Análise do polimorfismo 2848 G/A do gene TLR9 em indivíduos HIV+, HCV+ e coinfectados

• Autor(a) principal: Leal, Bruna Kulmann
• Data de Publicação: 2018
• Tipo de documento: Trabalho de conclusão de curso
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFRGS
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/10183/236943
• topic: Infecções por HIV; Hepatite; Coinfecção; Genes; Polimorfismo genético; Receptor toll-like 9; Toll-Like Receptor 9; HIV; HCV; Polymorphism; Coinfection

As infecções por HIV e HCV configuram graves problemas de saúde pública no Brasil. Variantes genéticas do hospedeiro já foram associadas a diferenças na suscetibilidade a ambas as infecções e progressão à AIDS, assim como à coinfecção por estes vírus. Os TLRs (do inglês, Toll-Like Receptors) são importantes componentes da resposta imune inata e agem reconhecendo PAMPs e DAMPs. O TLR9, codificado pelo gene sinônimo localizado no cromossomo 3, está presente na porção interior de endossomos, e reconhece moléculas de DNA não metilado. Esse receptor pode participar da resposta à infecção pelo HIV reconhecendo o DNA formado a partir da atividade da enzima transcriptase reversa sobre o RNA viral. Além disso, a interação da proteína viral gp120 com células dendríticas inibe respostas inatas mediadas a partir do TLR9, sugerindo um papel desse receptor na resposta contra o HIV. Uma variante do gene TLR9, o polimorfismo de nucleotídeo único 2848 G/A (rs352140), é alvo de estudos de associação com a infecção por HIV, e seu papel ainda não foi claramente elucidado na infecção pelo HCV. Da mesma forma, há uma controvérsia a respeito deste SNP na coinfecção por HIV/HCV. Dito isso, o presente trabalho tem como objetivo avaliar as frequências da variante 2848 G/A (TLR9) em indivíduos HCV+, HIV+ e coinfectados, provenientes da região Sul do Brasil, estratificando-os em diferentes grupos étnicos. Foram genotipados um total de 1182 indivíduos, divididos nos grupos: controle (n = 409); HCV+ (n = 376); HIV+ (n = 296); HCV+/HIV+ (n = 101). As sequências de interesse foram amplificadas por Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) convencional, utilizando um par de iniciadores específico para a região analisada. Os amplicons gerados por PCR foram submetidos à digestão enzimática com endonuclease (Bsh1236I). A verificação dos genótipos foi realizada em gel de agarose 3% com brometo de etídeo sob luz UV. Foram calculadas as frequências genotípicas e alélicas do polimorfismo. Os grupos estudados foram comparados para verificar a existência de influência da variante na susceptibilidade à infecção pelo HIV, pelo HCV e coinfecção por HIV/HCV. Foi utilizado o teste de qui-quadrado de Pearson para comparação dos dados, e valores de p menores que 0,05 foram definidos como estatisticamente significativos. O estudo foi aprovado pelos comitês de ética da Universidade Federal do Rio Grande do Sul (UFRGS), Hospital de Clínicas de Porto Alegre e Universidade Luterana do Brasil (ULBRA). Todos os participantes da pesquisa assinaram um termo de consentimento desenvolvido de acordo com a Resolução No. 466 do Ministério da Saúde. A partir dos resultados do trabalho, observamos que não há uma diferença estatisticamente significativa entre os grupos (p>0,05 em todas as comparações). Dessa forma, o estudo sugere que a variante 2848 G/A não influencia as infecções por HCV e HIV e a coinfecção por ambos os vírus na população do Sul do Brasil.