Caracterização da susceptibilidade a saneantes e relação com clonalidade em amostras de Staphylococcus haemolyticus isoladas de hemoculturas

• Autor(a) principal: Souza, Ariane Faria de
• Data de Publicação: 2020
• Tipo de documento: Trabalho de conclusão de curso
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFRJ
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/11422/19088
• topic: CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::MICROBIOLOGIA; CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::IMUNOLOGIA; Staphylococcus haemolyticus; Digluconato de clorexidina; Resistência a múltiplos medicamentos; Chlorhexidine digluconate; Drug Resistance, Multiple

Staphylococcus haemolyticus é um patógeno oportunista multirresistente que tem sido isolado de infecções de corrente sanguínea. A pressão seletiva pelo uso de biocidas em instituições de saúde pode levar a indução de resistência cruzada aos antimicrobianos, através da expressão de bombas de efluxo. O objetivo deste estudo é avaliar a Concentração Mínima Bactericida (CMB) de digluconato de clorexidina (DC), e a presença de genes relacionados à sua tolerância, relacionando-os com a clonalidade das amostras de S. haemolyticus isoladas de hemoculturas em um hospital do Rio de Janeiro; e realizar estudo piloto de resistência cruzada com amostras de referência de S. aureus. Foram avaliadas 71 amostras de S. haemolyticus previamente caracterizadas quanto a espécie, Concentração Mínima Inibitória (CMI) para DC, presença do gene qacA/B e expressão fenotípica de bombas de efluxo (método de Cartwheel). O gene smr (qacC) foi detectado pela técnica de PCR e a clonalidade foi avaliada pela técnica de PFGE para todas as amostras. A CMB, na ausência e presença de matéria orgânica (SFB, soro fetal bovino), foi determinada para amostras clínicas selecionadas de S. haemolyticus e para as amostras ATCC de S. aureus 6538 e 29213. As amostras ATCCs também foram expostas, in vitro, a doses crescentes de DC e, em seguida, as CMIs foram determinadas para ciprofloxacina, moxifloxacina, gentamicina e vancomicina pela técnica de microdiluição em caldo, e a expressão de bombas de efluxo foi verificada pelo método de Cartwheel, em caráter piloto. Os dados clínicos dos pacientes foram avaliados e associados com os resultados microbiológicos. Todas as 71 amostras de S. haemolyticus foram agrupadas em 25 clonalidades, sendo 13 (18,3%) amostras incluídas no clone A. Todas também foram positivas para o gene smr. A CMB sem e com SFB, respectivamente, foi de e 16g/ml para a amostra ATCC 6538 e de 16 g/ml para a ATCC 29213, em ambas as condições. Entre as amostras de S. haemolyticus testadas (n=6) foram encontrados valores de 2 e 4 g/ml para 2 amostras, e de 2 g/ml e 8 g/ml para as demais, respectivamente. Ao analisarmos a possível resistência cruzada aos antimicrobianos foi visto que para a ATCC 29213 houve um aumento de 64X na CMI para ciprofloxacina e 16X para moxifloxacina, enquanto para a ATCC 6538 o aumento foi de 8X na CMI para ciprofloxacina. A presença do gene qacA/B e de valores altos de Cartwheel foram relacionadas significantemente com valores de CMI ≥ 0,5 μg/mL do DC. Além disso, amostras do clone prevalente A foram associadas a altos valores de Cartwheel (p= 0.0038) e de CMI para DC (p= 0.0344). A variável idade avançada (≥60 anos) foi associada ao clone A (p=0.008) e a altos valores de Cartwheel das amostras (p=0.0189). Os resultados indicam alto potencial de tolerância a saneantes entre amostras de S. haemolyticus, destacando que sua indução pelo aumento de expressão de bombas de efluxo pode levar a resistência aos antimicrobianos. Ressalta-se que os valores de CMB para DC foram muito inferiores à concentração usada na rotina clínica, a qual pode manter níveis residuais de DC no ambiente, mantendo a pressão seletiva sobre o patógeno.