Proteômica da glândula salivar de Aedes (Stegomyia) aegypti infectado com DENV-2 e 3

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Chitolina, Rodrigo Faitta
Data de Publicação: 2015
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional da UFPR
Texto Completo: http://hdl.handle.net/1884/42104
Resumo: Orientadora : Profª Drª Magda Clara Vieira Costa-Ribeiro
id UFPR_ed7003e3c51691c733046702987719c4
oai_identifier_str oai:acervodigital.ufpr.br:1884/42104
network_acronym_str UFPR
network_name_str Repositório Institucional da UFPR
repository_id_str 308
spelling Chitolina, Rodrigo FaittaCastro, Márcia Gonçalves deUniversidade Federal do Paraná. Setor de Ciências Biológicas. Programa de Pós-Graduação em Microbiologia, Parasitologia e Patologia BásicaRibeiro, Magda Clara Vieira da Costa2016-04-08T18:53:56Z2016-04-08T18:53:56Z2015http://hdl.handle.net/1884/42104Orientadora : Profª Drª Magda Clara Vieira Costa-RibeiroCo-orientadora : Profª Drª Márcia Gonçalves de CastroDissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Ciencias Biológicas (Microbiologia, Parasitologia e Patologia Básica). Defesa: Curitiba, 30/03/2015Inclui referências : f. 48-56Área de concentraçãoResumo: O mosquito Aedes (Stegomyia) aegypti é o principal vetor de importantes arboviroses, dentre elas a dengue, que acomete aproximadamente 390 milhões de pessoas por ano. Dentro da dinâmica da doença envolvendo a tríade mosquito- vírus-humano, estudos têm procurado explicar a relação existente entre o vírus e o vetor a fim de esclarecer os fatores associados à disseminação dos sorotipos virais, e as suas implicações na epidemiologia da doença. Ainda, no que concerne a transmissão do vírus, as glândulas salivares de Ae. aegypti é um órgão chave na disseminação viral, revestindo-se de grande interesse nos estudos de proteômica. O objetivo deste trabalho foi avaliar a expressão de proteínas da glândula salivar de fêmeas de Ae. aegypti infectadas com DENV-2 e 3 por meio da proteômica. Fêmeas de Ae. aegypti da cepa Paea foram submetidas ao repasto sanguíneo segundo três grupos de infecção: i) DENV-2, ii) DENV-3, iii) controle. Após 15 dias do repasto sanguíneo procedeu-se a extração da glândula salivar para realização das análises de proteômica, e a separação do corpo das fêmeas para detecção viral por meio da técnica de RT-PCR seguida da nested-PCR. Para as análises de proteômica, pools das glândulas salivares foram analisados por espectrometria de massa, associada à cromatografia líquida, com posterior análises nos programas MaxQuant e Perseus. O percentual de infecção das glândulas salivares utlizadas foi verificado a partir dos dados advindos da RT-PCR seguida da nested-PCR. Os grupos de infecção foram comparados dois a dois usando um Two samples test, através do teste-t. O percentual de infecção encontrado foi de 35% para os grupos de infecção (i) e de 45% para o grupo (ii). Após análise de todos os grupos glândulas salivares (i, ii e iii), obteve-se um total de 1588 proteínas identificadas. Pelo teste-t segundo p-valor (p<0,01) verificouse a expressão de 233 proteínas, ao passo que após teste de Benjamini-Hochberg este número reduziu para 85 proteínas diferencialmente expressas. Após as comparações, 85 proteínas apresentaram nível de expressão diferenciada sendo que dessas, 20 já foram descritas em estudos prévios. Foram identificadas proteínas do metabolismo celular, de funções digestivas, de repasto sanguíneo e da resposta imune do vetor. As proteínas foram classificadas segundo cinco categorias funcionais, sendo que aproximadamente 51% foram classificadas como proteínas do metabolismo básico. Ainda, 35% das proteínas encontradas não foram correlacionadas a nenhuma função. A análise de proteômica da glândula salivar permitiu a identificação de proteínas já descritas na literatura, bem como o encontro de novas proteínas que servirão de base