Sensibilização alérgica e identificação das principais proteínas alergênicas da mariposa Bombyx mori

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Araujo, Laura Maria Lacerda, 1980-
Data de Publicação: 2019
Tipo de documento: Tese
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional da UFPR
Texto Completo: https://hdl.handle.net/1884/69702
Resumo: Orientador: Prof. Dr. Nelson Augusto Rosário Filho
id UFPR_f9ec4749a10fab9036409c3eee9b5b07
oai_identifier_str oai:acervodigital.ufpr.br:1884/69702
network_acronym_str UFPR
network_name_str Repositório Institucional da UFPR
repository_id_str 308
spelling Araujo, Laura Maria Lacerda, 1980-Zanchin, Nilson Ivo ToninUniversidade Federal do Paraná. Setor de Ciências da Saúde. Programa de Pós-Graduação em Saúde da Criança e do AdolescenteRosário Filho, Nelson Augusto, 1949-2022-03-18T19:42:55Z2022-03-18T19:42:55Z2019https://hdl.handle.net/1884/69702Orientador: Prof. Dr. Nelson Augusto Rosário FilhoCoorientador: Prof. Dr. Nilson Ivo Tonin ZanchinTese (doutorado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Saúde da Criança e do Adolescente. Defesa : Curitiba, 31/01/2018Inclui referências: p. 54-58Área de concentração: Alergia e Imunologia PediátricaResumo: : a mariposa do bicho-da-seda é uma fonte significativa de aeroalérgenos. Foi demonstrada alta prevalência de sensibilização a extrato de Bombyx mori em grupo de indivíduos com doenças alérgicas respiratórias, sendo o segundo em frequência de positividade após os ácaros da poeira. Seus alérgenos inalantes podem desencadear sintomas de asma e rinite alérgica em sujeitos predispostos, após exposição domiciliar ou ocupacional. Não há estudos sobre alérgenos desta espécie de mariposa envolvidos em reações alérgicas respiratórias. O objetivo deste estudo foi determinar as principais proteínas alergênicas das asas da mariposa Bombyx mori responsáveis pela sensibilização alérgica de indivíduos diagnosticados com rinite alérgica e/ou asma. Método: foi realizado um estudo experimental em que foram incluídos 36 participantes, submetidos a teste cutâneo alérgico com extrato preparado a partir das asas da mariposa Bombyx mori e seis outros aeroalérgenos padronizados, além de coleta de sangue venoso. Divididos em três grupos: o grupo 1 formado por indivíduos cujo teste cutâneo alérgico foi positivo para extrato de mariposa (n=21), grupo 2 consistiu de sujeitos cujo teste alérgico foi positivo para ácaro da poeira (n=8) e grupo 3 composto por não alérgicos e cujo teste cutâneo foi negativo para todos os alérgenos testados, como controles negativos (n=7). A partir dos respectivos soros, foi feito Western blot com extrato de asas de mariposa utilizando anticorpos anti-IgE. Foi desenvolvida técnica de cromatografia por imunoafinidade para purificar as proteínas a partir do extrato bruto de Bombyx mori, que também foi analisado por Immunoblot, usando pool de soros dos participantes dos grupos 1 e 3. Resultados: entre os 21 participantes do grupo 1, dezenove reagiram ao extrato de Bombyx mori por Western blot. Todos reagiram à banda de 80 kDa, cinco outras bandas (66, 50, 45, 37 e 30 kDa) foram identificadas em mais de 50% dos indivíduos testados, consideradas proteínas major. Dos 8 participantes do grupo 2, sete mostraram reatividade ao extrato de mariposa por Western blot. Estes mesmos reagiram à banda de 66 kDa e duas outras (50 e 40 kDa) foram identificadas em mais de 50% dos sujeitos testados. Amostras de soro dos indivíduos saudáveis não reagiram ao extrato de Bombyx mori. SDS-PAGE a partir de cromatografia por imunoafinidade identificou as bandas 150, 120, 100, 80, 66, 50, 45, 37, 30, 25, 17 kDa. Todas presentes no extrato bruto dos indivíduos positivos para mariposa por immunoblot. Baseado