Avaliação morfológica de diferentes técnicas de desepitelização da membrana amniótica humana
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| Data de Publicação: | 2007 |
| Outros Autores: | , , , |
| Tipo de documento: | Artigo |
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| Título da fonte: | Repositório Institucional da UNIFESP |
| Texto Completo: | http://dx.doi.org/10.1590/S0004-27492007000300005 http://repositorio.unifesp.br/handle/11600/3745 |
Resumo: | PURPOSE: To evaluate the morphological features of the amniotic membrane denuded by different techniques. METHODS: Human amniotic membrane was collected at the time of delivery, fixed in increasing concentrations of glycerol (0-50% in DMEM) and preserved at -80ºC until the time of use. The study consisted of 4 groups: intact epithelium (control) and denuded by trypsin (2 mg/mL at 1:250), dispase (1.2 U/mL in Mg2+ and Ca2+ free Hank's balanced salt solution) or ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA), 0.02%. Specimens were submitted to electron (scanning and transmission) microscopy analysis. RESULTS: Scanning electron microscopy disclosed intact epithelium in the control group and its absence in the amniotic membranes denuded by trypsin and dispase. In those denuded by ethylenediaminetetraacetic acid there were areas with and without epithelium. When assessed by transmission electron microscopy, the epithelium was intact and firmly adhered to the basement membrane by hemidesmossomes in controls and in parts of ethylenediaminetetraacetic acid group. There were only collagen fibers in the dispase- and trypsin-treated groups. CONCLUSIONS: Trypsin and dispase treatment of the amniotic membrane may cause complete denuding of the epithelium and basement membrane whereas ethylenediaminetetraacetic acid may leave some intact epithelium-areas and partially destroy the basement membrane in others. |
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Avaliação morfológica de diferentes técnicas de desepitelização da membrana amniótica humanaMorphological assessment of different amniotic membrane epithelial denuding techniquesAmnionEdetic acidCorneal diseasesTrypsinEndopeptidasesMicroscopyelectronÂmnioÁcido edéticoDoenças da córneaTripsinaEndopeptidasesMicroscopia eletrônicaPURPOSE: To evaluate the morphological features of the amniotic membrane denuded by different techniques. METHODS: Human amniotic membrane was collected at the time of delivery, fixed in increasing concentrations of glycerol (0-50% in DMEM) and preserved at -80ºC until the time of use. The study consisted of 4 groups: intact epithelium (control) and denuded by trypsin (2 mg/mL at 1:250), dispase (1.2 U/mL in Mg2+ and Ca2+ free Hank's balanced salt solution) or ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA), 0.02%. Specimens were submitted to electron (scanning and transmission) microscopy analysis. RESULTS: Scanning electron microscopy disclosed intact epithelium in the control group and its absence in the amniotic membranes denuded by trypsin and dispase. In those denuded by ethylenediaminetetraacetic acid there were areas with and without epithelium. When assessed by transmission electron microscopy, the epithelium was intact and firmly adhered to the basement membrane by hemidesmossomes in controls and in parts of ethylenediaminetetraacetic acid group. There were only collagen fibers in the dispase- and trypsin-treated groups. CONCLUSIONS: Trypsin and dispase treatment of the amniotic membrane may cause complete denuding of the epithelium and basement membrane whereas ethylenediaminetetraacetic acid may leave some intact epithelium-areas and partially destroy the basement membrane in others.OBJETIVO: Avaliar as características morfológicas da membrana amniótica desepitelizada por diferentes técnicas. MÉTODOS: A membrana amniótica humana foi coletada no momento do parto, fixada em concentrações crescentes de glicerol (0-50% em DMEM) e preservada a 80°C até a hora de ser usada. O estudo consistiu de 4 grupos: epitélio intacto (controle) e membranas desepitelizadas pela tripsina (2 mg/mL a 1:250), dispase (1,2 U/mL em solução salina balanceada de Hank livre de Mg2+ e Ca2+) e ácido etilenodiaminotetra-acético (EDTA), 0,02%). As amostras foram submetidas à análise por microscopia eletrônica (de varredura e de transmissão). RESULTADOS: A microscopia eletrônica de varredura mostrou epitélio intacto no grupo controle e sua ausência nas membranas amnióticas desepitelizadas pela tripsina e pela dispase. Naquelas tratadas com o ácido etilenodiaminotetra-acético, havia áreas com e sem epitélio. Quando avaliadas pela microscopia eletrônica de transmissão, o epitélio estava intacto e firmemente aderido à membrana basal através de hemidesmossomos nos grupos controle e em parte do ácido etilenodiaminotetra-acético. Havia apenas fibras colágenas nas membranas tratadas com dispase e tripsina. CONCLUSÕES: O tratamento da membrana amniótica com tripsina e dispase pode causar completa retirada do epitélio e da membrana basal, ao passo que o ácido etileno- diaminotetra-acético pode preservar áreas com epitélio intacto e parcialmente destruir a membrana basal em outras.Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP) Instituto da Visão Centro Avançado de Superfície OcularUniversidade Federal de São Paulo (UNIFESP) Instituto da VisãoUniversidade Federal de São Paulo (UNIFESP) Departamento de OftalmologiaUniversidade Federal de São Paulo (UNIFESP) Centro de Microscopia EletrônicaUNIFESP, Instituto da Visão Centro Avançado de Superfície OcularUNIFESP, Instituto da VisãoUNIFESP, Depto. de OftalmologiaUNIFESP, Centro de Microscopia EletrônicaSciELOConselho Brasileiro de OftalmologiaUniversidade Federal de São Paulo (UNIFESP)Melo, Gustavo Barreto de [UNIFESP]Gomes, José Álvaro Pereira [UNIFESP]Glória, Maria Aparecida da [UNIFESP]Martins, Maria Cristina [UNIFESP]Freymüller-Haapalainen, Edna [UNIFESP]2015-06-14T13:36:57Z2015-06-14T13:36:57Z2007-06-01info:eu-repo/semantics/articleinfo:eu-repo/semantics/publishedVersion407-411application/pdfhttp://dx.doi.org/10.1590/S0004-27492007000300005Arquivos Brasileiros de Oftalmologia. Conselho Brasileiro de Oftalmologia, v. 70, n. 3, p. 407-411, 2007.10.1590/S0004-27492007000300005S0004-27492007000300005.pdf0004-2749S0004-27492007000300005http://repositorio.unifesp.br/handle/11600/3745porArquivos Brasileiros de Oftalmologiainfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Institucional da UNIFESPinstname:Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)instacron:UNIFESP2024-08-05T16:22:19Zoai:repositorio.unifesp.br/:11600/3745Repositório InstitucionalPUBhttp://www.repositorio.unifesp.br/oai/requestbiblioteca.csp@unifesp.bropendoar:34652024-08-05T16:22:19Repositório Institucional da UNIFESP - Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)false |
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