Efeitos do TCDD (2, 3, 7, 8-tetraclorodibenzo-P-dioxina) e BDE-209 (decabromodifenil éter) na malignidade de células de melanoma murino B16-F1 in vitro

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Steil, Gisleine Jarenko, 1989-
Data de Publicação: 2016
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional da UFPR
Texto Completo: https://hdl.handle.net/1884/74003
Resumo: Orientador: Prof. Dr. Francisco Filipak Neto
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spelling Steil, Gisleine Jarenko, 1989-Universidade Federal do Paraná. Setor de Ciências Biológicas. Programa de Pós-Graduação em Biologia Celular e MolecularFilipak Neto, Francisco, 1981-2022-03-23T21:25:39Z2022-03-23T21:25:39Z2016https://hdl.handle.net/1884/74003Orientador: Prof. Dr. Francisco Filipak NetoDissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Biologia Celular e Molecular. Defesa : Curitiba, 31/03/2016Inclui referências: p. 88-98Resumo: Apesar de a quimioterapia ser o principal tratamento utilizado para tumores, em muitos casos ocorre resistência das células tumorais ao tratamento, piorando o prognóstico. O melanoma é a forma mais letal de câncer de pele, sendo altamente metastático e uma linhagem utilizada para estudos relacionados é B16-F1 que é metastática e pode ser utilizada para estudos in vitro e in vivo. O surgimento de alguns tipos de cânceres apresenta relação com fatores ambientais como, por exemplo, contaminantes ambientais. O TCDD (2,3,7,8-tetraclorodibenzo-p-dioxina) e o BDE-209 (decabromodifenil éter) são contaminantes que podem bioacumular nos estoques de gordura do organismo e ser disponibilizados quando há utilização destes estoques, sendo assim, surge a questão se esses contaminantes poderiam aumentar a agressividade de células tumorais, interferirem no tratamento e piorar o prognóstico da doença. Portanto, o objetivo do presente trabalho é avaliar se a exposição ao TCDD e BDE-209 afeta a malignidade de células tumorais utilizando a linhagem B16-F1 in vitro. As células foram cultivadas e expostas às concentrações: 0,001; 0,01; 0,1; 1 e 10 nM dos dois contaminantes durante 24 horas. Houve redução da retenção do corante vermelho neutro (relacionado com integridade do sistema endomembranas) e proliferação (com 10% de SBF) nas maiores concentrações de BDE-209, além de aumento do metabolismo do MTT na concentração de 10 nM, sugerindo maior estresse celular nessas concentrações. Ocorreu maior citotoxicidade na concentração de 0,01 nM (BDE-209) e 0,1 nM (TCDD). Não ocorreu alteração nos parâmetros de atividade de transportadores de efluxo de drogas e produção de espécies reativas de oxigênio. Houve aumento da proliferação celular de forma dependente da concentração para a maioria das concentrações de ambos os contaminantes em células expostas utilizando 2% de SFB. Houve alterações nas fases do ciclo celular: o TCDD aumentou a quantidade de células na fase S (0,001 nM) e diminuiu a quantidade de células na fase G2/M (10 nM); já o BDE-209 diminuiu a quantidade de células na fase G1 (0,01 nM) e aumentou a quantidade de células na fase S (0,1 nM). No grupo exposto a 1 nM de BDE-209 houve maior fechamento do risco no ensaio scratch. A viabilidade e a proliferação de células expostas ao contaminante BDE-209 e posteriormente ao quimioterápico dacarbazina foram aumentadas na maioria dos grupos expostos. Já para o contaminante TCDD houve aumento de viabilidade apenas na concentração de 0,1 nM e, apesar de apresentar um aumento de proliferação de forma concentração-dependente, apenas na concentração de 10 nM foi significativa. Como conclusão, para algumas concentrações de ambos os contaminantes utilizados, as células tumorais B16-F1 apresentaram características que permitem considerá-las mais agressivas, como aumento de resistência ao quimioterápico dacarbazina, proliferação e fechamento de scratch, sendo condizentes com a hipótese do presente