em bancos de dados de pesquisa sobre as massas moleculares já descritas para Bombyx mori, foi possível identificar 5 das 6 proteínas principais reagentes nos imunoensaios. A proteína de 80 kDa foi visualizada em todos os participantes reagentes do grupo 1 e em nenhum dos pacientes do grupo 2, sendo um potencial alérgeno específico da asa da mariposa. Conclusão: este foi o primeiro estudo a destacar as principais proteínas alergênicas da mariposa Bombyx mori em indivíduos diagnosticados com doenças alérgicas respiratórias a partir de extrato preparado com as asas desta espécie de inseto. Palavras-chave: Bombyx, alérgenos, asma, rinite alérgica.Abstract: Background: silkworm moth is a significant source of aeroallergens. High prevalence of sensitization to Bombyx mori extract was demonstrated in a group of individuals with allergic respiratory diseases, being the second in frequency of positivity, after house dust mites. Its inhalant allergens might trigger symptoms of asthma and allergic rhinitis in predisposed subjects, after home or occupational exposure. There are no studies on these moth species allergens involved in allergic respiratory reactions. The aim of this study was to determine the major allergenic proteins of Bombyx mori moth's wings responsible for allergic sensitization of individuals diagnosed with allergic rhinitis and/or asthma. Method: an experimental study was performed in which 36 participants were included, all submitted to skin prick test with Bombyx mori's wings and other six aeroallergens standardized extracts, as well as blood samples collection. They were divided into three groups: group 1 consisted of 21 blood samples collection from skin prick test positive to Bombyx mori extract allergic participants (group 1), eight samples from mite skin prick test positive extract allergic subjects (group 2) and 7 samples from negative non allergic controls (group 3). From respective sera, Western blot was performed with moth's wings extract using anti-IgE antibodies. Immunoaffinity chromatography was developed in order to purify the proteins from Bombyx mori crude extract, which were also analysed by Immunoblot, using groups 1 and 3 participants pooled sera. Results: among the 21 participants from group 1, nineteen reacted to moth extract by Western blot. All reacted to a protein at 80 kDa, five other bands (66, 50, 45, 37 e 30 kDa) were identified in more than 50% of individuals tested, considered major proteins. From 8 participants of group 2, seven showed reactivity to moth extract by Western blot. Those same reacted to a protein at 66 kDa and other two (50 e 40 kDa) were identified in more than 50% of the subjects tested. Sera samples from healthy individuals did not react to Bombyx mori extract. SDS-PAGE from immunoaffinity chromatography identified bands at 150, 120, 100, 80, 66, 50, 45, 37, 30, 25, 17 kDa. All present in Immunoblot from moth extract positive individuals. Based on research databank on molecular mass already described to Bombyx mori, it was possible to identify 5 from 6 major proteins reactive on immunoassays. The 80 kDa protein was seen in all reactive participants from group 1 and in none of the patients from group 2, being a potential specific allergen from moth's wings. Conclusion: this was the first study to highlight the major allergenic proteins of Bombyx mori moth in individuals diagnosed with allergic respiratory diseases from extract prepared from this insect species wings. Key words: Bombyx, allergens, asthma, rhinitis, allergic79 p. : il. (algumas color.).application/pdfAlérgenosAsmaRinite alergicaBicho-da-sedaPediatriaSensibilização alérgica e identificação das principais proteínas alergênicas da mariposa Bombyx moriinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesisporreponame:Repositório Institucional da UFPRinstname:Universidade Federal do Paraná (UFPR)instacron:UFPRinfo:eu-repo/semantics/openAccessORIGINALR - T - LAURA MARIA LACERDA ARAUJO.pdfapplication/pdf18911052https://acervodigital.ufpr.br/bitstream/1884/69702/1/R%20-%20T%20-%20LAURA%20MARIA%20LACERDA%20ARAUJO.pdfffc91748bb5ca52f099828a101fc8f03MD51open access1884/697022022-03-18 16:42:55.206open accessoai:acervodigital.ufpr.br:1884/69702Repositório de PublicaçõesPUBhttp://acervodigital.ufpr.br/oai/requestopendoar:3082022-03-18T19:42:55Repositório Institucional da UFPR - Universidade Federal do Paraná (UFPR)false
dc.title.pt_BR.fl_str_mv Sensibilização alérgica e identificação das principais proteínas alergênicas da mariposa Bombyx mori
title Sensibilização alérgica e identificação das principais proteínas alergênicas da mariposa Bombyx mori
spellingShingle Sensibilização alérgica e identificação das principais proteínas alergênicas da mariposa Bombyx mori
Araujo, Laura Maria Lacerda, 1980-
Alérgenos
Asma
Rinite alergica
Bicho-da-seda
Pediatria
title_short Sensibilização alérgica e identificação das principais proteínas alergênicas da mariposa Bombyx mori
title_full Sensibilização alérgica e identificação das principais proteínas alergênicas da mariposa Bombyx mori
title_fullStr Sensibilização alérgica e identificação das principais proteínas alergênicas da mariposa Bombyx mori
title_full_unstemmed Sensibilização alérgica e identificação das principais proteínas alergênicas da mariposa Bombyx mori
title_sort Sensibilização alérgica e identificação das principais proteínas alergênicas da mariposa Bombyx mori
author Araujo, Laura Maria Lacerda, 1980-
author_facet Araujo, Laura Maria Lacerda, 1980-
author_role author
dc.contributor.other.pt_BR.fl_str_mv Zanchin, Nilson Ivo Tonin
Universidade Federal do Paraná. Setor de Ciências da Saúde. Programa de Pós-Graduação em Saúde da Criança e do Adolescente
dc.contributor.author.fl_str_mv Araujo, Laura Maria Lacerda, 1980-
dc.contributor.advisor1.fl_str_mv Rosário Filho, Nelson Augusto, 1949-
contributor_str_mv Rosário Filho, Nelson Augusto, 1949-
dc.subject.por.fl_str_mv Alérgenos
Asma
Rinite alergica
Bicho-da-seda
Pediatria
topic Alérgenos
Asma
Rinite alergica
Bicho-da-seda
Pediatria
description Orientador: Prof. Dr. Nelson Augusto Rosário Filho
publishDate 2019
dc.date.issued.fl_str_mv 2019
dc.date.accessioned.fl_str_mv 2022-03-18T19:42:55Z
dc.date.available.fl_str_mv 2022-03-18T19:42:55Z
dc.type.status.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/publishedVersion
dc.type.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/doctoralThesis
format doctoralThesis
status_str publishedVersion
dc.identifier.uri.fl_str_mv https://hdl.handle.net/1884/69702
url https://hdl.handle.net/1884/69702
dc.language.iso.fl_str_mv por
language por
dc.rights.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/openAccess
eu_rights_str_mv openAccess
dc.format.none.fl_str_mv 79 p. : il. (algumas color.).
application/pdf
dc.source.none.fl_str_mv reponame:Repositório Institucional da UFPR
instname:Universidade Federal do Paraná (UFPR)
instacron:UFPR
instname_str Universidade Federal do Paraná (UFPR)
instacron_str UFPR
institution UFPR
reponame_str Repositório Institucional da UFPR
collection Repositório Institucional da UFPR
bitstream.url.fl_str_mv https://acervodigital.ufpr.br/bitstream/1884/69702/1/R%20-%20T%20-%20LAURA%20MARIA%20LACERDA%20ARAUJO.pdf
bitstream.checksum.fl_str_mv ffc91748bb5ca52f099828a101fc8f03
bitstream.checksumAlgorithm.fl_str_mv MD5
repository.name.fl_str_mv Repositório Institucional da UFPR - Universidade Federal do Paraná (UFPR)
repository.mail.fl_str_mv
_version_ 1801860630222733312