Efeitos do laser de baixa intensidade na proliferação e viabilidade de células pré-osteoblásticas na superfície de filmes de ácido polilático

• Autor(a) principal: Sabino, Vladimir Galdino
• Data de Publicação: 2020
• Tipo de documento: Trabalho de conclusão de curso
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFRN
• Texto Completo: https://repositorio.ufrn.br/handle/123456789/43231
• topic: Biomateriais; Polímeros; Laser; Osteoblastos; Proliferação Celular; Viabilidade Celular

O ácido polilático (PLA) é um biomaterial usado em muitas aplicações biomédicas e mostra-se promissor na produção de arcabouços para engenharia de tecidos. A irradiação com laser de baixa intensidade (LBI) tem sido sugerida como uma ferramenta para promover a bioestimulação in vitro de vários tipos celulares. Nesse contexto, o estudo teve como objetivo verificar a eficácia do LBI na proliferação de pré-osteoblastos MC3T3-E1 cultivados em filmes de PLA. Os filmes produzidos foram caracterizados em termos de hidrofilicidade por testes de ângulo de contato, morfologia da superfície por microscopia eletrônica de varredura (MEV) e nanotopografia por microscopia de força atômica (AFM). As células MC3T3-E1 foram cultivadas em três grupos: Controle - superfície plástica de poliestireno; PLA - filme de PLA; e PLA + Laser - filme de PLA, com posterior irradiação das células com laser de diodo (InGaAIP; comprimento de onda 660 nm; potência 30 mW; densidade energética 4 J/cm²). A proliferação celular foi avaliada pelo ensaio Alamar Blue nos intervalos de 24, 48 e 72 h após a irradiação. No intervalo de 72 h, a viabilidade celular foi avaliada pelo ensaio Live/Dead, os eventos relacionados à apoptose por marcação com Anexina-V/PI e os eventos do ciclo celular por citometria de fluxo, enquanto a morfologia celular na superfície de cada filme foi avaliada por MEV. Os filmes produzidos apresentaram superfície lisa e regular, com rugosidade superficial média (Ra) de 21,43 nm. Os resultados do ensaio bioquímico do Alamar Blue indicaram que o grupo PLA + Laser exibiu maior proliferação (p<0,01) quando comparado aos grupos Controle e PLA. Os ensaios Live/Dead e Annexina/PI indicaram aumento da viabilidade celular no grupo PLA + Laser, que também apresentou maior porcentagem de células (p<0.05) nas fases proliferativas do ciclo celular (S e G2/M). Esses achados foram confirmados pela maior densidade celular observada no grupo PLA + Laser através da análise por MEV. As evidências deste estudo corroboram a ideia de que o LBI aumenta a proliferação de células MC3T3-E1 nas superfícies do PLA, sugerindo que ele pode ser potencialmente aplicado na engenharia de tecidos ósseos.