Avaliação do efeito da restrição calórica materna gestacional sobre aspectos reprodutivos da prole e da mãe

• Autor(a) principal: Dal Magro, Bárbara Mariño
• Data de Publicação: 2018
• Tipo de documento: Trabalho de conclusão de curso
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFRGS
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/10183/239159
• topic: Restrição calórica; Gravidez; Estresse oxidativo; Reprodução; Ovário; Testículo; Sirtuínas; Mitocôndrias; Ovary; Testis; Pregnancy; Caloric restriction; Nutrition; Environment; Early development; Mitochondria; Oxidative stress

A restrição calórica (RC) é considerada um fator de intervenção ideal para a promoção da saúde, conhecida por aumentar a expectativa de vida, especialmente através da modulação redox. Interferências no ambiente materno são conhecidas por reprogramar a resposta metabólica da prole, tendo impacto na vida pós-natal. Entretanto, pouco se sabe sobre os efeitos da RC gestacional sobre parâmetros redox e mecanismos moleculares em ovários e testículos da prole na sua vida adulta. Nosso objetivo, neste trabalho, foi verificar os efeitos de uma RC moderada (20%) nos níveis de espécies reativas, nas defesas antioxidantes enzimáticas e não enzimáticas, nos parâmetros de dano oxidativo, na expressão molecular das enzimas SIRT1 e SIRT3, bem como avaliar os parâmetros morfológicos em ovários e testículos de ratos submetidos à RC gestacional. Ratas Wistar fêmeas adultas foram submetidas à RC moderada durante o período gestacional, recebendo suplementação de vitaminas e minerais a fim de equilibrar o consumo de micronutrientes em relação ao grupo controle, que recebeu ração ad libitum. Os filhotes foram eutanasiados no dia pós-natal (PND) 60, quando ovários e testículos foram removidos para posterior análise. Massa e potencial de membrana mitocondrial, níveis de superóxido mitocondrial, conteúdo de espécies reativas, conteúdo de óxido nítrico e um índice de lipoperoxidação foram analisados por citometria de fluxo; a atividade antioxidante enzimática e os conteúdos de carbonilas e sulfidrilas foram analisados espectrofotometricamente; o conteúdo de glutationa reduzida (GSH) foi analisado fluorimetricamente; o imunoconteúdo de SIRT1 e SIRT3 foi analisado por Western Blotting; as análises morfológicas foram feitas com coloração por hematoxilina-eosina; os úteros maternos foram corados com solução de NaOH 2%; e os dados obtidos foram analisados por teste t e considerados significativos quando p<0,05. O protocolo utilizado foi analisado e aprovado pela Comissão de Ética no Uso de Animais (CEUA) da UFRGS, sob o n° 34056. Filhotes fêmeas demonstraram altos níveis de oxidantes e aumento do dano oxidativo a lipídeos, embora tenha ocorrido aumento da atividade da enzima superóxido-dismutase em ovários. Em filhotes machos, foi observado diminuição das defesas antioxidantes enzimáticas e não enzimáticas por diminuição da atividade da enzima glioxalase I e diminuição do conteúdo de glutationa reduzida nos testículos. O dano oxidativo a proteínas não foi afetado em nenhum dos órgãos. Ovários e testículos demonstraram aumento da expressão de SIRT3, uma desacetilase relacionada à bioenergética celular e ao metabolismo da RC. Nossos dados sugerem que, embora a RC gestacional promova melhora de parâmetros moleculares na SIRT, tal intervenção nutricional afetou negativamente o estado redox em órgãos reprodutivos de ratos jovens adultos.