Estudo comparativo dos antígenos de Cysticercus longicollis e Cysticercus cellulosae no imunodiagnóstico da neurocisticercose humana
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Data de Publicação: | 2000 |
Tipo de documento: | Dissertação |
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Texto Completo: | https://hdl.handle.net/1884/28815 |
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Almeida, Sérgio Monteiro de, 1964-Universidade Federal do Paraná. Setor de Ciências Agrárias. Programa de Pós-Graduação em Ciências VeterináriasThomaz-Soccol, Vanete, 1954-Gusso, Rubens Luiz Ferreira2022-11-21T19:21:21Z2022-11-21T19:21:21Z2000https://hdl.handle.net/1884/28815Orientadora: Vanete Thomaz SoccolCo-orientador: Sérgio Monteiro de AlmeidaDissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências AgráriasResumo: Duas provas de imunodiagnóstico foram padronizadas em Curitiba, Paraná, Brasil, 2000: imunofluorescência indireta (IFI) e reação imunoenzimática (ELISA), para pesquisa, em líquido cefalorraquiano, de anticorpos antiCysticercus cellulosae de 39 indivíduos com neurocisticercose portadores de cistos vivos ou em degeneração, confirmado por tomografia axial computadorizada. Dois antígenos foram estudados: um homólogo (Cysticercus cellulosae) e outro heterólogo (Cysticercus longicollis). O rendimento de líquido vesicular de Cysticercus longicollis na produção dos antígenos de IFI e ELISA foi significativamente superior ao de Cysticercus cellulosae. Para Cysticercus cellulosae foram utilizados apenas escólices, membranas parasitárias e extrato salino total em função do pequeno rendimento de líquido vesicular. Para a técnica de IFI o número de partículas, por campo, no aumento de 400x ficou estabelecido em 20 a 30. A diluição do conjugado foi 1:250. O teste de ELISA ficou assim padronizado: Concentração de antígeno: 1 µg/orifício; Diluição do líquido cefalorraquiano: 1/1; Diluição do conjugado: 1:3000; ponto de corte - C. cellulosae DO • 0,210; ponto de corte - C. longicollis DO • 0,306. Quando comparado ao padrão ouro e ao teste sorológico com antígeno homólogo, caracterizando o diagnóstico de certeza definitivo, a sensibilidade no teste de imunofluorescência indireta, foi de 90,6%, considerando o número total de amostras analisadas (39), variando de 90,5% para amostras de pacientes com cistos em atividade a 90,9% para amostras de pacientes com calcificações no encéfalo. Quando se trabalhou com o teste imunoenzimático a sensibilidade para o mesmo grupo de amostras foi de 90,9%, variando de 95,2% a 83,3%, respectivamente para amostras de pacientes com cistos em atividade e para amostras de pacientes com calcificações no encéfalo, igualmente com diagnóstico de certeza definitivo para neurocisticercose. O antígeno heterólogo pode ser utilizado como alternativa ao antígeno homólogo. O rendimento e o controle das variáveis ambientais na manutenção da cepa e os indicadores dos testes permitem a utilização deste componente biológico para produção de extratos antigênicos destinados a pesquisa de anticorpos anti-Cysticercus cellulosae em líquido cefalorraquiano.Abstract: Two immunodiagnosis tests were standardised: indirect fluorescent antibody test (IFAT) and enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), for the detection of anti-Cysticercus cellulosae antibodies, in cerebrospinal fluid (CSF), in carriers of neurocysticercosis (with alive or degenerating cysticerci). Two antigens were studied: a homologous (Cysticercus cellulosae) and a heterologous (Cysticercus longicollis) antigen. For the production of Cysticercus longicollis antigen only the vesicular fluid was used on the ELISA test, which was much superior than Cysticercus cellulosae. For Cysticercus cellulosae, the parasitic membranes of the scolex and total saline extract were used due to the small yield of the vesicular liquid. For IFAT the number of particles was established in 20 to 30 (for field, increase of 400x). The conjugate concentration used was 1:250. The ELISA test was standardised: antigen concentration: 1ìg/well; dilution of the CSF: 1/1; dilution of the conjugate: 1:3000; cut-off to C. cellulosae was 0,210 and cut-off to C. longicollis was 0,306. When compared to the gold standard and the serologic techniques with homologous antigen, characterizing the definitive diagnosis, the IFAT sensitivity was of 90,6%, considering the total number of analyzed samples (39), being 90,5% for patients' samples with cysticerci in activity and 90,9% for patients' samples with calcifications in the encephalon. As for the ELISA test the sensitivity for the same group of samples was of 90,9%, being from 95,2% and 83,3%, for patients' samples with cysticerci in activity and for patients' samples with calcifications respectively, equally with definitive certainty diagnosis for neurocysticercosis. The heterologous antigen can be used as alternative to the homologous antigen. The revenue and the control of the environmental variables in the maintenance of the stump and the indicators of the tests allow the use of this biological component for production of extracts destined antigens for the research of anti-Cysticercus cellulosae antibodies in CSF.96 f. : grafs., tabs. ; 30cm.application/pdfCisticercose - DiagnósticoTeste imunoenzimaticoEstudo comparativo dos antígenos de Cysticercus longicollis e Cysticercus cellulosae no imunodiagnóstico da neurocisticercose humanainfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisporreponame:Repositório Institucional da UFPRinstname:Universidade Federal do Paraná (UFPR)instacron:UFPRinfo:eu-repo/semantics/openAccessORIGINALD - RUBENS LUIZ FERREIRA GUSSO.pdfapplication/pdf5142101https://acervodigital.ufpr.br/bitstream/1884/28815/1/D%20-%20RUBENS%20LUIZ%20FERREIRA%20GUSSO.pdf96925bbe218c87308a9aaaff9347b63bMD51open accessTEXTD - RUBENS LUIZ FERREIRA GUSSO.pdf.txtExtracted Texttext/plain186944https://acervodigital.ufpr.br/bitstream/1884/28815/2/D%20-%20RUBENS%20LUIZ%20FERREIRA%20GUSSO.pdf.txtbbd5e34c969d4e99e46c421d9907e884MD52open accessTHUMBNAILD - RUBENS LUIZ FERREIRA GUSSO.pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg1408https://acervodigital.ufpr.br/bitstream/1884/28815/3/D%20-%20RUBENS%20LUIZ%20FERREIRA%20GUSSO.pdf.jpged7b210b873c2c2ab4fade6a529d6aa2MD53open access1884/288152022-11-21 16:21:21.105open accessoai:acervodigital.ufpr.br:1884/28815Repositório de PublicaçõesPUBhttp://acervodigital.ufpr.br/oai/requestopendoar:3082022-11-21T19:21:21Repositório Institucional da UFPR - Universidade Federal do Paraná (UFPR)false |
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