Avaliação da atividade biológica de células-tronco da polpa dental humana submetidas ao laser de baixa intensidade

• Autor(a) principal: Araújo, Ivana Maria Zaccara Cunha
• Data de Publicação: 2013
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFRN
• Texto Completo: https://repositorio.ufrn.br/jspui/handle/123456789/27481
• topic: CNPQ::CIENCIAS DA SAUDE::SAUDE COLETIVA; Lasers; Células-tronco; Polpa Dentária

O laser de baixa intensidade (LBI) tem sido utilizado com a finalidade de promover cicatrização e regeneração dos tecidos. A literatura mostra um efeito positivo do LBI na proliferação celular, porém pouco se sabe sobre a sua eficácia na proliferação de células-tronco dentais. O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito da irradiação do LBI na atividade biológica de células-tronco da polpa de dente permanente (DPSCs). Extratos de polpa dental foram isolados de cinco terceiros molares hígidos removidos por indicação cirúrgica e/ou ortodôntica. Após a digestão enzimática, as células foram caracterizadas e cultivadas em meio de cultura αMEM suplementado com antibióticos e 15% de soro fetal bovino. No terceiro subcultivo, as células foram irradiadas com um laser diodo InGaAlP, utilizando-se duas diferentes densidades de energia (0,5 J/cm2 - 16 segundos e 1,0 J/cm² - 33 segundos), comprimento de onda de 660nm e potência de 30mW. Uma nova irradiação, utilizando os mesmos parâmetros, foi realizada 48 h após a primeira. Um grupo controle (não irradiado) foi mantido nas mesmas condições experimentais de cultivo. A fim de avaliar a proliferação celular, foram utilizados o método exclusão por Azul de Tripan e a viabilidade celular medida através do ensaio de MTT, nos intervalos de 24, 48, 72 e 96 h após a primeira aplicação do laser. Nos mesmos intervalos foram avaliados os eventos do ciclo celular. Eventos relacionados à morte celular foram analisados por citometria de fluxo nos intervalos de 24 e 72 horas. Os dados das contagens celulares foram submetidos a testes estatísticos não paramétricos de Kruskal-Wallis e Mann-Whitney, considerando um intervalo de confiança de 95%. Os resultados mostraram que os dois grupos irradiados exibiram uma curva de proliferação mais ascendente, com diferença estatisticamente significante (p<0,05) em relação ao grupo controle nos intervalos de 72 e 96h, sem alterações consideráveis na viabilidade celular ao longo do experimento. A distribuição das células nas fases do ciclo celular foi coerente com células em proliferação nos três grupos. Os resultados da curva de crescimento, MTT, Anexina/PI e Ciclo celular foram concordantes, dessa forma é possível concluir que o LLLI, principalmente com dose de 1,0J/cm2 , seja uma terapia de grande importância para o futuro da engenharia tecidual e medicina regenerativa envolvendo DPSCs, uma vez que neste estudo o LLLI contribuiu com o crescimento e viabilidade celular.