Expressão recombinante de uma crustina do camarão nativo Farfantepenaeus paulensis e determinação de seu local de síntese através de imunomarcação

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Bandeira, Paula Terra
Data de Publicação: 2012
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional da UFSC
Texto Completo: http://repositorio.ufsc.br/xmlui/handle/123456789/93901
Resumo: Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia, Florianópolis, 2010
id UFSC_0d643cadcb8d041db074d9a9531d685a
oai_identifier_str oai:repositorio.ufsc.br:123456789/93901
network_acronym_str UFSC
network_name_str Repositório Institucional da UFSC
repository_id_str 2373
spelling Expressão recombinante de uma crustina do camarão nativo Farfantepenaeus paulensis e determinação de seu local de síntese através de imunomarcaçãoBiotecnologiaPeptídeosAgentes antiinfecciososHemolinfaCrustaceoCamarão rosaDissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia, Florianópolis, 2010Crustinas são peptídeos antimicrobianos que integram o sistema imune inato dos crustáceos e atuam na defesa destes animais contra infecções, juntamente com outras moléculas imunoefetoras presentes na hemolinfa. O objetivo do presente trabalho foi clonar e expressar, em sistema heterólogo, uma crustina do camarão nativo Farfantepenaeus paulensis para avaliar sua atividade antimicrobiana e produzir anticorpos policlonais para imunolocalizar este peptídeo nas diferentes populações de hemócitos deste peneídeo, assim como em diferentes grupos de crustáceos. Por abordagem molecular, foi possível clonar uma sequência gênica correspondente a uma crustina, com características do subgrupo da crustina I, que denominamos de crusFpau2. A crusFpau2 apresentou 94% de homologia com a única isoforma já descrita em F. paulensis (crusFpau). Esta nova isoforma caracteriza-se por apresentar uma região N-terminal rica em resíduos de glicina, além da região C-terminal com doze resíduos conservados de cisteína, onde se encontra um domínio WAP (whey acidic protein). A crusFpau2 foi expressa em E. coli BL21(DE3)pLysS com peso molecular de 17,3 kDa e foi utilizada para avaliar sua atividade antimicrobiana e produzir anticorpos policlonais em camundongo. A crustina recombinante mostrou-se ativa contra a bactéria Micrococcus luteus. Através de imunomarcação foi possível determinar que as crustinas são produzidas de forma constitutiva apenas nos hemócitos granulares (HGs) de F. paulensis, sendo armazenadas em seus grânulos. Aparentemente, estas proteínas não são processadas no interior dos grânulos e não são secretadas para a hemolinfa. Os anticorpos produzidos contra a crusFpau2 recombinante foram ainda capazes de reconhecer especificamente crustinas nos hemócitos granulares de outros grupos de crustáceos (Litopenaeus vannamei, Macrobrachium potiuna e Callinectes sapidus), mas não no mexilhão marinho Perna perna. Estes resultados sugerem que as crustinas são peptídeos de ocorrência geral em crustáceos. Este é o primeiro trabalho que produziu um peptídeo antimicrobiano a partir de uma espécie nativa brasileira de crustáceos marinhos, além de produzir os primeiros anticorpos contra crustinas até o momento. Estes anticorpos constituem uma ferramenta importante para imunomarcar especificamente populações de hemócitos granulares de crustáceos, além de auxiliar a uma melhor compreensão do sistema imune deste grupo zoológico, que inclui muitas espécies de interesse econômico. Por fim, uma avaliação futura mais detalhada do seu real espectro antimicrobiano poderá revelar o seu potencial promissor como agente terapêutico para aquicultura e saúde humana.Barracco, Margherita Anna Antonia MariaUniversidade Federal de Santa CatarinaBandeira, Paula Terra2012-10-25T04:30:25Z2012-10-25T04:30:25Z2012-10-25T04:30:25Zinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesis168 p.