Indução da organogênese a partir de segmentos de epicótilo de jacarandá-da-bahia

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Davis, Ana Carollina Siqueira
Data de Publicação: 2017
Tipo de documento: Trabalho de conclusão de curso
Idioma: por
Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFRRJ
Texto Completo: https://rima.ufrrj.br/jspui/handle/20.500.14407/3206
Resumo: A Dalbergia nigra é uma espécie nativa do bioma Mata Atlântica de alto valor econômico. Devida a extração desordenada de sua madeira no passado, essa espécie está na lista das espécies ameaçadas de extinção. Diante desta realidade, estudos e o desenvolvimento de metodologias alternativas são necessários para estabelecer uma estratégia de conservação e propagação para a espécie. Desta forma, o objetivo desse trabalho foi desenvolver a micropropagação da Dalbergia nigra via organogênese indireta, a partir da desinfestação e germinação in vitro das suas sementes, a indução de calogênese a partir de segmentos de epicótilo das plântulas germinadas in vitro, e a regeneração de brotos a partir dos calos formados. A princípio, foi necessário o estabelecimento de um protocolo de desinfestação das sementes, onde foram testadas três concentrações de peróxido de hidrogênio (10%, 20% e 30%). Após a desinfestação, as sementes foram inoculadas em meio de cultura MS e aos 28 dias foram avaliados a porcentagem de germinação e contaminação. Para a indução de calos foram utilizados como explante segmentos de epicótilo das plântulas germinadas in vitro, sendo estes excisados e inoculados em meio de cultura MS modificado com a metade da concentração de nitrogênio, suplementado com combinações dos reguladores de crescimento ANA e TDZ e na ausência destes. Aos 45 dias os explantes foram avaliados quanto à porcentagem de explantes com formação de calo e a porcentagem da área dos explantes coberto por calo. Os calos provenientes deste experimento foram utilizados para a regeneração de brotos. Estes foram inoculados em meio de cultura MS modificado com metade da concentração de nitrogênio, suplementado com diferentes combinações de BAP e ANA. Aos 45 dias, foi avaliada a porcentagem de calos com formação de gemas e número de brotos formados. Para o experimento de desinfestação, observou-se que em todas as concentrações testadas o peróxido de hidrogênio foi eficiente para a desinfestação de sementes de D. nigra. Para a indução de calos, todos os tratamentos foram eficientes, principalmente na concentração de 0,009 μM ANA + 2,5 μM TDZ. Em relação à regeneração de gemas e brotos, concluiu-se que houve alta porcentagem de calos com gemas. Entretanto, a regeneração de brotos a partir das gemas foi baixa. Apesar dos avanços obtidos nesse estudo, outros se fazem necessários para o estabelecimento de um protocolo eficiente para a micropropagação dessa espécie.
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A princípio, foi necessário o estabelecimento de um protocolo de desinfestação das sementes, onde foram testadas três concentrações de peróxido de hidrogênio (10%, 20% e 30%). Após a desinfestação, as sementes foram inoculadas em meio de cultura MS e aos 28 dias foram avaliados a porcentagem de germinação e contaminação. Para a indução de calos foram utilizados como explante segmentos de epicótilo das plântulas germinadas in vitro, sendo estes excisados e inoculados em meio de cultura MS modificado com a metade da concentração de nitrogênio, suplementado com combinações dos reguladores de crescimento ANA e TDZ e na ausência destes. Aos 45 dias os explantes foram avaliados quanto à porcentagem de explantes com formação de calo e a porcentagem da área dos explantes coberto por calo. Os calos provenientes deste experimento foram utilizados para a regeneração de brotos. Estes foram inoculados em meio de cultura MS modificado com metade da concentração de nitrogênio, suplementado com diferentes combinações de BAP e ANA. Aos 45 dias, foi avaliada a porcentagem de calos com formação de gemas e número de brotos formados. Para o experimento de desinfestação, observou-se que em todas as concentrações testadas o peróxido de hidrogênio foi eficiente para a desinfestação de sementes de D. nigra. Para a indução de calos, todos os tratamentos foram eficientes, principalmente na concentração de 0,009 μM ANA + 2,5 μM TDZ. Em relação à regeneração de gemas e brotos, concluiu-se que houve alta