trabalho.Abstract: Although chemotherapy is the main treatment used for tumors, in many cases there is resistance of tumor cells to the treatment, worsening the prognosis. Melanoma is the most lethal form of skin cancer, being highly metastatic and a strain used for related studies is B16-F1 which is metastatic and can be used for in vitro and in vivo studies. The emergence of some types of cancer is related to environmental factors such as environmental contaminants. TCDD (2,3,7,8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin) and BDE-209 (decabromodiphenyl ether) are contaminants that can bioaccumulate in the body's fat stores and become available when these stores are used. the question whether these contaminants could increase the aggressiveness of tumor cells, interfere with the treatment and worsen the disease's prognosis. Therefore, the aim of the present work is to evaluate whether exposure to TCDD and BDE-209 affects the malignancy of tumor cells using the B16-F1 lineage in vitro. Cells were cultured and exposed to concentrations: 0.001; 0.01; 0.1; 1 and 10 nM of the two contaminants for 24 hours. There was a reduction in the retention of neutral red dye (related to the integrity of the endomembrane system) and proliferation (with 10% SBF) at the highest concentrations of BDE-209, in addition to an increase in MTT metabolism at a concentration of 10 nM, suggesting greater cell stress at these concentrations. There was greater cytotoxicity at concentrations of 0.01 nM (BDE-209) and 0.1 nM (TCDD). There was no change in the activity parameters of drug efflux transporters and production of reactive oxygen species. There was a concentration-dependent increase in cell proliferation for most concentrations of both contaminants in cells exposed using 2% FCS. There were changes in cell cycle phases: TCDD increased the number of cells in the S phase (0.001 nM) and decreased the number of cells in the G2/M phase (10 nM); BDE-209, on the other hand, decreased the number of cells in the G1 phase (0.01 nM) and increased the number of cells in the S phase (0.1 nM). In the group exposed to 1 nM of BDE-209, there was greater risk closure in the scratch assay. The viability and proliferation of cells exposed to the contaminant BDE-209 and later to the chemotherapeutic drug dacarbazine were increased in most exposed groups. As for the TCDD contaminant, there was an increase in viability only at the concentration of 0.1 nM and, despite showing an increase in proliferation in a concentration-dependent manner, only at the concentration of 10 nM it was significant. In conclusion, for some concentrations of both contaminants used, the B16-F1 tumor cells presented characteristics that allow us to consider them more aggressive, such as increased resistance to the chemotherapeutic drug dacarbazine, proliferation and scratch closure, which are consistent with the hypothesis of the present work.1 recurso online : PDF.application/pdfMelanomaToxicologiaCelulas cancerosasCâncer - PesquisaPele - CâncerTumoresMorfologiaEfeitos do TCDD (2, 3, 7, 8-tetraclorodibenzo-P-dioxina) e BDE-209 (decabromodifenil éter) na malignidade de células de melanoma murino B16-F1 in vitroinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisporreponame:Repositório Institucional da UFPRinstname:Universidade Federal do Paraná (UFPR)instacron:UFPRinfo:eu-repo/semantics/openAccessORIGINALR - D - GISLEINE JARENKO STEIL.pdfapplication/pdf17329818https://acervodigital.ufpr.br/bitstream/1884/74003/1/R%20-%20D%20-%20GISLEINE%20JARENKO%20STEIL.pdf5e30b557facecefdcb8d66dd9d91ddeeMD51open access1884/740032022-03-23 18:25:39.775open accessoai:acervodigital.ufpr.br:1884/74003Repositório de PublicaçõesPUBhttp://acervodigital.ufpr.br/oai/requestopendoar:3082022-03-23T21:25:39Repositório Institucional da UFPR - Universidade Federal do Paraná (UFPR)false
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