Estudo farmacológico dos receptores purinérgicos de átrios de ratos normotensos e espontaneamente hipertensos

• Autor(a) principal: Rodrigues, Juliano Quintella Dantas [UNIFESP]
• Data de Publicação: 2016
• Tipo de documento: Tese
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UNIFESP
• Texto Completo: https://sucupira.capes.gov.br/sucupira/public/consultas/coleta/trabalhoConclusao/viewTrabalhoConclusao.jsf?popup=true&id_trabalho=4542305; http://repositorio.unifesp.br/handle/11600/48564
• topic: Hipertensão; Receptor purinérgico; Noradrenalina

A hipertensão arterial sistêmica é uma doença de alta prevalência e mortalidade e dentre outros fatores, disfunções da neurotransmissão simpática foram descritas como importantes para sua gênese. O terminal nervoso simpático, além da noradrenalina, libera o neurotransmissor ATP, o qual ativa os receptores purinérgicos e modula a função cardíaca, per se ou através do seu metabolito adenosina. Portanto, a hipótese do presente projeto estabelece que alterações funcionais no sistema purinérgico P1 (A1, A2A, A2B e A3) e P2 (P2X e P2Y) possam estar relacionadas à disfunção cardíaca observada na hipertensão. Assim, este trabalho teve como objetivo estudar a ação cronotrópica da adenosina no átrio direito e identificar os receptores purinérgicos responsáveis pelo efeito inotrópico bifásico do ATP no átrio esquerdo de animais hipertensos. Para investigar o cronotropismo cardíaco utilizamos a preparação de átrio direito que contém o nó sinoatrial, marca-passo primário do coração, de ratos Wistar machos normotensos (NWR) e espontaneamente hipertensos (SHR). Nossos resultados mostraram que tanto a adenosina, agonista endógeno e não seletivo dos receptores P1, como o CPA, agonista seletivo dos receptores A1, diminuíram o cronotropismo do átrio direito de NWR e SHR, de forma concentração-dependente até a ausência de contração. Os efeitos cronotrópicos negativos da adenosina e do CPA apresentaram-se potencializados no átrio direito do animal hipertenso. Nossos resultados mostraram ainda a incubação simultânea dos antagonistas seletivos dos receptores A2 (ZM241385) e A3 (MRS1523) não modificou o efeito cronotrópico da adenosina, sugerindo a participação exclusiva do receptor A1 na resposta cronotrópica negativa. Estes resultados são corroborados pelo fato do DPCPX, antagonista seletivo do receptor A1, inibir a ação do CPA no átrio direito de ambas as linhagens. Além disso, o tratamento do átrio direito com a toxina pertussis (PTX) reduziu em 80% o efeito cronotrópico negativo da adenosina no átrio direito do NWR, indicando o envolvimento da proteína Gi e da inibição da AC no efeito cronotrópico negativo da adenosina em tecido de rato normotenso. Esse efeito inibitório da PTX não foi observado em átrio de SHR, sugerindo uma disfunção da via da proteína Gi. Nossos resultados mostraram ainda a participação das enzimas fosfolipase C ? (P C ?) e adenilil ciclase (AC) na sinalização do receptor A1, visto que, em átrios direitos de NWR e SHR, o efeito cronotrópico negativo do CPA foi potencializado pelo inibidor da PL C ? U73122 e bloqueado pelo inibidor da AC NKY80. Numa segunda etapa, para investigar o inotropismo cardíaco utilizamos átrio esquerdo de NWR e SHR adultos submetidos à estimulação elétrica transmural (2Hz, 5 ms). Nossos resultados mostram que o ATP produziu um efeito inotrópico negativo fásico de menor amplitude nas preparações de animais hipertensos seguindo de um aumento da força de contração de maior amplitude no átrio esquerdo do SHR. Tanto no átrio esquerdo de NWR como de SHR, a diminuição do inotropismo promovida pelo ATP foi relacionada majoritariamente à ativação direta de receptores A1, sendo descartada a participação do metabólito adenosina. Já o efeito inotrópico positivo do ATP foi decorrente da ativação de receptores P2, visto que foi abolido pelo antagonista não seletivo suramina. Nossos dados mostram ainda que o aumento da força de contração produzido pelo ATP independe da liberação de noradrenalina pelo terminal nervoso simpático, uma vez que esse efeito não foi modificado pelo antagonista dos adrenoceptores ? propranolol. Por outro lado, a desnervação química do terminal nervoso simpático promovida pela 6-hidroxidopamina aboliu o efeito inotrópico positivo do ATP no átrio esquerdo de NWR e SHR, indicando que a resposta inotrópica positiva do ATP depende de componentes pré-sinápticos. Além disso, o ?-?-Me-ATP (100 µM), análogo do ATP e agonista seletivo dos receptores P2X2 e P2X3, produziu somente aumento do inotropismo atrial em ambas as linhagens, indicando que o efeito inotrópico positivo do ATP é resulta da ativação exclusiva dos receptores pré-sinápticos P2X2/ P2X3. Por fim, o antagonista seletivo do receptor P2Y1 MRS 2179 potencializou o efeito inotrópico positivo do ATP, sugerindo que o receptor P2Y1 tem localização pré-sináptica e função inibitória. Em conjunto, os resultados apresentados mostram que a resposta cronotrópica negativa da adenosina apresenta-se potencializada no átrio direito do SHR, provavelmente, devido a um aumento da sinalização dependente da proteína Gi. Já o efeito inotrópico positivo do ATP apresenta-se aumentado no átrio esquerdo do SHR, processo relacionado à ação pré-sináptica dependente da liberação de neurotransmissores não adrenérgicos e da ativação dos receptores P2X2 ou P2X3 pré-sinápticos facilitatórios e P2Y1 inibitório.