Caracterização biofísica de vesículas catiônicas de dodab contendo C24:1 beta-glicosilceramida (βGlcCer)

• Autor(a) principal: Martins, Leticia De Souza [UNIFESP]
• Data de Publicação: 2019
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UNIFESP
• Texto Completo: https://sucupira.capes.gov.br/sucupira/public/consultas/coleta/trabalhoConclusao/viewTrabalhoConclusao.jsf?popup=true&id_trabalho=7654337; https://repositorio.unifesp.br/handle/11600/59563
• topic: Brometo De Dioctadecildimetilamônio; Glicolipídio; Calorimetria Diferencial De Varredura; Ressonância Paramagnética Eletrônica; Microscopia De Fluorescência; Dioctadecyldimethylammonium Bromide; Glycolipid; Differential Scanning Calorimetry; Electron Paramagnetic Resonance; Fluorescence Microscopy; Adjuvant

Objetivo: Caracterizar a estrutura de vesículas de DODAB contendo βGlcCer usando as técnicas de calorimetria diferencial de varredura (DSC), espectroscopia de ressonância paramagnética eletrônica (EPR) e de microscopia de fluorescência. Métodos: Vesículas puras de DODAB, βGlcCer, e também vesículas mistas de DODAB contendo βGlcCer, foram preparadas a partir de filmes lipídicos resultantes da evaporação de soluções de clorofórmio:metanol. Foram feitos os experimentos de EPR, DSC e os ensaios de microscopia de fluorescência utilizando frações molares de 5 mol%, 9 mol% e 16 mol % de βGlcCer em relação a concentração total de lipídios. Resultados: Foi mostrado que βGlcCer desestabiliza a fase gel das vesículas de DODAB ao diminuir o empacotamento desta fase. Dessa forma, βGlcCer induz uma diminuição da temperatura e da cooperatividade de transição de fase das vesículas de DODAB, como mostrado nos termogramas de DSC. Os espectros de EPR também mostraram que o βGlcCer induziu um aumento na ordem e / ou rigidez da fase fluida de DODAB. Apesar de suas diferentes estruturas, um efeito similar de afrouxamento da fase gel e enrijecimento da fase fluida foi observado quando frações molares baixas de colesterol foram incorporadas às vesículas de DODAB. Conclusão: Foi constatado que βGlcCer é completamente miscível com DODAB em todas as frações testadas, já que nenhum domínio foi observado pelas técnicas de microscopia de fluorescência e de EPR. A caracterização estrutural de vesículas de DODAB contendo βGlcCer pode ser importante para o desenvolvimento de novas ferramentas imunoterapêuticas tais como adjuvantes de vacinas.