| il., tabs.application/pdf282466http://repositorio.ufsc.br/xmlui/handle/123456789/93901porreponame:Repositório Institucional da UFSCinstname:Universidade Federal de Santa Catarina (UFSC)instacron:UFSCinfo:eu-repo/semantics/openAccess2013-05-02T19:18:18Zoai:repositorio.ufsc.br:123456789/93901Repositório InstitucionalPUBhttp://150.162.242.35/oai/requestopendoar:23732013-05-02T19:18:18Repositório Institucional da UFSC - Universidade Federal de Santa Catarina (UFSC)false
dc.title.none.fl_str_mv Expressão recombinante de uma crustina do camarão nativo Farfantepenaeus paulensis e determinação de seu local de síntese através de imunomarcação
title Expressão recombinante de uma crustina do camarão nativo Farfantepenaeus paulensis e determinação de seu local de síntese através de imunomarcação
spellingShingle Expressão recombinante de uma crustina do camarão nativo Farfantepenaeus paulensis e determinação de seu local de síntese através de imunomarcação
Bandeira, Paula Terra
Biotecnologia
Peptídeos
Agentes antiinfecciosos
Hemolinfa
Crustaceo
Camarão rosa
title_short Expressão recombinante de uma crustina do camarão nativo Farfantepenaeus paulensis e determinação de seu local de síntese através de imunomarcação
title_full Expressão recombinante de uma crustina do camarão nativo Farfantepenaeus paulensis e determinação de seu local de síntese através de imunomarcação
title_fullStr Expressão recombinante de uma crustina do camarão nativo Farfantepenaeus paulensis e determinação de seu local de síntese através de imunomarcação
title_full_unstemmed Expressão recombinante de uma crustina do camarão nativo Farfantepenaeus paulensis e determinação de seu local de síntese através de imunomarcação
title_sort Expressão recombinante de uma crustina do camarão nativo Farfantepenaeus paulensis e determinação de seu local de síntese através de imunomarcação
author Bandeira, Paula Terra
author_facet Bandeira, Paula Terra
author_role author
dc.contributor.none.fl_str_mv Barracco, Margherita Anna Antonia Maria
Universidade Federal de Santa Catarina
dc.contributor.author.fl_str_mv Bandeira, Paula Terra
dc.subject.por.fl_str_mv Biotecnologia
Peptídeos
Agentes antiinfecciosos
Hemolinfa
Crustaceo
Camarão rosa
topic Biotecnologia
Peptídeos
Agentes antiinfecciosos
Hemolinfa
Crustaceo
Camarão rosa
description Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia, Florianópolis, 2010
publishDate 2012
dc.date.none.fl_str_mv 2012-10-25T04:30:25Z
2012-10-25T04:30:25Z
2012-10-25T04:30:25Z
dc.type.status.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/publishedVersion
dc.type.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/masterThesis
format masterThesis
status_str publishedVersion
dc.identifier.uri.fl_str_mv 282466
http://repositorio.ufsc.br/xmlui/handle/123456789/93901
identifier_str_mv 282466
url http://repositorio.ufsc.br/xmlui/handle/123456789/93901
dc.language.iso.fl_str_mv por
language por
dc.rights.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/openAccess
eu_rights_str_mv openAccess
dc.format.none.fl_str_mv 168 p.| il., tabs.
application/pdf
dc.source.none.fl_str_mv reponame:Repositório Institucional da UFSC
instname:Universidade Federal de Santa Catarina (UFSC)
instacron:UFSC
instname_str Universidade Federal de Santa Catarina (UFSC)
instacron_str UFSC
institution UFSC
reponame_str Repositório Institucional da UFSC
collection Repositório Institucional da UFSC
repository.name.fl_str_mv Repositório Institucional da UFSC - Universidade Federal de Santa Catarina (UFSC)
repository.mail.fl_str_mv
_version_ 1808651898471841792

Registros relacionados