O efeito da composição lipídica da membrana no estudo do mecanismo de ação do peptídeo antimicrobiano esculentina 1b (1-18)

• Autor(a) principal: Silva, Isabela Moreira [UNIFESP]
• Data de Publicação: 2019
• Tipo de documento: Tese
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UNIFESP
• Texto Completo: https://sucupira.capes.gov.br/sucupira/public/consultas/coleta/trabalhoConclusao/viewTrabalhoConclusao.jsf?popup=true&id_trabalho=7778871; https://repositorio.unifesp.br/handle/11600/59620
• topic: Peptídeo Antimicrobiano; Membrana; Ressonância Paramagnética Eletrônica; Calorimetria; Fluorescência; Antimicrobial Peptide; Membrane; Electronic Paramagnetic Resonance; Calorimetry; Fluorescence

Os peptídeos antimicrobianos são compostos que fazem parte da imunidade inata de diferentes organismos. Eles apresentam como característica a presença de aminoácidos catiônicos e hidrofóbicos que auxiliam na interação com a membrana plasmática das células. Esculentina 1b é um peptídeo antimicrobiano que apresenta 46 resíduos de aminoácidos, cuja região composta pelos primeiros 18 resíduos apresenta atividade bactericida semelhante ao peptídeo completo, sem apresentar atividade hemolítica. O modo de ação do peptídeo antimicrobiano Esc 1b (1-18) foi estudado usando membranas miméticas compostas por fosfolipídeos zwiteriônios e aniônicos em diferentes estados de fluidez. Para verificar a interação do peptídeo com modelos de membranas foram feitas medidas de cinética de vazamento de carboxifluoresceína e calorimetria de titulação isotérmica em LUVs, e cinética de interação em monocamadas de Langmuir. Para observar a influência de Esc 1b (1-18) na bicamada foram utilizadas medidas de calorimetria diferencial de varredura e ressonância paramagnética eletrônica, e o efeito de agregação causado pelo peptídeo nas membranas foi verificado através dos estudos de espalhamentos de luz estático e dinâmico e potencial Zeta. Para determinar a estrutura secundária de Esc 1b (1-18) na presença de vesículas e monocamadas foram realizadas medidas de dicroísmo circular e espectroscopia de reflexão e absorção do infravermelho com modulação da polarização, respectivamente. De maneira geral os resultados de vazamento de carboxifluoresceína. calorimetria de titulação isotérmica e interação em monocamadas mostraram que o peptídeo interage preferencialmente com membranas negativamente carregadas no estado de maior fluidez. Além disso, foi observado que Esc 1b (1- 18) causa maior interferência na transição de fase nas membranas de DPPG e que o peptídeo é capaz de se inserir profundamente apenas em membranas negativamente carregadas. Por fim, foi observado que o peptídeo se estrutura em α-hélice apenas na presença de membranas carregadas. Portanto, o peptídeo antimicrobiano Esc 1b (1-18) apresenta alta seletividade por membranas negativamente carregadas.