Efeito de citocinas e toxina tetânica na vacinação gênica de tumores que expressam CEA com Scfv6C4

• Autor(a) principal: Zanetti, Bianca Ferrarini [UNIFESP]
• Data de Publicação: 2017
• Tipo de documento: Tese
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UNIFESP
• Texto Completo: https://sucupira.capes.gov.br/sucupira/public/consultas/coleta/trabalhoConclusao/viewTrabalhoConclusao.jsf?popup=true&id_trabalho=4997600; http://repositorio.unifesp.br/handle/11600/50510
• topic: Citocinas; Toxina Tetânica; Antígeno carcinoembrionário; Hibridiomas; ScfvC; Vacinas de DNA; Anticorpos de cadeia única; Cytokines; Tetanus toxin; Carcinoembryonic antigen; Hybridiomas; ScfvC; Vaccines, DNA; Single-chain antibodies

Introdução: Cânceres do cólon e reto têm alta incidência entre homens e mulheres e a prevenção e o tratamento são grandes desafios médicos e científicos. O antígeno carcinoembrionário (CEA) é o principal marcador tumoral destes cânceres. Previamente, o nosso grupo desenvolveu uma vacina de DNA contra tumores que expressam CEA, usando um mimético a CEA, a scFv6.C4, e sua eficácia, avaliada em camundongos transgênicos para CEA, mostrou 40 % de animais livre de tumor por mais de 100 dias e no restante o aumento de sobrevida foi entre 30 e 70% em relação ao grupo não vacinado. Objetivo: Avaliar o efeito adjuvante do IFNy (Interferon Gama), GM-CSF (Fator Estimulador da Colônias de Macrófagos e Granulócitos), FrC (Fragmento C da Toxina Tetânica) e IDUA (Alpha-L-Iduronidase) na vacinação gênica com scFv6.C4. Métodos: Camundongos C57BU6J-CEA2682 foram imunizados 4 vezes por eletroporação intramuscular com o vetor plasmidial uPPS/ scFv6.C4 sozinho, ou em combinação com vetares adjuvantes que expressam FrC, GM-CSF, IFNy ou IDUA. Os animais vacinados foram desafiados pela injeção subcutânea de células de adenocarcinoma de cólon murino, MC38-CEA, e o crescimento tumoral foi monitorado. As respostas imunes humoral e celular foram acessadas por ELlSA, imunocitoquímica, ELlSPOT, ensaio de proliferação celular e de citotoxicidade. Resultados: A imunização com scFv6.C4 induziu a geração de anticorpos anti-CEA, com título cerca de 4 vezes maior em relação ao soro pré-imune. Quando desafiados com as células MC38-CEA,' aproximadamente metade dos animais imunizados não desenvolveram tumor durante 80 dias de observação, e os demais apresentaram graus variados de retardo de crescimento tumoral. Os adjuvantes testados não levaram a aumento significativo no título de anticarpos, porém, os animais imunizados com scFv6.C4 e FrC ou IFNy tiveram aumento na sobrevida. Ensaios de resposta celulares mostraram um aumento significativo de resposta celular citotóxica, principalmente nos animais vacinados com o FrC. Conclusões: Imunização com scFv6.C4 em associação com adjuvantes FrC ou IFNy elevou efeito antitumoral via aumento de resposta celular citotóxica.