para futuros estudos quanto a sua funcionalidade. Palavras-chave: Aedes (Stegomyia) aegypti. DENV. Biologia molecular. Proteômica. Glândula salivarAbstract: The Aedes (Stegomyia) aegypti mosquito is the main vector of important arboviruses, among them dengue fever, which affects approximately 390 million people per year. Within the dynamics of disease involving the mosquito-virus-human triad studies have tried to explain the relationship between the virus and the vector in order to clarify the factors associated with the spread of the serotypes, and their implications for the epidemiology of the disease. Also, regarding the transmission of the virus, the salivary gland of Ae. aegypti is a key organ in the viral spread becoming of great interest in proteomics studies. The objective of this study was to evaluate the expression of proteins of the salivary gland of Ae. aegypti infected with DENV-2 and 3 by means of proteomics. Ae. aegypti females, Paea strain, were blood feed according to three groups: i) DENV-2, ii) DENV-3, iii) control. After 15 days p.i. the salivary glands were extracted to proteomic analysis, and the body of the females were separated to perform virus detection by RT-PCR followed by a nested PCR. For proteomics analysis, pools of salivary glands were analyzed by mass spectrometry associated with liquid chromatography with subsequent analysis in MaxQuant and Perseus programs. The percentage of infection of the salivary glands used was found from the data arising from RT-PCR followed by nested-PCR. The infected groups were compared using a Two samples test. The percentage of infection was found to be 35% for the group of infection (i) and 45% for the group (ii). Following analysis of all salivary glands groups (i, ii and iii), there was obtained a total of 1588 identified proteins. According to the ttest using a p-value (p<0.01) as default it was possible to detect the expression of 233 proteins, whereas after Benjamini-Hochberg test this number dropped to 85 differentially expressed proteins. After comparisons annotation of the 85 proteins that showed differential expression level was carried out. Twenty of these proteins that were identified here had already been described in previous studies of infected salivary glands. It was possible to identify oroteins related to the cell metabolism, digestive functions, from blood meal and vector immune response. Proteins were sorted by five functional categories, of which approximately 51% were classified as the basic metabolism proteins. Furthermore, 35% of the proteins that were detected had not being correlated with any function (unknow function). The proteomic analysis of salivary gland allowed the identification of proteins described in the literature, as well as the discovery of new proteins that form the basis for future studies regarding to its functionality. Keywords: Aedes (Stegomyia) aegypti. DENV. Molecular biology. Proteomics. Salivary gland65 f. : il. algumas color.application/pdfDisponível também em formato digitalMicrobiologiaParasitologiaAedes aegyptiProteômicaBiologia molecularProteômica da glândula salivar de Aedes (Stegomyia) aegypti infectado com DENV-2 e 3info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisporreponame:Repositório Institucional da UFPRinstname:Universidade Federal do Paraná (UFPR)instacron:UFPRinfo:eu-repo/semantics/openAccessORIGINALR - D - RODRIGO FAITTA CHITOLINA.pdfapplication/pdf645817https://acervodigital.ufpr.br/bitstream/1884/42104/1/R%20-%20D%20-%20RODRIGO%20FAITTA%20CHITOLINA.pdf99e0a99c8e4098c88b40d611ef47c3f5MD51open accessTEXTR - D - RODRIGO FAITTA CHITOLINA.pdf.txtR - D - RODRIGO FAITTA CHITOLINA.pdf.txtExtracted Texttext/plain108303https://acervodigital.ufpr.br/bitstream/1884/42104/2/R%20-%20D%20-%20RODRIGO%20FAITTA%20CHITOLINA.pdf.txt721dc83ae169595f4f8a09d7ec92729dMD52open accessTHUMBNAILR - D - RODRIGO FAITTA CHITOLINA.pdf.jpgR - D - RODRIGO FAITTA CHITOLINA.pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg1153https://acervodigital.ufpr.br/bitstream/1884/42104/3/R%20-%20D%20-%20RODRIGO%20FAITTA%20CHITOLINA.pdf.jpg577813677ef77de3e5d0d4d3e42bfd04MD53open access1884/421042016-04-09 03:03:43.741open accessoai:acervodigital.ufpr.br:1884/42104Repositório de PublicaçõesPUBhttp://acervodigital.ufpr.br/oai/requestopendoar:3082016-04-09T06:03:43Repositório Institucional da UFPR - Universidade Federal do Paraná (UFPR)false
