Investigação Sobre os Peptídeos Transferidos para a Casca do Ovo de Callosobruchus maculatus Alimentados com Vicilina de Vigna unguiculata e seu Possível Efeito Antimicrobiano

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Linhares, Ricardo Thomé
Data de Publicação: 2013
Tipo de documento: Trabalho de conclusão de curso
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional da UFSC
Texto Completo: https://repositorio.ufsc.br/xmlui/handle/123456789/132695
Resumo: TCC(graduação) - Universidade Federal de Santa Catarina. Centro de Ciências Biológicas. Biologia.
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spelling Investigação Sobre os Peptídeos Transferidos para a Casca do Ovo de Callosobruchus maculatus Alimentados com Vicilina de Vigna unguiculata e seu Possível Efeito AntimicrobianoPresente nupcialVicilinaPoliândriaCópulasResistência antimicrobianaTCC(graduação) - Universidade Federal de Santa Catarina. Centro de Ciências Biológicas. Biologia.Este trabalho mostra que a vicilina, uma proteína de reserva de sementes, presente na dieta dos besouros Callosobruchus maculatus após ser internalizada é processada pelos machos, sendo transferida para as fêmeas durante a cópula através do fluído seminal como presente nupcial. Larvas de terceiro estádio foram colocadas para se alimentar em sementes artificiais. As sementes foram montadas com farinha de Vigna unguiculata mais 0,5% vicilina marcada FITC ou RITC dentro de cápsulas de gelatina. Machos que haviam passado pelas dietas foram separados ainda virgens. Cópulas controladas de fêmeas virgens não marcadas, retiradas da colônia, com os machos com vicilina marcada foram realizadas. Em um primeiro momento cada fêmea copulou com um macho marcado, foi retirada e deixada ovipondo em um frasco coberto individual contendo sementes. No dia seguinte foi feita uma segunda cópula com um macho agora com outra marcação, as fêmeas foram deixadas ovipondo em frascos com sementes. Os ovos foram coletados após a segunda cópula e montados em lâminas escavadas para observação em microscópio confocal. As duas marcações foram observadas na superfície dos ovos mostrando a contribuição de ambos os machos nos peptídeos depositados sobre os ovos pelas fêmeas, confirmando que as fêmeas se utilizam dos peptídeos de vicilina recebidos como presente nupcial de mais de um macho. O cimento dos ovos foi coletado, as proteínas do cimento separadas por eletroforese e reconhecidas como sendo vicilina por Western blot. Obtendo uma banda abaixo do trímero de vicilina similar à vista em trabalhos anteriores, além de duas bandas das subunidades menores da vicilina reconhecidas pelos anticorpos anti-vicilina. Os resultados obtidos confirmam que o hábito poliândrico das fêmeas na espécie, possivelmente contribui para a defesa dos ovos através do aproveitamento de vicilina e peptidios antimicrobianos passados como presente nupcial seminal pelos machos.This work shows that the vicilin, a seed storage protein, present in the diet of the beetle Callosobruchus maculatus after being internalized is processed by males. It is transfered to the females during mating through the seminal fluid as a nuptial gift. Third instar larvae were put inside artificial seeds to feed. The artificial seeds were prepared with Vigna unguiculata flour FITC or RITC marked vicilin 0,5% inside gelatin caps. Males that passed through the diets were separated while still virgin. Controled mating with non-marked virgin females, taken from the colony, with marked vicilin fed males were done. At a first moment each female mated with a marked male, they were put in a covered flask with seeds to lay eggs. The next day a second mating occured, now with a male with different marking, females were left egglaying in flasks with seeds. The eggs were collected after the second mating and laid over glass slides for confocal microscopy. The two markings were observed in the egg surface showing the contribuition of both males in the peptides deposited over the eggs laid by the females, confirming that females use vicilin peptides received as a nuptial gift from more than one male. The eggs cement was collected, it´s proteins separeted by electrophoresis and recognized as vicilin by Western blot. A band was obtained below the vicilin trimer similar to one seen in earlier works, as well as two bands of vicilin´s smaller subunits recognized by the antivicilin antibody. The results obtained confirmed that the poliandric habit of females in this species, possibly contributes to egg defense through the usage of vicilin and antimicrobial peptides passed as a seminal nuptial gift by males.Florianópolis, SC.Silva, Carlos PeresUniversidade Federal de Santa CatarinaLinhares, Ricardo Thomé2015-05-06T20:56:05Z2015-05-06T20:56:05Z2013info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/bachelorThesis38application/pdfhttps://repositorio.ufsc.br/xmlui/handle/123456789/132695porreponame:Repositório Institucional da UFSCinstname:Universidade Federal de Santa Catarina (UFSC)instacron:UFSCinfo:eu-repo/semantics/openAccess2015-05-06T20:56:05Zoai:repositorio.ufsc.br:123456789/132695Repositório InstitucionalPUBhttp://150.162.242.35/oai/requestopendoar:23732015-05-06T20:56:05Repositório Institucional da UFSC - Universidade Federal de Santa Catarina (UFSC)false
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