Influência da pneumonia experimental aguda e crônica por Pseudomonas aeruginosa nas concentrações livres de tobramicina no fluido de revestimento epitelial pulmonar

• Autor(a) principal: Dias, Bruna Bernar
• Data de Publicação: 2019
• Tipo de documento: Trabalho de conclusão de curso
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFRGS
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/10183/238132
• topic: Microdiálise; Tobramicina; Pseudomonas aeruginosa; Pneumonia; Farmácia; Bronchial microdialysis; Free tobramycin concentrations; Acute lung infection; Chronic lung infection

Introdução: Infecções pulmonares causadas por Pseudomonas aeruginosa formadoras de biofilmes são resistentes ao tratamento devido à dificuldade de penetração dos antimicrobianos. Previamente demonstramos que a infecção aguda e crônica reduz a penetração pulmonar do aminoglicosídeo tobramicina (TOB) em cerca de 70%, indicando que a presença de infecção/inflamação, e não a cronicidade desta, leva à diminuição da exposição tecidual ao fármaco. Como as infecções pulmonares iniciam pela contaminação do fluido de revestimento epitelial pulmonar (PELF), é importante conhecer as concentrações brônquicas livres de antimicrobianos nesse local para a escolha de posologias que garantam a erradicação microbiana. O objetivo deste trabalho foi avaliar a penetração brônquica da TOB em modelo experimental de infecção aguda e crônica por P. aeruginosa utilizando a técnica de microdiálise. Metodologia: Todos os experimentos foram aprovados pelo CEUA/UFRGS (#32345). Para o desenvolvimento da infecção aguda, ratos Wistar machos (45 d) anestesiados (cetamina/xilazina, 100:10 mg/kg, i.p.), foram inoculados pela via i.t. com 109 UFC/mL da cepa não-mucoide PA14 (n = 6). Para produzir a infecção crônica, 107 UFC/mL de P. aeruginosa mucoide ATCC 27853 foi imobilizada em beads de alginato, que foram inoculados da mesma forma em animais de mesma idade (n = 3). Sete e quatorze dias após a inoculação, respectivamente, os animais foram anestesiados (uretano, 1,25 mg/kg, i.p.) e receberam TOB 10 mg/kg via i.v. bolus. Animais hígidos de mesma idade foram utilizados como controle (n = 7), assim como animais inoculados com bead branco de alginato, sem a bactéria (n = 4). As concentrações livres brônquicas de TOB foram coletadas por microdiálise, utilizando a sonda CMA 20® (2 mm, custom made), a cada 30 min por 12 h pós-dose e quantificadas por CLAE-EM/EM utilizando método validado. Para a comparação com os grupos contendo beads de alginato, foi desenvolvido um bead de agarose, que apresentou tamanho e dispersão adequados. Os beads brancos de agarose foram inoculados a animais hígidos e a farmacocinética pulmonar da TOB foi determinada por microdiálise utilizando a sonda CMA 20® (4 mm). Os parâmetros farmacocinéticos foram determinados por abordagem não-compartimental (Phoenix®) e a comparação estatística feita por ANOVA (= 0,05) seguida de Teste de Bonferroni. Resultados: Os resultados demonstraram que não há alteração na meia-vida de eliminação da TOB no PELF (aprox. 4,5 h) em animais hígidos, com infecção aguda e crônica e inoculados com beads brancos, sendo que essa se mostrou semelhante à meia-vida pulmonar obtida anteriormente nas mesmas condições. A infecção aguda reduziu a exposição da TOB no PELF em torno de 70% em relação aos animais hígidos. A infecção crônica alterou o equilíbrio pulmão/PELF da TOB pela redução da exposição plasmática devido ao aumento do clearance total. O grupo inoculado com bead branco de agarose não apresentou a mesma redução da exposição pulmonar observada no grupo inoculado com bead branco de alginato. Conclusões: Infecções agudas reduzem a exposição brônquica à TOB, semelhante ao observado para a exposição pulmonar. A infecção crônica alterou a farmacocinética da TOB, reduzindo as concentrações plasmáticas e pulmonares e aumentando a penetração brônquica devido à lesão tecidual e ao aumento da permeabilidade vascular. Os resultados indicaram que as alterações encontradas no grupo de infecção crônica foram principalmente devidas aos efeitos da infecção/inflamação, associados à presença do alginato, componente do biofilme mucoide da P. aeruginosa e dos beads de alginato utilizados para inoculação.