Padronização do uso da técnica de citometria de fluxo para avaliação de morte celular em cultura organotípica de hipocampo de ratos

• Autor(a) principal: Menezes, Bruna de Melo
• Data de Publicação: 2014
• Tipo de documento: Trabalho de conclusão de curso
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFRGS
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/10183/158050
• topic: Farmácia; Apoptosis; Necrosis; Cell vulnerability; Glutamate; Staurosporine

O hipocampo é uma região do cérebro muito estudada por seu envolvimento nos mecanismos de formação de memória e aprendizado, mas principalmente pela incessante investigação dos mecanismos que provocam danos hipocampais que comprometem a função e integridade de neurônios. Doenças neurodegenerativas tais como, Alzheimer, Parkinson ou Isquemia Cerebral, envolvem diferentes tipos de morte celular. Os aspectos morfológicos e características histológicas da morte célular necrótica diferem dos observados na morte celular apoptótica, sendo essas distinções importantes para a caracterização dos mecanismos envolvidos na patologia de determinada doença. Nos últimos anos tem havido crescente aperfeiçoamento das técnicas para identificação e quantificação de grupos celulares, dentre estas, a citometria de fluxo vem demonstrando ser uma tecnologia rápida e reprodutível através da qual se pode realizar análises refinadas, permitindo a avaliação de muitos parâmetros simultaneamente. O objetivo deste trabalho foi padronizar a utilização dessa metodologia no modelo in vitro de cultura organotípica de hipocampo de ratos, para avaliação do tipo de morte celular. Para isto, utilizamos como indutores de morte celular o glutamato, para morte celular necrótica, e a estaurosporina, para a morte apoptótica. Os resultados mostraram que a metodologia padronizada foi eficiente e permite a distinção entre os diferentes tipos de morte celular induzidos neste modelo experimental. Além disso, confirma o potencial da cultura organotípica como modelo experimental para a análise de morte celular em diferentes desordens que levam ao dano hipocampal. E, sobretudo, valida uma técnica rápida e multiparamétrica eficaz para utilização na avaliação de novos agentes neuroprotetores capazes de retardar ou impedir doenças neurodegenerativas.