Efeito do dissacarídeo trissulfatado da heparina (DT) na morte neuronal desencadeada pela sobrecarga citoplasmática de cálcio

• Autor(a) principal: Chiarantin, Gabrielly Maria Denadai [UNIFESP]
• Data de Publicação: 2018
• Tipo de documento: Tese
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UNIFESP
• Texto Completo: https://sucupira.capes.gov.br/sucupira/public/consultas/coleta/trabalhoConclusao/viewTrabalhoConclusao.jsf?popup=true&id_trabalho=6326478; https://repositorio.unifesp.br/handle/11600/53044
• topic: Ave; Morte neuronal; Cálcio; Dissacarídeo trissulfatado; Sobrecarga citoplasmática de cálcio; Ave; Neuronal milk; Calcium; Trisulfated dysaccharide; Calcium cytoplasmic overload

Neurônios submetidos à hipóxia sofrem intensa sobrecarga citoplasmática de Ca2+. Altas concentrações de Ca2+ intracelular podem desencadear processos de morte celular ao longo do tecido neural, uma característica patológica do Acidente Vascular Encefálico (AVE). A homeostase do Ca2+ em neurônios envolve a regulação da concentração intracelular de Ca2+ ([Ca2+]i) pelo trocador Na+/Ca2+ (NCX), o qual desempenha papel importante no efluxo desse íon. Dados anteriores publicados por nosso grupo mostram que o Dissacarídeo Trissulfatado (DT), ΔU,2S-GlcNS,6S, produto da degradação enzimática da heparina, é capaz de acelerar a troca Na+/Ca2+ via NCX em hepatócitos e em células musculares lisas da aorta. O objetivo deste trabalho foi verificar se o DT é um agente neuroprotetor capaz de prevenir a morte neuronal pela redução da [Ca2+]i induzida pela sobrecarga citoplasmática de Ca2+. Na parte in vitro do projeto foi realizado a indução da morte neuronal por sobrecarga citoplasmática de Ca2+ em células de neuroblastoma murino (linhagem N2A), por diferentes indutores de elevação citoplasmática de Ca2+, como: ATP (via ativação do receptor purinérgico), Tapsigargina (via inibição Ca-ATPase (SERCA) do RE, Aspartato e Glutamato (via ativação NMDAR) na presença ou ausência de DT. Os resultados mostraram que o pré-tratamento com DT é capaz de reduzir a morte e aumentar a viabilidade neuronal desencadeada pela sobrecarga citoplasmárica de Ca2+. A análise do transiente citoplasmático de Ca2+, demonstrou que o DT atua de forma dose-dependente na redução da concentração do [Ca2+]i, e esse efeito do DT é bloqueado pelo inibidor de NCX, KBR7943. Diante destes dados preliminares, na parte in vivo do projeto foi realizada em modelo murino submetido a isquemia cortical por fototrombose, modelo de AVE. Os dados apontam que o pré-tratamento com DT in vivo é capaz de diminuir a área da lesão isquêmica, efeito bloqueado pelo antagonista de NCX, como também diminuir a morte apoptótica. Assim, propomos DT-NCX como um novo eixo terapêutico na prevenção da morte desencadeada por sobrecarga citoplasmática de cálcio.