40%, com relação a mitocôndria fresca e continuaram diminuindo com o decaimento nos níveis de lipoperóxidos. Estes resultados sugerem que houve um estimulo na formação de lipoperóxidos, quando foram preservadas as atividades vitais da mitocôndria. É discutido neste trabalho, um possível relaciona mento entre o efeito de ácidos graxos livres sobre mitocôndrias frescas e sua peroxidação na suspensão mitocondrial.Abstract: In the present work we determine, using conventional spectrophotometric and polarographic techniques, 1- The effect of salts of long chain fatty acids and DNP on mitochondrial metabolism, and 2- The levels of lipoperoxides in mitochondria freslhy isolated from rat liver, aged and preserved in an incubation medium (Montano et al. Arq. Biol. Tecnol. 24: 375-384, 1981). Low concentrations of salts of fatty acids stimulates the mitochondrial respiration and RC coefficient. Addition of an increasing concentration of these compounds inhibits respiration and reduces the RC coefficient to unity. The ADP:0 ration was also reduced, probably by a reduction in the ADP transposition through the mitochondrial membrane. Addition of oleate to intact mitochondria alters its structural integrity and decreases the membrane potential. It was found that stimulation of substrate-concentration dependent ATPase activity occurs in bovine heart submitochondrial particles . Increasing concentrations of DNP administred to intact mitochondria, stimulated state IV of respiration, followed by respiratory inhibition, while the RC coefficient was reduced to unity. Addition of oleate to mitochondria, partially uncoupled by DNP, restored respiration and restored the RC coefficient to normal levels. In mitochondria preserved in the incubation medium of Montano et al., the ATPase-DNP stimulated activity decreased with the time of incubation. Levels of lipoperoxides were monitored by reaction with TBA and by spectrophotometric estimation at 233 nm. In, aged mitochondria, the levels of lipoperoxides increased gradually during 120 hr, while in preserved mitochondria the levels increased rapidly reaching a maximum in 24-48 hr. Under such conditions the RC coefficient and the levels of total Pi were about 40% of those of fresh mitochondria. These results suggest that stimulation of formation of lipid peroxides occurs when the vital activity of mitochondria is preserved. Diccussed herein is a possible relationship between the effect of salts of free fatty acids on fresh mitochondria and their peroxidations in the mitochondrial suspension.75 p. : il., grafs.application/pdfDisponível em formato digitalTesesBioquímicaEstudo do efeito de ácidos graxos livres sobre mitocôndriasinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesisporreponame:Repositório Institucional da UFPRinstname:Universidade Federal do Paraná (UFPR)instacron:UFPRinfo:eu-repo/semantics/openAccessORIGINALD - T - LEVY DOS SANTOS GUEDES.pdfapplication/pdf5458920https://acervodigital.ufpr.br/bitstream/1884/78704/1/D%20-%20T%20-%20LEVY%20DOS%20SANTOS%20GUEDES.pdf9f34ea0ef85a030c08b180518643aba1MD51open access1884/787042023-01-27 10:14:18.938open accessoai:acervodigital.ufpr.br:1884/78704Repositório de PublicaçõesPUBhttp://acervodigital.ufpr.br/oai/requestopendoar:3082023-01-27T13:14:18Repositório Institucional da UFPR - Universidade Federal do Paraná (UFPR)false |
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