Viabilidade in vitro apos vitrificação de blastocistos de Mus domesticus domesticus cultivados a partir de embriões de 1-celula

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Basile, Leandro Francisco
Data de Publicação: 1999
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional da UFPR
Texto Completo: https://hdl.handle.net/1884/37413
Resumo: Orientador: Jose Luiz Rodrigues
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spelling Universidade Federal do Paraná. Setor de Ciências Agrárias. Programa de Pós-Graduação em Ciências VeterináriasRodrigues, Jose LuizBasile, Leandro Francisco2024-06-10T11:57:19Z2024-06-10T11:57:19Z1999https://hdl.handle.net/1884/37413Orientador: Jose Luiz RodriguesDissertação (mestrado) - Universidade Federal do Parana, Setor de Ciencias AgrariasResumo: Foram realizados três experimentos para se avaliar o desenvolvimento in vitro de blastocistos de Mus domesticus domesticus (CF1xSWISS) cultivados a partir de embriões de 1-célula, após exposição e vitrificação em solução crioprotetora contendo 9,0M de EG acrescido ou não de 0,3M de SAC. No experimento 1, após o cultivo de 755 embriões de 1-célula, foram observadas taxas de eclosão de 53,0% para o meio HTF e de 61.7% para o meio KSOM (P>0,05), suplementados com 4mg/ml de BSA + 20 e 25mM de HEPES. No experimento 2 testaram-se os possíveis efeitos tóxicos das soluções crio protetoras propostas: VS1 = 1,8M EG em PBS + 6%BSA (60s) seguido de 9,0M EG em PBS + 6%BSA (imersão direta) e VS2 = 9,0M EG + 0,3M SAC em PBS + 6%BSA (imersão direta) em 152 blastocistos cultivados a partir de embriões de 1-célula em meio KSOM com 25mM de HEPES. Não houve diferença significativa (P>0,05) entre os grupos controle (86,0%), VS1 (82,3%) e VS2 (78,4%). No experimento 3, 140 blastocistos cultivados por 72h em meio KSOM com 4mg/ml de BSA e 25mM de HEPES foram vitrificados em palhetas de 0,25ml modificadas (OPSm) nas soluções crioprotetoras acima descritas, alcançando taxas de eclosão de 45,7 e 41,4% para VS1 e VS2 (P>0,05), respectivamente. Portanto, concluiu-se que ambos os meios, HTF e KSOM acrescidos de BSA e HEPES, proporcionaram o completo desenvolvimento embrionário in vitro. Apesar de não ter ocorrido diferença estatística (P>0,05), no meio KSOM observou-se que os embriões tiveram uma curva de crescimento mais homogênea e melhores taxas de eclosão, representando mais uma alternativa para o cultivo de embriões de 1-célula. Igualmente, não houve variação significativa (P>0,05) nas taxas de eclosão para os blastocistos de Mus domesticus domesticus vitrificados nas soluções crioprotetoras contendo 9,0M de EG com ou sem o acréscimo de 0,3M de SACAbstract: Three experiments were carried out in order to evaluate the in vitro development of Mus domesticus domesticus (CF1 x SWISS) blastocysts cultured from one-cell embryos after exposition and vitrification in a cryoprotectant solution composed of 9.0M EG additioned or no of 0.3M SAC. In the first experiment, after the culture of 755 one-cell embryos, were observed the hatching rates of 53.0% for HTF medium and 61.7% for KSOM medium (P>0.05) supplemented with 4mg/ml BSA + 20 and 25mM HEPES, respectively. In the second experiment were evaluated the capacity of the embryos to hatching after exposition to the cryoprotectant solutions proposed (VS1 = 1.8M EG in PBS + 6% BSA (120s) followed by 9.0M EG in PBS + 6% BSA and VS2 = 9.0M EG + 0.3M SAC in PBS + 6% BSA). First the embryos were cultured from one-cell to blastocyst stage and after 152 blastocysts were exposed to the vitrification solutions (VS1 and VS2). The exposition don't showed significant difference (P>0.05) among the control (86.0%), VS1 (82.3%) and VS2 (78.4%) groups. In the third experiment 140 blastocysts cultured for 72h in KSOM with 4mg/ml BSA + 25mM HEPES were vitrified in 0.25ml modified straws (OPSm) in the cryoprotectant solutions previously described, reaching hatching rates of 45.7 and 41.4% in VS1 and VS2 (P>0.05), respectively. Then, it was concluded that both, HTF and KSOM + BSA and HEPES produced a complete in vitro preimplantation embryos development.. However, the embryos cultured in KSOM medium showed a homogeneous growing curvature and higher hatching rates, which can be another alternative for culture of one-cell embryos. Equally, there were no differences (P>0.05) in the hatching rates between Mus domesticus domesticus vitrifed blastocysts in cryoprotectant solutions containing 9.0M EG with or without the addition of 0.3M SAC61f. ; 30cm.application/pdfDisponível em formato digitalEmbriologia veterinariaRato - Recursos do germoplasma - CriopreservaçãoFertilização in vitroBovinos - Transferência de embriões - TécnicaTesesViabilidade in vitro apos vitrificação de blastocistos de Mus domesticus domesticus cultivados a partir de embriões de 1-celulainfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisporreponame:Repositório Institucional da UFPRinstname:Universidade Federal do Paraná (UFPR)instacron:UFPRinfo:eu-repo/semantics/openAccessTHUMBNAILD - LEANDRO FRANCISCO BASILE.pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg1287https://acervodigital.ufpr.br/bitstream/1884/37413/1/D%20-%20LEANDRO%20FRANCISCO%20BASILE.pdf.jpgf5c852ae74b41415f2e4798cf5cca674MD51open accessTEXTD - LEANDRO FRANCISCO BASILE.pdf.txtExtracted Texttext/plain90327https://acervodigital.ufpr.br/bitstream/1884/37413/2/D%20-%20LEANDRO%20FRANCISCO%20BASILE.pdf.txt30722b6aba267ffdf8fd6aea61d8e3dfMD52open accessORIGINALD - LEANDRO FRANCISCO BASILE.pdfapplication/pdf1523696https://acervodigital.ufpr.br/bitstream/1884/37413/3/D%20-%20LEANDRO%20FRANCISCO%20BASILE.pdfe053f4ae35978ad72faeeb965e7c381cMD53open access1884/374132024-06-10 08:57:19.961open accessoai:acervodigital.ufpr.br:1884/37413Repositório de PublicaçõesPUBhttp://acervodigital.ufpr.br/oai/requestopendoar:3082024-06-10T11:57:19Repositório Institucional da UFPR - Universidade Federal do Paraná (UFPR)false
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