Estudo de interação bioquímica da metaloproteases de Leishmania spp. e Trypanosoma cruzi com substratos proteicos

• Autor(a) principal: Silva Júnior, Nilton Jose da
• Data de Publicação: 2021
• Tipo de documento: Trabalho de conclusão de curso
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFRN
• Texto Completo: https://repositorio.ufrn.br/handle/123456789/35702
• topic: Tripanossomatídeos; Tripanossomatídeos; Metaloproteases; Metaloproteases; gp63; gp63; Gelatina; Gelatine; Albumina; Albumin; Zimografia; Zymography

Os parasitas do grupo dos Tripanosomatídeos são responsáveis por importantes doenças negligenciadas de importância humana e animal. Apesar de inúmeros estudos, a Leishmaniose e a Doença de Chagas representam um importante problema de saúde pública, principalmente no Brasil. Atualmente, não existe vacinas para o controle das doenças parasitárias humanas e ainda existe uma grande necessidade de novos fármacos ou novas formulações dos fármacos, seguros, com maior eficácia e menos tóxicos. As metaloproteases são moléculas de superfície, presente nos tripanossomatídeos sendo fundamentais para interação parasita-hospedeiro, alterando a homeostasia da matriz extracelular. Diante disso, o objetivo deste estudo é a caracterização da atividade proteolítica de metaloproteases de Tripanosomatídeos de importância médica, causadoras de doenças, tais como a Doença de Chagas e as leishmanioses frente a substratos. A partir do cultivo axênico foram obtidos os extratos totais dos parasitas, do qual foi feito a quantificação, selecionando extratos com as melhores concentrações. Foram avaliados os perfis proteicos, bem como a atividade enzimática e atividade enzimática in vitro de diferentes extratos brutos dos Tripanosomatídeos. Através de ensaios por SDS-PAGE foi observado clara distinção entre os perfis dos parasitas. Através de ensaios de zimografia foi confirmado o perfil proteolítico das proteínas do extrato bruto de Leishmania spp. sobre o substrato gelatina e albumina. Em relação ao Trypanosoma cruzi, um padrão proteolítico semelhante com o descrito na literatura foi encontrado para a cruzipaína. Essas proteases foram submetidas a ensaios de degradação frente a substratos de albumina sérica, em diferentes intervalos de tempo, usando o método de SDS-PAGE, onde foi possível verificar a afinidade o perfil de atividade proteolítica das espécies selecionadas para esse estudo.