Construção de linhagens estáveis de células mesangiais de camundongo expressando diferentes sistemas transcritores da via de sinalização do TGF Beta

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Pamplona, Juliana Helena
Data de Publicação: 2007
Tipo de documento: Trabalho de conclusão de curso
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional da UFPR
Texto Completo: https://hdl.handle.net/1884/36093
Resumo: Orientadora: Stéphane Illiano
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spelling Pamplona, Juliana HelenaFranco, Celia Regina Cavichiolo, 1965-Universidade Federal do Paraná. Setor de Ciências Biológicas. Curso de Graduação em Ciências BiológicasIlliano, Stéphane2022-08-30T13:56:53Z2022-08-30T13:56:53Z2007https://hdl.handle.net/1884/36093Orientadora: Stéphane IllianoCoorientadora: Célia Regina Cavichiolo FrancoMonografia (Bacharelado) - Universidade Federal do Paraná. Setor de Ciencias Biológicas. Curso de Graduaçao em Ciencias BiológicasResumo : A fibrose é um depósito em excesso de colágeno tipo I e 111, um acúmulo de matriz extracelular seguida por uma superexpressão de proteínas matriciais, como resposta a um processo de necrose ou apoptose. As diabetes de tipo 1 e 2 são uma das principais doenças que levam a disfunções renais e o acúmulo de matriz mesangial e o espessamento da membrana basal dos glomérulos (conjunto de capilares anastomosados e células endoteliais, epiteliais e mesangiais) sendo estas as primeiras alterações estruturais da nefropatia diabética. O TGFp é um polipeptídeo, protótipo da super família do TGFp, estocado na matriz extracelular sob forma de complexo latente. O TGFp estimula a síntese e/ou inibição da degradação da matriz extracelular. Ele possui 2 receptores do tipo I e 11 serinaltreonina quinases; o receptor tipo II quando ligado ao seu ligante fosforila o receptor I, que favorece a ligação de fatores de transcrição, como as proteínas SMAD, as quais são substratos dos receptores do TGFp. As pesquisas que enfocam as moléculas inibidoras das vias de sinalização do TGFp, como as proteínas SMADs, ou inibidoras dé um de seus receptores, fundamental na pesquisa de patologias associadas à fibrose foram empregadas para este trabalho. Neste trabalho empregamos como ferramenta de investigação linhagens estáveis que permitem a análise da resposta ao TGFp com a ajuda de um vetor ligado aos.elementos de reposta SMAD (estas foram construídas e caracterizadas) empregando-se células mesangiais de camundongo. Outra linhagem foi construída em paralelo com o vetor phTG 4/10, o phTG sendo o promotor do TGFp humano. As repostas ao tratamento ao TGFp foram analisadas após transfecção transitória ou transfecção estável. Nos dois casos, observou-se uma resposta dependente da concentração. O TGFp estimulou a transcrição na linhagem SMAD com uma EC50 de 0,7 ng/ml, e uma EC50 de 0,1 ng/ml na linhagem phTG 4/10. As duas linhagens foram em seguida submetidas ao tratamento com um inibidor do receptor do tipo I do TGFp, o SB431542. Esta molécula inibe a ativação do TGFp com uma IC50 de 1,3 J-lM nas linhagens estáveis SMAD, e com uma IC50 de 0,2 J-lM nas linhagens phTG 4/1 O. Em paralelo, para confirmar estes resultados, foi realizada análise em Westem Blot da fosforilação de SMAD pelo TGFp e validações com produtos de referência foram realizadas sobre culturas primárias de célulasmesangiais humanas. Foi. observada então uma estimulação da fosforilação de SMAD 3de maneira transitória pelo TGFp em um tempo máximo curto de ativação de 15 minutos, e uma inibição da mesma atividade pelo inibidor SB431542, observada nas células mesangiais de camundongo.1 recurso online : PDF.application/pdfFibroseDiabetesDoenças renaisNefropatias diabeticasConstrução de linhagens estáveis de células mesangiais de camundongo expressando diferentes sistemas transcritores da via de sinalização do TGF Betainfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/bachelorThesisporreponame:Repositório Institucional da UFPRinstname:Universidade Federal do Paraná (UFPR)instacron:UFPRinfo:eu-repo/semantics/openAccessORIGINALMonografia Juliana Helena Pamplona.pdfapplication/pdf3523121https://acervodigital.ufpr.br/bitstream/1884/36093/1/Monografia%20Juliana%20Helena%20Pamplona.pdf992477bfec31f062167e2de35ab8728fMD51open accessTEXTMonografia Juliana Helena Pamplona.pdf.txtExtracted Texttext/plain76228https://acervodigital.ufpr.br/bitstream/1884/36093/2/Monografia%20Juliana%20Helena%20Pamplona.pdf.txt366b01eb6c5afab88c2139a2b8523493MD52open accessTHUMBNAILMonografia Juliana Helena Pamplona.pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg1294https://acervodigital.ufpr.br/bitstream/1884/36093/3/Monografia%20Juliana%20Helena%20Pamplona.pdf.jpg705edf4a20a1aef010fe5607520bde31MD53open access1884/360932022-08-30 10:56:53.523open accessoai:acervodigital.ufpr.br:1884/36093Repositório de PublicaçõesPUBhttp://acervodigital.ufpr.br/oai/requestopendoar:3082022-08-30T13:56:53Repositório Institucional da UFPR - Universidade Federal do Paraná (UFPR)false
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