porcentagem de calos com gemas. Entretanto, a regeneração de brotos a partir das gemas foi baixa. Apesar dos avanços obtidos nesse estudo, outros se fazem necessários para o estabelecimento de um protocolo eficiente para a micropropagação dessa espécie.Dalbergia nigra is a native species of the Atlantic Forest biome of high economic value. Due to the disorderly extraction of its wood in the past, this species is on the list of species threatened with extinction. Faced with this reality, studies and the development of alternative methodologies are necessary to establish a conservation and propagation strategy for this species. In this way, the objective of this study was to develop the micropropagation of Dalbergia nigra via indirect organogenesis, from the in vitro disinfestation and germination of its seeds, the induction of calogenesis from epicotyl segments of the in vitro germinated seedlings, and the regeneration of shoots from the formed calluses. At first, it was necessary to establish a seed disinfestation protocol, where three concentrations of hydrogen peroxide were tested (10%, 20% and 30%). After the disinfestation, the seeds were inoculated in MS medium and at 28 days the percentage of germination and contamination were evaluated. For callus induction, epicotyl segments of germinated seedlings were excised and inoculated in modified MS culture medium with half of the nitrogen concentration, supplemented with combinations of the growth regulators α-naphthaleneacetic acid (NAA) And thidiazuron (TDZ) and in the absence thereof. At 45 days the explants were evaluated for the percentage of explants with callus formation and the percentage of the explants area covered by callus. The calluses from this experiment were used for the regeneration of shoots. These were inoculated in modified MS culture medium with half of the nitrogen concentration, supplemented with different combinations of 6-benzylaminopurine (BAP) and α-naphthaleneacetic acid (NAA). At 45 days, the percentage of calli with bud formation and the number of shoots regenerated were evaluated. For the disinfestation experiment, it was observed that in all concentrations tested, hydrogen peroxide was efficient for disinfestation of seeds of D. nigra. For callus induction, all treatments were effective, particularly at a concentration of 0.009 uM ANA + 2.5 uM TDZ. In relation to the regeneration of buds and shoots, it was concluded that there was a high percentage of calli with buds. However, the shoot regeneration from the buds was low. Despite the advances obtained in this study, other studies are necessary for the establishment of an efficient protocol for the micropropagation of this species.Dalbergia nigraCultivo in vitroMicropropagaçãoIndução da organogênese a partir de segmentos de epicótilo de jacarandá-da-bahiainfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/bachelorThesisbachareladoporreponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFRRJinstname:Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro (UFRRJ)instacron:UFRRJinfo:eu-repo/semantics/openAccessORIGINALMonografia Ana Davis.pdfMonografia Ana Davis.pdfapplication/pdf777272https://rima.ufrrj.br/jspui/bitstream/20.500.14407/3206/1/Monografia%20Ana%20Davis.pdf88914ae3bdaac3a76cff1058dde6e85fMD51LICENSElicense.txtlicense.txttext/plain; charset=utf-81748https://rima.ufrrj.br/jspui/bitstream/20.500.14407/3206/2/license.txt8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33MD52TEXTMonografia Ana Davis.pdf.txtMonografia Ana Davis.pdf.txtExtracted texttext/plain71377https://rima.ufrrj.br/jspui/bitstream/20.500.14407/3206/3/Monografia%20Ana%20Davis.pdf.txt422d2dc78d86db2513dc188986a5ede7MD53THUMBNAILMonografia Ana Davis.pdf.jpgMonografia Ana Davis.pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg1212https://rima.ufrrj.br/jspui/bitstream/20.500.14407/3206/4/Monografia%20Ana%20Davis.pdf.jpg4de0616ca88d796fc862d0a31aac4d1fMD5420.500.14407/32062023-11-09 12:26:11.489oai:rima.ufrrj.br:20.500.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Biblioteca Digital de Teses e Dissertaçõeshttps://tede.ufrrj.br/PUBhttps://tede.ufrrj.br/oai/requestbibliot@ufrrj.br||bibliot@ufrrj.bropendoar:2023-11-09T15:26:11Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFRRJ - Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro (UFRRJ)false
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