Atividade larvicida e inibição in vitro de proteases intestinais de Aedes aegypti por extratos de sementes de plantas da caatinga

• Autor(a) principal: Bezerra, Pedro Vítor Vale
• Data de Publicação: 2022
• Tipo de documento: Trabalho de conclusão de curso
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFRN
• Texto Completo: https://repositorio.ufrn.br/handle/123456789/49312
• topic: CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::BIOQUIMICA::ENZIMOLOGIA; Homogenato intestinal; Zimograma; Atividade aedicida; Proteases serínicas; Intestinal homogenate; Zymography; Aedicidal activity; Serine proteases

Arboviroses são doenças epidemiologicamente relevantes transmitidas por artrópodes, afetando sobretudo países tropicais, como o Brasil. Atualmente o enfrentamento das arboviroses é realizado, principalmente, através do controle populacional do Aedes aegypti, principal mosquito vetor urbano. Recentemente, a busca por alternativas ecologicamente amigáveis para o controle vetorial tem sido incentivada, como o desenvolvimento de inseticidas botânicos. Nesse cenário, a Caatinga, centro de biodiversidade, representa uma fonte importante de espécies vegetais para prospecção de moléculas inseticidas. A presente pesquisa investigou a potencial atividade de extratos de sementes de 3 espécies vegetais da Caatinga, Amburana cearensis, Anadenanthera colubrina e Erythrina velutina, contra larvas de A. aegypti, e buscou avaliar, in vitro, suas capacidades de inibição das proteases intestinais das larvas deste mosquito. Bioensaios foram realizados expondo as larvas em diferentes concentrações dos extratos, sendo analisada a taxa de sobrevivência larval em 24h e 48h, para estimar as concentrações letais 50% (CL50). Homogenatos foram produzidos a partir dos intestinos médios das larvas para analisar in vitro a inibição pela exposição aos extratos, quantitativamente, através de ensaio de atividade enzimática, e qualitativamente, através de zimogramas. Os extratos aquosos de A. cearensis (EC), A. colubrina (EA) e E. velutina (EM) comprometeram a sobrevivência das larvas, apresentando CL50 iguais a 0,67 mg/mL, 0,28 mg/mL e 1,85 mg/mL, após 24h de exposição, e 0,24 mg/mL, 0,05 mg/mL e 0,91 mg/mL, após 48h de exposição, respectivamente. A caracterização inicial dos extratos sugere uma eficiência nas condições de extrações, com rendimento em peso seco entre 14,53 mg e 34,50 mg, rendimento total entre 7,56% e 54,16%, e teores de proteínas solúveis entre 1,16 mg/mL e 2,30 mg/mL. As proteínas solúveis nos extratos possivelmente favoreceram o comprometimento da atividade enzimática das proteases do homogenato intestinal das larvas de A. aegypti, com atividade inibitória específica em EC (662,65 UI/mg), EA (226,19 UI/mg) e EM (496,11 UI/mg). As análises dos zimogramas revelaram a presença de bandas proteolíticas de peso molecular relativo alto (acima de 66 kDa), médio (entre 45 kDa e 30 Kda) e baixo (abaixo de 30 kDa), e que os extratos afetaram grupos distintos de proteases do homogenato das larvas. Os resultados indicam que a inibição das proteases intestinais pode compreender um dos modos de ação para a atividade larvicida dos extratos, em especial para o extrato EC. Testes complementares estão em andamento para confirmar essa relação.