A função do operon do metabolismo de β-glicosídeos na aptidão e virulência da cepa de Escherichia coli extraintestinal MT78

• Autor(a) principal: Wagner, João Pedro Stepan
• Data de Publicação: 2019
• Tipo de documento: Trabalho de conclusão de curso
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFRGS
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/10183/237473
• topic: Microbiologia; Virulência; Escherichia coli

O operon bgl codifica as enzimas responsáveis pelo metabolismo de β-glicosídeos, como salicina e arbutina, na bactéria Escherichia coli. Entretanto, estudos apontam uma possível relação deste operon com a virulência de E. coli patogênicas extraintestinais (ExPEC). Em estudos anteriores, um mutante da ExPEC aviária MT78, que teve operon bgl deletado, apresentou atenuação da virulência tanto in vitro quanto in vivo, o que sugere uma influência do operon na virulência desta cepa. O objetivo deste estudo foi analisar a influência do operon bgl na virulência da cepa MT78 e tentar elucidar os mecanismos pelos quais essa influência pode estar ocorrendo. Primeiramente, a funcionalidade do operon bgl na cepa MT78 foi confirmada através de testes de fermentação de β-glicosídeos e, então, o mutante MT78Δbgl foi submetido a testes fenotípicos para adesinas e motilidade. Constatou-se que não há alteração na produção de fímbria do tipo 1, porém há redução na motilidade do mutante. Verificou-se também que a cepa MT78 é capaz de hemaglutinação resistente à manose, mas o ensaio não foi capaz de quantificar se há alteração na hemaglutinação no mutante MT78Δbgl em comparação à selvagem. Outro mutante estudado, o MT78 bglB::Tn5 (20E12), apresentou uma atenuação na virulência ainda maior que o MT78Δbgl, além de não expressar fímbria do tipo 1. Afim de verificar se possuía outras mutações que explicassem o fenótipo observado, ele foi recriado por meio de outra técnica. Confirmou-se então, pelo novo mutante, que a inserção do transposon Tn5 apenas no gene bglB foi responsável por abolir a expressão de fímbria do tipo 1, o que pode explicar a maior atenuação da adesão e invasão in vitro a células não-fagocitárias. Por fim, deu-se início à tentativa de criação de complementados do mutante MT78Δbgl com diferentes combinações dos genes do operon, que podem ajudar a elucidar os mecanismo(s) pelo(s) qual(is) o operon bgl influencia a virulência em ExPEC.