Obtenção de plantas transgênicas de Oryza sativa superexpressando o gene OsVOZ1

• Autor(a) principal: Dalenogari, João Victor Araujo
• Data de Publicação: 2017
• Tipo de documento: Trabalho de conclusão de curso
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFRGS
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/10183/198212
• topic: Oryza sativa; Estresse abiótico; Estresse biótico; Gene OsVOZ1

A população mundial vem crescendo e com isso, a necessidade da produção de maiores quantidades de alimentos. Os danos causados por estresses bióticos e abióticos nas plantaçōes afetam gravemente a economia que gira em torno da agricultura, limitando a produção de alimentos, podendo levar milhōes de pessoas à fome e à pobreza. O arroz é um dos grãos mais importantes, tanto economicamente, sendo o principal alimento em muitos países em desenvolvimento, quanto cientificamente, por ser considerado a planta modelo para o estudo de monocotiledônias. A caracterização funcional de genes corresponde a uma etapa importante para a descoberta de novos alvos potenciais para o melhoramento vegetal, com objetivo de combater esses diferentes agentes estressores. Os genes da família VOZ (Vascular Plant One Zinc-Finger) se mostram promissores para a aplicação em estratégias de combates a estresses em plantas. Os genes VOZ foram identificados, primeiramente em Arabidopsis thaliana como genes responsivos a diversos estresses bióticos e abióticos. Apesar da importância já demonstrada dos genes VOZ em A. thaliana, até o momento nenhum estudo relacionado a essa família foi feito em arroz. Nesse contexto, o presente trabalho teve por objetivo transformar plantas de arroz (Oryza sativa) com o objetivo de superexpressar o gene OsVoz1. O plasmídeo pENTR/D-TOPO contendo a sequência codificadora do gene OsVoz1 foi recombinado, via o sistema Gateway (Invitrogen), para o plasmídeo binário pH7FWG2. Em seguida, pH7FWG2-OsVoz1 foi introduzido em células de Agrobacterium tumefaciens AGL1 para a transformação genética de O. sativa. Plantas transgênicas foram regeneradas a partir de calos embriogênicos transformados e se confirmou por PCR que elas são positivas para o transgene. Alguns fenótipos possivelmente relacionados à superexpressão de OsVoz1 já foram observados. As plantas transformadas apresentaram um tamanho menor, se comparado às selvagens não transformadas, e também apresentaram uma antecipação do tempo de florescimento, havendo o surgimento de panículas 10 dias antes nas plantas transgênicas.