dc.title.none.fl_str_mv Proteômica da glândula salivar de Aedes (Stegomyia) aegypti infectado com DENV-2 e 3
title Proteômica da glândula salivar de Aedes (Stegomyia) aegypti infectado com DENV-2 e 3
spellingShingle Proteômica da glândula salivar de Aedes (Stegomyia) aegypti infectado com DENV-2 e 3
Chitolina, Rodrigo Faitta
Microbiologia
Parasitologia
Aedes aegypti
Proteômica
Biologia molecular
title_short Proteômica da glândula salivar de Aedes (Stegomyia) aegypti infectado com DENV-2 e 3
title_full Proteômica da glândula salivar de Aedes (Stegomyia) aegypti infectado com DENV-2 e 3
title_fullStr Proteômica da glândula salivar de Aedes (Stegomyia) aegypti infectado com DENV-2 e 3
title_full_unstemmed Proteômica da glândula salivar de Aedes (Stegomyia) aegypti infectado com DENV-2 e 3
title_sort Proteômica da glândula salivar de Aedes (Stegomyia) aegypti infectado com DENV-2 e 3
author Chitolina, Rodrigo Faitta
author_facet Chitolina, Rodrigo Faitta
author_role author
dc.contributor.other.none.fl_str_mv Castro, Márcia Gonçalves de
Universidade Federal do Paraná. Setor de Ciências Biológicas. Programa de Pós-Graduação em Microbiologia, Parasitologia e Patologia Básica
dc.contributor.author.fl_str_mv Chitolina, Rodrigo Faitta
dc.contributor.advisor1.fl_str_mv Ribeiro, Magda Clara Vieira da Costa
contributor_str_mv Ribeiro, Magda Clara Vieira da Costa
dc.subject.por.fl_str_mv Microbiologia
Parasitologia
Aedes aegypti
Proteômica
Biologia molecular
topic Microbiologia
Parasitologia
Aedes aegypti
Proteômica
Biologia molecular
description Orientadora : Profª Drª Magda Clara Vieira Costa-Ribeiro
publishDate 2015
dc.date.issued.fl_str_mv 2015
dc.date.accessioned.fl_str_mv 2016-04-08T18:53:56Z
dc.date.available.fl_str_mv 2016-04-08T18:53:56Z
dc.type.status.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/publishedVersion
dc.type.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/masterThesis
format masterThesis
status_str publishedVersion
dc.identifier.uri.fl_str_mv http://hdl.handle.net/1884/42104
url http://hdl.handle.net/1884/42104
dc.language.iso.fl_str_mv por
language por
dc.relation.none.fl_str_mv Disponível também em formato digital
dc.rights.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/openAccess
eu_rights_str_mv openAccess
dc.format.none.fl_str_mv 65 f. : il. algumas color.
application/pdf
dc.source.none.fl_str_mv reponame:Repositório Institucional da UFPR
instname:Universidade Federal do Paraná (UFPR)
instacron:UFPR
instname_str Universidade Federal do Paraná (UFPR)
instacron_str UFPR
institution UFPR
reponame_str Repositório Institucional da UFPR
collection Repositório Institucional da UFPR
bitstream.url.fl_str_mv https://acervodigital.ufpr.br/bitstream/1884/42104/1/R%20-%20D%20-%20RODRIGO%20FAITTA%20CHITOLINA.pdf
https://acervodigital.ufpr.br/bitstream/1884/42104/2/R%20-%20D%20-%20RODRIGO%20FAITTA%20CHITOLINA.pdf.txt
https://acervodigital.ufpr.br/bitstream/1884/42104/3/R%20-%20D%20-%20RODRIGO%20FAITTA%20CHITOLINA.pdf.jpg
bitstream.checksum.fl_str_mv 99e0a99c8e4098c88b40d611ef47c3f5
721dc83ae169595f4f8a09d7ec92729d
577813677ef77de3e5d0d4d3e42bfd04
bitstream.checksumAlgorithm.fl_str_mv MD5
MD5
MD5
repository.name.fl_str_mv Repositório Institucional da UFPR - Universidade Federal do Paraná (UFPR)
repository.mail.fl_str_mv
_version_ 1813898800817766400

Registros relacionados