Refinamento da avaliação de morfologia espermática em sêmen criopreservado de Rhamdia quelen

• Autor(a) principal: Machado, Thales Lysakowski Flores
• Data de Publicação: 2022
• Tipo de documento: Trabalho de conclusão de curso
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFRGS
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/10183/251586
• topic: Bagre; Sêmen; Criopreservação

A avaliação de morfologia espermática de peixes é uma técnica que visa analisar as quantidades de anormalidades dos espermatozoides presentes no sêmen de um reprodutor. No qual, quando presente em grandes quantidades, as anormalidades espermáticas provocam a diminuição da motilidade, o que explica as falhas reprodutivas de machos classificados como aptos à reprodução. Além disso, a avaliação das características espermáticas é imprescindível na rotina de reprodução artificial em qualquer espécie. Porém, as referências autorais da quantidade de células espermáticas a serem avaliadas para a análise de validação espermáticas pelo método de morfologia espermática, divergem entre autores e em trabalhos de mesma autoria. Portanto, este trabalho tem como objetivo validar se as quantidades totais de células espermáticas avaliadas pelos autores são válidas. Neste trabalho foi analisado células espermáticas de jundiá (Rhamdia quelen) que passaram pelo processo de criopreservação, pois as baixas temperaturas causam injúrias nos espermatozoides, aumentando a quantidade de anormalidades espermáticas a serem encontradas. Para a criopreservação foram utilizadas palhetas (0,25 mL) na proporção de 1:3 (62,5 μL sêmen e 187,5 μL meio de congelamento) com o meio de congelamento contendo 5% D-frutose, 5% leite em pó e 10% Metanol. As amostras foram congeladas em dry-shipper durante 18 horas e então passadas para um botijão de nitrogênio líquido onde permaneceram por 6 meses. As amostras foram descongeladas em banho maria por 10 segundos em 25°C e então diluídas em 1000 μL de solução extensora de NaCl (325 mOsm kg -1; pH 7,6; 24 ◦C; diluído em água destilada). Imediatamente após a diluição na solução extensora, foi separado uma alíquota de 1μL de sêmen criopreservado de cada macho e fixado em formol-salino-tamponado. As amostras foram coradas com Rosa de Bengala a 4%. Para a contagem de células espermáticas totais, foram escolhidos cinco tratamentos (100, 200, 400, 800 e 1600 espermatozoides avaliados) com cinco machos, sendo cada macho uma repetição, onde foram avaliado em duplicata. Não houve diferença estatística de uma maneira geral das células avaliadas. Porém, quanto maior o número de células avaliadas, menor foi a variação dos resultados. Indicando assim, que quanto mais células espermáticas um pesquisador analisar, mais preciso será seu resultado.