Mobilização de zinco em Acanthamoeba castellanii exposta a leveduras patogênicas do gênero Cryptococcus

• Autor(a) principal: Breda, Rafaela
• Data de Publicação: 2019
• Tipo de documento: Trabalho de conclusão de curso
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFRGS
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/10183/202464
• topic: Criptococose; Cryptococcus gattii; Cryptococcus neoformans; Leveduras; Acanthamoeba castellanii; Zinco; Fatores de virulência; Zinc

As leveduras encapsuladas Cryptococcus gattii e Cryptococcus neoformans são os agentes etiológicos da criptococose, doença caracterizada por quadros de meningoencefalite e responsável por 181.000 mortes anuais. A infecção acontece por inalação de esporos ou leveduras dissecadas presentes no ambiente, que se depositam nos alvéolos pulmonares, onde são rapidamente fagocitados por macrófagos alveolares. No ambiente, estas leveduras podem estas associadas a amebas de vida livre, sendo que macrófagos e amebas desenvolvem uma resposta similar ao fungo. Desta forma, é especulado que os determinantes de virulência necessários para infecção em mamíferos tenham surgido a partir de seleção em amebas no solo. Diversos organismos utilizam imunidade nutricional durante infecções, visando restringir o acesso do patógeno a nutrientes. Esta se caracteriza pela modulação dos níveis de metais essenciais. Zinco é importante para a virulência de C. gattii e sabe-se que macrófagos modulam a expressão de transportadores de zinco em resposta a C. neoformans. Considerando o exposto, este trabalho tem por objetivo analisar a expressão de transportadores de zinco em Acanthamoeba castellanii exposta aos agentes da criptococose. A partir de RNA coletado de amebas co-incubadas com células de C. neoformans ou C. gattii, foi empregado PCR quantitativo em tempo real para avaliar a expressão dos genes ACA1_260050 e ACA1_271600, filogeneticamente próximos de transportadores de zinco da família ZnT associados ao complexo de Golgi em mamíferos. Foi detectado aumento consistente de transcritos de genes codificantes de transportadores de zinco em células de A. castellanii em resposta a C. gattii e a C. neoformans. Adicionalmente, em experimentos de microscopia confocal de fluorescência, foi possível detectar mobilização de zinco nestas mesmas condições, quando comparadas ao controle sem a adição de leveduras. Assim, pode-se concluir que células de ameba ativamente modulam a quantidade de zinco intracelular em resposta à infecção por células de Cryptococcus spp.