Efeito da pentoxifilina e do precondicionamento isquêmico na isquemia e reperfusão intestinal em ratos: estudo morfológico e biomolecular
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Data de Publicação: | 2016 |
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Resumo: | Objetivo. Investigar as evidências histológicas, imuno-histoquímicas e moleculares em intestino delgado de ratos submetidos à isquemia e reperfusão, tratados pelo precondicionamento isquêmico e com pentoxifilina. Métodos: Foi utilizada uma amostra de 30 ratos EPM-1 Wistar distribuídos em 5 grupos, dos quais utilizou-se o clampeamento da artéria mesentérica superior para os procedimentos de isquemia e reperfusão. Os grupos foram composto por 6 ratos denominados: Simulado (controle laparotomia); Isquemia e reperfusão (IR) com solução salina 0,9% (ss); isquemia e reperfusão com pentoxifilina (IRptx); precondicionamento isquêmico (PCI) e isquemia e reperfusão com solução salina (PCI_IRss) e precondicionamento isquêmico com isquemia e reperfusão e pentoxifilina (PCI_IRptx). Nos grupos IR promoveu-se isquemia de 30 minutos e reperfusão de 60 minutos. O tempo utilizado na PCI_IR, foi 5 minutos de isquemia e 5 minutos de reperfusão com IR de 90 minutos. A pentoxifilina foi aplicada na dose de 80 mg/kg e a solução salina 0,9% (0,1mL/dose), 5 minutos antes da isquemia de 30 minutos. Retiraram-se segmentos do intestino delgado para estudo histológico (coloração H.E.), imuno-histoquímico e molecular. Foram utilizados na estatística, análise descritiva dos dados, análise de variância (ANOVA) ou Kruskall-Wallis e teste pos hoc Bonferroni. Resultados: O precondicionamento isquêmico e pentoxifilina preservaram a estrutura celular epitelial das vilosidades intestinais. Não foi observada diferença entre as médias do escore de lesão PCI_IRss e PCI_IR com pentoxifilina. Na imuno-histoquímica a caspase-3 apresentou reação mais intensa para IR com solução salina 0,9%. E a Bcl-2 foi positiva sem diferença significante entre as médias dos procedimentos. Na análise molecular pela RT-PCR em tempo real observou-se: maior expressão estatisticamente significante de iNOS em IRss e de eNOS no tratamento PCI e pentoxifilina. Conclusões: Os tratamentos pentoxifilina e PCI foram eficazes na preservação das células do intestino delgado submetido à isquemia e reperfusão. Quando associadas as estratégias, não houve sinergismo. |
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Oliveira, Teresinha Regina Ribeiro de [UNIFESP]Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)http://lattes.cnpq.br/5780852783167227Taha, Murched Omar [UNIFESP]São Paulo2018-07-30T11:44:42Z2018-07-30T11:44:42Z2016-05-31https://sucupira.capes.gov.br/sucupira/public/consultas/coleta/trabalhoConclusao/viewTrabalhoConclusao.jsf?popup=true&id_trabalho=3696782OLIVEIRA, Teresinha Regina Ribeiro de. Efeito da pentoxifilina e do precondicionamento isquêmico na isquemia e reperfusão intestinal em ratos: estudo morfológico e biomolecular. 2016. 64 f. Tese (Doutorado em Medicina Translacional) - Escola Paulista de Medicina, Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), São Paulo, 2016.https://repositorio.unifesp.br/handle/11600/47535Tese - versão final - Teresinha Regina Ribeiro de Oliveira.pdfObjetivo. Investigar as evidências histológicas, imuno-histoquímicas e moleculares em intestino delgado de ratos submetidos à isquemia e reperfusão, tratados pelo precondicionamento isquêmico e com pentoxifilina. Métodos: Foi utilizada uma amostra de 30 ratos EPM-1 Wistar distribuídos em 5 grupos, dos quais utilizou-se o clampeamento da artéria mesentérica superior para os procedimentos de isquemia e reperfusão. Os grupos foram composto por 6 ratos denominados: Simulado (controle laparotomia); Isquemia e reperfusão (IR) com solução salina 0,9% (ss); isquemia e reperfusão com pentoxifilina (IRptx); precondicionamento isquêmico (PCI) e isquemia e reperfusão com solução salina (PCI_IRss) e precondicionamento isquêmico com isquemia e reperfusão e pentoxifilina (PCI_IRptx). Nos grupos IR promoveu-se isquemia de 30 minutos e reperfusão de 60 minutos. O tempo utilizado na PCI_IR, foi 5 minutos de isquemia e 5 minutos de reperfusão com IR de 90 minutos. A pentoxifilina foi aplicada na dose de 80 mg/kg e a solução salina 0,9% (0,1mL/dose), 5 minutos antes da isquemia de 30 minutos. Retiraram-se segmentos do intestino delgado para estudo histológico (coloração H.E.), imuno-histoquímico e molecular. Foram utilizados na estatística, análise descritiva dos dados, análise de variância (ANOVA) ou Kruskall-Wallis e teste pos hoc Bonferroni. Resultados: O precondicionamento isquêmico e