Análise do potencial de virulência de amostras de Escherichia coli do sorotipo O51:H40

• Autor(a) principal: Moreira, Fabiana Campiteli [UNIFESP]
• Data de Publicação: 2009
• Tipo de documento: Tese
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UNIFESP
• Texto Completo: http://repositorio.unifesp.br/handle/11600/10428
• topic: Escherichia coli enteropatogênica; Diarréia infantil; Translocação bacteriana

Escherichia coli enteropatogênica (EPEC) constitui um importante patotipo de E. coli envolvido com doença diarréica. EPEC é dividida em dois sub-grupos, EPEC típica (tEPEC), portadora do plasmídio EAF (EPEC adherence factor), e EPEC atípica (aEPEC), desprovida desse plasmídio. EPEC produz lesão attaching-effacing (A/E) em células intestinais, determinada por genes contidos no locus of enterocyte effacement (LEE). LEE codifica um sistema de secreção tipo 3 (SST3), a adesina de membrana externa Intimina e várias proteínas efetoras que incluem Tir (receptor translocado de intimina). Entre as amostras de aEPEC isoladas em nosso meio, aquelas pertencentes ao sorotipo O51:H40 têm sido as mais frequentes. Em estudo anterior, analisamos 11 amostras de E. coli do sorotipo O51:H40 que apresentavam a região LEE aparentemente completa, 70 por cento das quais foram capazes de produzir a lesão A/E, conforme indicado pela positividade em um teste in vitro, que avalia o acúmulo de actina decorrente da lesão A/E. Para ampliar o conhecimento do potencial enteropatogênico dessas amostras, neste estudo, foram investigadas diversas propriedades genotípicas e fenotípicas, bem como o comportamento in vivo de amostras selecionadas em coelho e em rato. Foram pesquisados genes recém descritos em E. coli (lpfA1, cifA, ldaG, espJ, toxB, espM e espT) e a ocorrência de fosforilação de resíduos de tirosina na molécula Tir, em cultivos de células HeLa e células intestinais diferenciadas T84. Os resultados obtidos confirmam que o sorotipo O51:H40 contém amostras com potencial enteropatogênico, uma vez que 75 por cento das amostras testadas produziram lesão A/E em alça ileal de coelhos in vivo. Além disto, a aEPEC 1711-4, como a tEPEC E2348/69, apresentou capacidade significativa de translocar a mucosa intestinal em ensaios de translocação bacteriana (TB) em ratos, sendo que a aEPEC 1711-4 provocou também danos à perfusão tecidual. A ausência de translocação observada com mutante defectivo na montagem do SST3 (1711-4:escN- ) sugeriu que proteínas efetoras secretadas são importantes para a ocorrência do fenômeno. Em conclusão, o sorotipo O51:H40 de E. coli compreende amostras potencialmente enteropatogênicas, a maioria das quais deve ser classificada como aEPEC; o sobrecrescimento de pelo menos uma amostra de aEPEC, em intestino de rato, pode levar à translocação e a danos à microcirculação sistêmica..