Polymerase chain reaction (PCR) for the detection of Salmonella in artificially inoculated chicken meat
Autor(a) principal: | |
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Data de Publicação: | 2001 |
Outros Autores: | , , , , , , |
Tipo de documento: | Artigo |
Idioma: | eng |
Título da fonte: | Repositório Institucional da UFRGS |
Texto Completo: | http://hdl.handle.net/10183/23122 |
Resumo: | O objetivo deste trabalho foi adequar um protocolo de reação em cadeia pela polimerase (PCR) para detecção de Salmonella em carne de frango artificialmente contaminada. Foram realizados ensaios com amostras de carne de frango inoculadas com diluições de Salmonella Typhimurium ou Salmonella Enteritidis (10-7, 10-8 ou 10-9 UFC/mL), procurando-se determinar o limite de detecção da técnica, intervalos de incubação das amostras (0, 6, 8 ou 24 horas de pré-enriquecimento em água peptonada 1%) e três protocolos de extração de DNA (fenolclorofórmio, tratamento térmico ou tratamento térmico e Sephaglass). Foi possível amplificar DNA de Salmonella nas amostras de carne de frango inoculadas inicialmente com diluições de até 10-9 UFC/mL, utilizando-se protocolo de extração de DNA por fenol-clorofórmio e após um período de 24 horas de pré-enriquecimento, totalizando 48 horas de análise. Como os resultados são obtidos mais rapidamente que a cultura, este procedimento será útil na metodologia para detecção de Salmonella em carne de frango. |
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Santos, Luciana Ruschel dosNascimento, Vladimir Pinheiro doOliveira, Sílvia Dias deFlores, Maristela LovatoPontes, Alexandre PontesRibeiro, Aldemir ReginatoSalle, Carlos Tadeu PippiLopes, Rui Fernando Felix2010-06-01T04:17:49Z20010036-4665http://hdl.handle.net/10183/23122000327092O objetivo deste trabalho foi adequar um protocolo de reação em cadeia pela polimerase (PCR) para detecção de Salmonella em carne de frango artificialmente contaminada. Foram realizados ensaios com amostras de carne de frango inoculadas com diluições de Salmonella Typhimurium ou Salmonella Enteritidis (10-7, 10-8 ou 10-9 UFC/mL), procurando-se determinar o limite de detecção da técnica, intervalos de incubação das amostras (0, 6, 8 ou 24 horas de pré-enriquecimento em água peptonada 1%) e três protocolos de extração de DNA (fenolclorofórmio, tratamento térmico ou tratamento térmico e Sephaglass). Foi possível amplificar DNA de Salmonella nas amostras de carne de frango inoculadas inicialmente com diluições de até 10-9 UFC/mL, utilizando-se protocolo de extração de DNA por fenol-clorofórmio e após um período de 24 horas de pré-enriquecimento, totalizando 48 horas de análise. Como os resultados são obtidos mais rapidamente que a cultura, este procedimento será útil na metodologia para detecção de Salmonella em carne de frango.The aim of this study was to develop a polymerase chain reaction (PCR) protocol for the detection of Salmonella in artificially contaminated chicken meat. Tests were performed with different dilutions of Salmonella Typhimurium or Salmonella Enteritidis cells (10-7, 10-8 or 10-9 CFU/mL) inoculated in chicken meat samples, in order to establish the limits of detection, incubation times (0, 6, 8 and 24 hours of pre-enrichment in PBW 1%) and three DNA extraction protocols (phenol-chloroform, thermal treatment and thermal treatment and Sephaglass). The assay was able to detect until 10-9 CFU/mL of initial dilution of Salmonella cells inoculated in chicken meat, which allows detection of Salmonella within 48 hours, including 24 hours of pre-enrichment and using the phenol-chloroform DNA extraction protocol. As the results are obtained in a shorter time period than that of microbiological culture, this procedure will be useful in the methodology for detection of Salmonella in chicken.application/pdfengRevista do instituto de medicina tropical de sao paulo. São Paulo. Vol. 43, n. 5 (2001), p. 247-250AnatomiaSalmonellaPCRChicken meatPolymerase chain reaction (PCR) for the detection of Salmonella in artificially inoculated chicken meatReação em cadeia pela polimerase (PCR) para detecção de Salmonella em carne de frango artificialmente contaminada info:eu-repo/semantics/articleinfo:eu-repo/semantics/otherinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Institucional da UFRGSinstname:Universidade Federal do Rio Grande do Sul (UFRGS)instacron:UFRGSTEXT000327092.pdf.txt000327092.pdf.txtExtracted Texttext/plain21108http://www.lume.ufrgs.br/bitstream/10183/23122/2/000327092.pdf.txt7c42d993684e1bdb619e13ce6f318e3aMD52ORIGINAL000327092.pdf000327092.pdfTexto completo (inglês)application/pdf95137http://www.lume.ufrgs.br/bitstream/10183/23122/1/000327092.pdfc177d291e8cf5dc105cffb56af49dad8MD51THUMBNAIL000327092.pdf.jpg000327092.pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg1813http://www.lume.ufrgs.br/bitstream/10183/23122/3/000327092.pdf.jpg3ef6b92e20ec08c034536bd8f2409589MD5310183/231222021-06-26 04:39:31.240644oai:www.lume.ufrgs.br:10183/23122Repositório de PublicaçõesPUBhttps://lume.ufrgs.br/oai/requestopendoar:2021-06-26T07:39:31Repositório Institucional da UFRGS - Universidade Federal do Rio Grande do Sul (UFRGS)false |
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