Caracterização funcional de isoformas de proteínas 14-3-3 de Echinococcus granulosus

• Autor(a) principal: Dutra, Cristine de Souza
• Data de Publicação: 2013
• Tipo de documento: Trabalho de conclusão de curso
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFRGS
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/10183/150026
• topic: Echinococcus granulosus; Isoformas de proteínas

O Echinococcus granulosus é um platelminto parasita da classe Cestoda (família Taeniidae), que, na sua fase larval (cisto hidático ou metacestódeo) causa a hidatidose cística. Esta doença é caracterizada pelo crescimento em longo prazo do cisto hidático em órgãos internos (principalmente pulmões e fígado) dos hospedeiros intermediários, que podem ser ungulados domésticos e, acidentalmente, seres humanos. O cisto hidático é uma estrutura unilocular delimitada por uma parede trilaminar (camadas germinativa, laminar e adventícia) que é preenchido pelo líquido hidático, no qual se encontram moléculas tanto do parasito quanto do hospedeiro e onde também se encontram os protoescólices (fase pré-adulta do parasito). As proteínas 14-3-3 fazem parte de uma família altamente conservada, com uma ou mais isoformas presentes em todos os eucariotos estudados até o momento. As 14-3-3 são proteínas acídicas e de massa molecular entre 28 e 33 kDa, que interagem com diversas proteínas-alvo e desempenham funções em diferentes processos celulares. Em parasitos, os papéis destas proteínas no contexto das relações com o hospedeiro ainda são pouco conhecidos. Em E. granulosus já foram identificados seis genes que codificam as potenciais isoformas de proteínas 14-3-3. Este estudo tem como objetivo a identificação do padrão de expressão das quatro isoformas cuja expressão já foi detectada em protoescólices (Eg14-3-3ε1, Eg14-3-3ε2, Eg14-3-3ζ2 e Eg14-3-3ζ3) e determinar o repertório de ligantes proteicos da isoforma Eg14-3-3ε2, buscando evidências sobre possíveis funções desta proteína em interações parasito-hospedeiro. Através de imunoblot foi possível a detecção destas quatro isoforma de Eg14-3-3 em protoescólices e camada germinativa, a única isoforma detectada em líquido hidático foi a Eg14-3-3ζ2. Foram identificadas 20 proteínas de interação com a isoforma Eg14-3-3ε2 através de ensaio de 2DE gel-overlay. As principais classes funcionais das proteínas de interação são: transporte e metabolismo de carboidratos, produção e conversão de energia e modificações pós-traducionais, turnover de proteínas e chaperonas. Entre as proteínas identificadas podemos citar a major vault protein, gliceraldeído-3-fosfato-desidrogenase, enolase e frutose-bifosfato-aldolase, Experimentos complementares com as quatro isoformas de Eg14-3-3 estão sendo realizados para a ampliação do repertório conhecido das potenciais proteínas de interação e para a confirmação dos resultados obtidos.