Potencialidades da microscopia eletrônica (transmissão e varredura) e microscopia confocal como ferramentas para análises de amostras biológicas

• Autor(a) principal: Ramos, Thaniele Müller
• Data de Publicação: 2013
• Tipo de documento: Trabalho de conclusão de curso
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFRGS
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/10183/96777
• topic: Microscopia; Transmission electron microscope; Scanning electron microscope; Confocal microscopy; Human adipose-derived stem cells; Biological samples

Os microscópios eletrônicos de transmissão (MET), varredura (MEV) e o microscópio confocal (MC) são importantes ferramentas para a pesquisa com amostras biológicas. O MET possui o maior poder de resolução entre os microscópios utilizados neste trabalho. Sua principal vantagem é a capacidade de analisar o interior da amostra, a ultraestrutura subcelular. O MEV geralmente é utilizado para observar a superfície das amostras. Possui poder de alta resolução e de grande profundidade de foco, resultando em imagens tridimensionais. O MC é um equipamento que combina princípios da óptica com microscopia digital, possibilitando regulagens extremamente precisas no foco e na capacidade de ampliação. Nele é possível determinar colocalização de estruturas e obter imagens tridimensionais, bem como realizar ensaios in vivo. Este trabalho teve por objetivo descrever e comparar o resultado da análise de uma mesma amostra biológica por MET, MEV e MC. Foram utilizadas culturas de células-tronco mesenquimais humanas derivadas de tecido adiposo, indiferenciadas e diferenciadas para adipócitos como modelo amostral. Por microscopia eletrônica de transmissão foi possível realizar a análise ultraestrutural da célula, observando a presença, localização e quantificação de organelas celulares relacionadas ao metabolismo deste tipo celular e especializações de membrana como cavéolas. Em microscopia eletrônica de varredura observou-se o volume das gotas lipídicas citoplasmáticas (GLC) sob a membrana plasmática, bem como projeções citoplasmáticas. Através do microscópio confocal, foi possível colocalizar proteínas presentes nas membranas e GLC, além de construir imagens tridimensionais de diferentes cortes ópticos. As três técnicas de microscopia analisadas neste trabalho produziram resultados que podem ser considerados complementares, evidenciando aspectos diferentes da mesma amostra. Finalmente, a escolha da técnica vai depender do objetivo do projeto de pesquisa e da disponibilidade de materiais e equipamentos.