Um novo inibidor de tripsina multifuncional de sementes de Erythrina velutina: caracterizacao e propriedades farmacologicas
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Data de Publicação: | 2012 |
Tipo de documento: | Dissertação |
Idioma: | por |
Título da fonte: | Repositório Institucional da UFRN |
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Machado, Richele Janaína de Araújohttp://lattes.cnpq.br/1352905640097175http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4782221T9&dataRevisao=nullPedrosa, Matheus de Freitas Fernandeshttp://lattes.cnpq.br/2929963416385218Franco, Octávio Luizhttp://lattes.cnpq.br/8598274096498065Santos, Elizeu Antunes dos2014-12-17T14:03:40Z2013-04-222014-12-17T14:03:40Z2012-10-24MACHADO, Richele Janaína de Araújo. Um novo inibidor de tripsina multifuncional de sementes de Erythrina velutina: caracterizacao e propriedades farmacologicas. 2012. 116 f. Dissertação (Mestrado em Bioquímica; Biologia Molecular) - Universidade Federal do Rio Grande do Norte, Natal, 2012.https://repositorio.ufrn.br/jspui/handle/123456789/12596Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível SuperiorA sepse é uma doença complexa, de alta gravidade e durante o seu desenvolvimento pode ocorrer eventos inflamatórios graves, que podem levar o paciente ao óbito. Inibidores de peptidases isolados de sementes de leguminosas estão sendo estudados devido suas variadas atividades biomédicas ou farmacológicas. Nesse sentido, o presente estudo consistiu na avaliação das atividades multifuncionais do inibidor de tripsina presente nas sementes de Erythrina velutina (EvTIb). Dois inibidores de tripsina foram purificados por fracionamento com sulfato de amônio (30-60%), cromatografia de afinidade em tripsina-sepharose e cromatografia de fase reversa. Os inibidores purificados foram denominados de EvTIa e EvTIb e suas massas moleculares determinadas por espectrometria de massa por electrospray (ESI) foram: 19.228,16 Da e 19.210,48 Da, respectivamente. Dentre eles, o EvTIb apresentou maior atividade específica para tripsina e maior percentual de rendimento de extração, sendo, portanto, o escolhido para as análises adicionais. Os fragmentos desse inibidor gerados por tratamento enzimático com tripsina e pepsina foram analisados por espectrometria de massa MALDI-ToF-ToF, permitindo elucidar sua estrutura primária parcial. O EvTIb exibiu uma atividade de inibição do tipo não-competitiva para a tripsina com IC50 de 22 nmol.L-1 e constante de inibição (Ki) de 10 nmol.L-1. Além da atividade de inibição para tripsina, EvTIb também inibiu o fator Xa e a elastase neutrofílica, porém não inibiu trombina, quimotripsina ou peptidase 3. EvTIb se manteve estável a variação de pH e temperatura. EvTIb não foi citotóxico e não inibiu o crescimento bacteriano de Escherichia coli e Staphylococcus aureus. EvTIb foi capaz de prolongar o tempo de coagulação de maneira dose-dependente. Finalmente, observou-se que EvTIb foi capaz de restabelecer os níveis hemostáticos, inibir a migração leucocitária em camundongos sépticos e diminuir a secreção de TNF-α e não teve ação sobre a liberação de IL-6. Por outro lado, EvTIb promoveu um aumento na liberação de IFN- α e IL-12. Esses dados sugerem que EvTIb pode constituir em uma nova molécula com potencial de uso no tratamento da sepse e doenças relacionadas à coagulaçãoapplication/pdfporUniversidade Federal do Rio Grande do NortePrograma de Pós-Graduação em BioquímicaUFRNBRBioquímica; Biologia MolecularAnti-inflamatório. Anticoagulante. Mulungu. SepseAnti-inflammatory. Anticoagulant. Mulungu. SepsisCNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::BIOQUIMICAUm novo inibidor de tripsina multifuncional de sementes de Erythrina velutina: caracterizacao e propriedades farmacologicasinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Institucional da UFRNinstname:Universidade Federal do Rio Grande do Norte (UFRN)instacron:UFRNORIGINALNovoInibidorTripsina_Machado_2012.pdfapplication/pdf3022782https://repositorio.ufrn.br/bitstream/123456789/12596/1/NovoInibidorTripsina_Machado_2012.pdf46556132e4939175f840346baa8ae21fMD51TEXTRicheleJAM_DISSERT.pdf.txtRicheleJAM_DISSERT.pdf.txtExtracted texttext/plain211621https://repositorio.ufrn.br/bitstream/123456789/12596/6/RicheleJAM_DISSERT.pdf.txt931b2295d6944aeb6f658d206e9c9b89MD56NovoInibidorTripsina_Machado_2012.pdf.txtNovoInibidorTripsina_Machado_2012.pdf.txtExtracted texttext/plain211621https://repositorio.ufrn.br/bitstream/123456789/12596/8/NovoInibidorTripsina_Machado_2012.pdf.txt931b2295d6944aeb6f658d206e9c9b89MD58THUMBNAILRicheleJAM_DISSERT.pdf.jpgRicheleJAM_DISSERT.pdf.jpgIM Thumbnailimage/jpeg3343https://repositorio.ufrn.br/bitstream/123456789/12596/7/RicheleJAM_DISSERT.pdf.jpg67b33cde76d80c8d7987f1616d4f4be5MD57NovoInibidorTripsina_Machado_2012.pdf.jpgNovoInibidorTripsina_Machado_2012.pdf.jpgIM Thumbnailimage/jpeg3343https://repositorio.ufrn.br/bitstream/123456789/12596/9/NovoInibidorTripsina_Machado_2012.pdf.jpg67b33cde76d80c8d7987f1616d4f4be5MD59123456789/125962019-01-29 16:57:15.794oai:https://repositorio.ufrn.br:123456789/12596Repositório de PublicaçõesPUBhttp://repositorio.ufrn.br/oai/opendoar:2019-01-29T19:57:15Repositório Institucional da UFRN - Universidade Federal do Rio Grande do Norte (UFRN)false |
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