Clonagem e expressão da enzina tripanotiona redutase de Leishmania braziliensis e atividade leishmanicida de chalconas

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Nunes, Rebeca Körting
Data de Publicação: 2012
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional da UFSC
Texto Completo: http://repositorio.ufsc.br/xmlui/handle/123456789/94917
Resumo: Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Programa de Pós-graduação em Biotecnologia, Florianópolis, 2011
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spelling Clonagem e expressão da enzina tripanotiona redutase de Leishmania braziliensis e atividade leishmanicida de chalconasBiotecnologiaLeishmanioseChalconasDissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Programa de Pós-graduação em Biotecnologia, Florianópolis, 2011O presente estudo teve por objetivo avaliar atividade leishmanicida in vitro de chalconas trimetoxiladas contra formas promastigotas de cultura e amastigotas intracelulares de L. braziliensis e L. chagasi em células da linhagem J744-A1 e macrófagos murinos derivados de medula. Além disso, foi realizada a clonagem e a expressão da enzima tripanotiona redutase de L. braziliensis com o objetivo de implementar uma metodologia para avaliação de compostos inibidores desta enzima. Trinta e cinco das 70 chalconas avaliadas mostraram atividade leishmanicida contra formas promastigotas, com CI50 variando de 1,31 a 32,54 µM, e oito destas mostraram índices de seletividade maiores que 20 contra formas promastigotas de L. braziliensis e L. chagasi. Nos ensaios contra formas amastigotas intracelulares de L. braziliensis na linhagem J744-A1, as chalconas M10 e M30 apresentaram CI50 de 0,13 e 0,34 µM, respectivamente, sendo as mais seletivas para o parasito. Em macrófagos murinos infectados a CI50 variou de 2,2 a 6,5 µM para L. braziliensis e de 2,4 a 8,7 µM para L. chagasi. De maneira geral, a espécie dermotrópica mostrou-se mais sensível que a viscerotrópica aos compostos. A expressão da tripanotiona redutase recombinante de L. braziliensis (LbTR) resultou em uma proteína de 53,5kDa. A atividade biológica da enzima foi confirmada pela redução do substrato (tripanotiona) e sua inibição pelos compostos padrão (clomipramina e ácido gálico). Ensaios de inibição in vitro da atividade enzimática com as 8 chalconas ativas mostraram que apenas dois compostos (D08 e M17) foram capazes de inibir moderadamente a atividade da enzima (58% e 63%). As chalconas trimetoxiladas apresentaram um potente efeito leishmanicida in vitro, constituindo-se em moléculas protótipo promissoras para o desenvolvimento de novos agentes leishmanicidas.Steindel, MarioUniversidade Federal de Santa CatarinaNunes, Rebeca Körting2012-10-25T17:59:54Z2012-10-25T17:59:54Z2012-10-25T17:59:54Zinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesis1 v.| il., grafs., tabs.application/pdf290074http://repositorio.ufsc.br/xmlui/handle/123456789/94917porreponame:Repositório Institucional da UFSCinstname:Universidade Federal de Santa Catarina (UFSC)instacron:UFSCinfo:eu-repo/semantics/openAccess2013-05-02T01:50:38Zoai:repositorio.ufsc.br:123456789/94917Repositório InstitucionalPUBhttp://150.162.242.35/oai/requestopendoar:23732013-05-02T01:50:38Repositório Institucional da UFSC - Universidade Federal de Santa Catarina (UFSC)false
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