pentoxifilina preservaram a estrutura celular epitelial das vilosidades intestinais. Não foi observada diferença entre as médias do escore de lesão PCI_IRss e PCI_IR com pentoxifilina. Na imuno-histoquímica a caspase-3 apresentou reação mais intensa para IR com solução salina 0,9%. E a Bcl-2 foi positiva sem diferença significante entre as médias dos procedimentos. Na análise molecular pela RT-PCR em tempo real observou-se: maior expressão estatisticamente significante de iNOS em IRss e de eNOS no tratamento PCI e pentoxifilina. Conclusões: Os tratamentos pentoxifilina e PCI foram eficazes na preservação das células do intestino delgado submetido à isquemia e reperfusão. Quando associadas as estratégias, não houve sinergismo.Objective: To investigate histological, immunohistochemistry and molecular changes in small intestine of rats submitted to ischemia and reperfusion, handled by ischemic preconditioning and pentoxifylline. Methods: It used a sample of 30 Wistar rats EPM- 1, distributed in 5 groups, which used the superior mesenteric artery clamping to the procedures of ischemia and reperfusion. The groups were composed of 6 rats and named: Sham (laparotomy control); Ischemia and reperfusion with 0,9% saline (IRss); ischemia and reperfusion with pentoxifylline (IR_ptx); Ischemic preconditioning and ischemia and reperfusion with 0,9% salina solution (PCI_IR ss); Ischemic preconditioning and ischemia and reperfusion with pentoxifyline (PCI_IRptx). IR group ischemic time was 30 minutes and reperfusion 60 minutos. PCI time was 5 minutes ischemia and 5 minutes reperfusion to 90 minutes followed IR. The Pentoxifylline has been applied at a dose of 80 mg/kg and 0,9% saline solution (0,1 ml /dose), 5 minutes before ischemia of 30 minutes. Preconditioning groups, before the 30 minutes of ischemia, 5 minutes of ischemia and 5 minutes of reperfusion. Pulled out segments of the small intestine to a histological (staining), immunohistochemical and molecular. Were used in statistics, descriptive analysis of the data, analysis of variance (ANOVA) or Kruskall-Wallis test pos hoc ? Bonferroni. Results: Ischemic preconditioning and Pentoxifylline preserved the intestinal villus epithelial cell structure. No difference was observed between the PCI and PCI with Pentoxifylline average score. In Immunohistochemistry the caspase-3 showed more intense reaction to IR with 0,9% saline solution treatment. The Bcl-2 was positive without significant difference among averages. Molecular analysis by RT-qPCR for genes expression eNOS and iNOS was observed: the highest expression of iNOS, was significant in IRss and eNOS in PCI and Pentoxifylline treatment. Conclusions: The treatments with Pentoxifylline and PCI have been effective in preserving the small bowel cells submitted to ischemia and reperfusion. When associated strategics, there was no synergism.Dados abertos - Sucupira - Teses e dissertações (2013 a 2016)64 f.porUniversidade Federal de São Paulo (UNIFESP)PentoxifilinaIsquemia e reperfusãoPrecondicionamento isquêmicoÓxido nítricoIntestino delgadoPentoxifyllineIschemia and reperfusionIschemic preconditioningNitric oxideSmall intestineEfeito da pentoxifilina e do precondicionamento isquêmico na isquemia e reperfusão intestinal em ratos: estudo morfológico e biomolecularEffect of Pentoxifylline and Ischemic Preconditioning on Ischemic and Reperfusion of Intestine in rats: study morphologic and biomolecularinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesisinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Institucional da UNIFESPinstname:Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)instacron:UNIFESPSão Paulo, Escola Paulista de Medicina (EPM)Medicina TranslacionalCiências da saúdeMedicinaORIGINALTeresinha Regina Ribeiro de Oliveira _Efeito pentoxifilina e PCI na IR ntestinal em ratos_Estudo morfológico e biomolecular - PDF A.pdfTeresinha Regina Ribeiro de Oliveira _Efeito pentoxifilina e PCI na IR ntestinal em ratos_Estudo morfológico e biomolecular - PDF A.pdfTese doutoradoapplication/pdf19712373${dspace.ui.url}/bitstream/11600/47535/2/Teresinha%20Regina%20Ribeiro%20de%20Oliveira%20_Efeito%20pentoxifilina%20e%20PCI%20na%20IR%20ntestinal%20em%20ratos_Estudo%20morfol%c3%b3gico%20e%20biomolecular%20-%20PDF%20A.pdf37be5aea4800fbb05472e122db38872cMD52open access11600/475352023-06-07 11:58:27.966open accessoai:repositorio.unifesp.br:11600/47535Repositório InstitucionalPUBhttp://www.repositorio.unifesp.br/oai/requestopendoar:34652023-06-07T14:58:27Repositório Institucional da UNIFESP - Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)false |
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