Estudo do envolvimento de flavonóides na sinalização induzida por luz em raízes de Arabidopsis thaliana

• Autor(a) principal: Christino, Jonata Alex Ribeiro
• Data de Publicação: 2019
• Tipo de documento: Trabalho de conclusão de curso
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFRGS
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/10183/230438
• topic: Raizes; Auxina; Arabidopsis thaliana; Desenvolvimento vegetal; Root; Growth; Lateral root; Auxin; Transparent testa

Luz é um fator importante no controle do desenvolvimento vegetal. O efeito da luz sobre o crescimento da planta pode ser observado pelos resultados do desenvolvimento fotomorfogênico ou do desenvolvimento escotomorfogênico. Trabalhos anteriores já identificaram diversos componentes sinalizadores dependentes de luz em Arabidopsis thaliana envolvidos na regulação do desenvolvimento vegetal, como sacarose, auxina, e o fator de transcrição HY5. O fator de transcrição bZIP HY5 é considerado um regulador central dos genes envolvidos na fotomorfogênese e um indutor direto da rota metabólica de flavonóides, cuja produção e acúmulo está diretamente relacionada à presença de luz. Parte dos genes que codificam enzimas da via de biossíntese dos flavonóides é induzida diretamente por HY5. Plântulas mutantes perda de função para a enzima F3H (Flavanona 3-hidroxilase, tt6-3) apresentam um fenótipo alterado no desenvolvimento das raízes, com um encurtamento da raiz primária e um aumento no número de raízes laterais, fenótipo que também é observado no mutante hy5. Dessa forma, é possível que o fenótipo observado no mutante hy5 seja o resultado da sua deficiência de induzir a síntese de flavonóides. Portanto, a fim de elucidar se a formação de raízes laterais no mutante hy5 é dependente de flavonóides, o objetivo deste trabalho é expressar constitutivamente AtHY5 em um mutante de perda de função para o gene codificador da enzima F3H. Nesse trabalho, a sequência codificadora completa do gene AtHY5 foi clonada no vetor binário pH7WG2 para expressão sob controle do promotor constitutivo 35S CaMV em plantas de Arabidopsis. Diferentes genótipos (hy5 e tt6) foram transformados via Agrobacterium tumefaciens. Neste trabalho foram obtidas 6 plantas hy5 e 7 plantas tt6-3 transformadas com a construção 35S::HY5. A avaliação dos níveis de expressão de HY5 nas plantas T1 através de RT-qPCR, identificou a superexpressão de HY5 em algumas linhagens. O material gerado neste trabalho irá auxiliar na compreensão do papel dos flavonóides como participantes na sinalização fotomorfogênica em raízes dependente de HY5.